乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長。體外培養中,乳腺上皮細胞具有乳腺細胞的功能,可用于確定免疫標記物類型,這些細胞可被SV40病毒轉化,可用于研究正常乳腺細胞與乳腺癌細胞的區別,還是研究癌基因引起細胞轉化的重要材料。 1、操作步驟 ①取材。于產后2~7天在病房收集乳汁,用無菌水擦洗乳頭,用手壓乳房使乳汁流入無菌容器,每人可收集10~20ml乳汁,以1:1的比例與培養基混合,以利離心。 ②以1000~1500r/min 離心20min,仔細去除上清。 ③用培養基將細胞清洗2~4次,直至上清液不渾濁為止。 ④將離心洗滌的細胞沉淀,用培養基3~5ml制成......閱讀全文
原代細胞的培養與建系 細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離
乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長