一、基因敲降的前期準備工作相同 1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。 1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎(通常為48 hpf前的胚胎),提取總RNA,然后進行體外轉錄(RT)。 1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物,以1.2獲得的cDNA為模板,進行PCR擴增,確認目標基因在早期有表達。 二、MO法與CRISPRi法的敲降原理不同 2.1 MO是在轉錄后水平上敲降基因的功能(MO-Spl阻遏原始轉錄本的剪接,MO-Atg阻遏成熟轉錄本的翻譯)(基因轉錄后調控) 2.2 CRISPRi 是在轉錄水平上敲降基因的功能(抑制基因的轉錄)(基因轉錄水平的調控)。 敲降工具有效性驗證的方法不同 3.1 嗎啡啉敲降法(確認有效性)的技術路線 抑制翻譯的MO(MO-Atg)和抑制剪接的MO(MO-Spl)二者敲降基因的有效性評價方法不同。抑制剪接......閱讀全文
一、基因敲降的前期準備工作相同1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎(通常為48 hpf前的胚胎),提取總RNA,然后進行體外轉錄(RT)。1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物,以1.2獲得的cDNA為模板,進行PCR擴增,確認目標基因
一、基因敲降的前期準備工作相同 1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。 1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎(通常為48 hpf前的胚胎),提取總RNA,然后進行體外轉錄(RT)。 1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物,以1.2獲得的cDNA為模板,
一、基因敲降的前期準備工作相同 1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。 1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎(通常為48 hpf前的胚胎),提取總RNA,然后進行體外轉錄(RT)。 1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物,以1.2獲得的cDNA為模板,
實驗概要本實驗對斑馬魚導入含 EGFP的質粒,觀察其在動物體內的表達情況,在斑馬魚體內,綠色熒光蛋白從原腸胚到出苗期均能在熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光。主要試劑EGFP、綠色熒光蛋白基因、pEGFP-N2載體、E.coli主要設備試管、試管架、可調式微量加樣器、電泳儀、電泳槽、染色缸、42℃恒溫水浴箱
斑馬魚又叫藍條魚,因為其體表有暗藍色和銀色的類似于斑馬一樣的條紋而命名。斑馬魚屬于鯉科魚類,同屬鯉科的還有我們十分熟悉的鯉魚、鯽魚等。斑馬魚的體型較小,成魚體長約4-6厘米,而且成魚常年產卵且產卵量大,可達300-1000粒,還是體外受精并發育,因此十分適合進行實驗室的大規模養殖與篩選。斑馬魚這種原
一、概述斑馬魚是生長在印度、巴基斯坦淡水河流中的一種硬骨魚(鯉魚),成年魚全身僅長4-5厘米,因全身橫向分布著一道一道褐色的斑馬線而得名。斑馬魚很容易在實驗室飼養,一般3個月就可以達到生殖成熟期,雌魚每次產卵200枚左右,一生可產卵數千枚,斑馬魚所產之卵經24小時即可胚胎發育成熟,仔魚期只有1個月。
斑馬魚是基因研究中一種常用的模式生物。現在科學家可以對它們的基因組進行定向的編輯。 據Nature近日報導,在對脊椎動物和人類疾病的研究中,斑馬魚是一種重要的模式生物。它的卵是透明的,在體外孵化,它的繁殖周期很短,生長速度快,這些都意味著,很適合在生物生存的條件下對它的胚胎進行密切研究。而
美國杜克大學的研究人員,利用基因工程改造的方法,造成單個的皮膚細胞可以產生70種不同顏色的熒光。該研究發表在最近的《Developmental Cell》上。 該團隊并非是為了好玩才做成這樣五彩斑斕的斑馬魚,實際上,他們希望通過顏色標記來研究斑馬魚皮膚的愈合。利用顏色來標記細胞,可以讓斑馬魚皮
一、基因敲除的設計方案 1.1 基因的基本信息 確認斑馬魚基因的基本信息,包括名稱ID號等,一般會在NCBI等查詢。 1.2 分析基因結構、氨基酸序列等做生物學信息的分析 1.3分析蛋白質的保守結構功能域 通過綜合考慮,設計最佳的KO靶點。 1.4
急性白血病基因MLL編碼一個組蛋白甲基化轉移酶,能通過表觀遺傳機制調控Hox等基因的表達。它與70多種基因發生重排是導致急性淋巴細胞白血病(ALL)和急性骨髓性白血病(AML)發生的主要原因。由于小鼠mll基因敲除導致早期胚胎死亡,因此對于它在早期胚胎發育中的作用及其分子機制仍很不