(二)動物組織totalRNA的提取 1.根據表1選擇適當的組織量和相應的變性裂解液量,將變性裂解液分裝到RNase-free的50ml無菌離心管中,冰浴5分鐘。 2.將組織樣品放入變性裂解液中,在高速下勻漿15-30秒/次,直到看不見組織和細胞碎片。 3.根據表1加入適量2M的乙酸鈉(pH4.0),反復顛倒混勻4-5次。 4.根據表1加入適量酚/氯仿,加蓋顛倒混合4-5次,再搖動10秒鐘。 5.冰浴10分鐘。 6.4℃,12000g離心20分鐘。 7.小心轉移上層水相于另一個RNase-free的無菌離心管中,內含所需的RNA。蛋白質和DNA分別留在了有機相和中間層。 8.加入等體積的異丙醇,-20℃沉淀 30分鐘以上。 9.4℃,12000g離心20分鐘。 10.根據表1加入適量的變性裂解液重新溶解RNA。 11.加等體積的氯仿,加蓋顛倒混合4-5次,再搖動10秒鐘。 12.4℃,12000g離心20分鐘。 13.小心轉移上......閱讀全文
(第二代高通量測序技術-454) 轉錄組即特定細胞在某一功能狀態下所能轉錄出來的所有RNA的總和,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。與基因組不同的是,轉錄組的定義中包含了時間和空間的限定。同一細胞在不同的生長時期及生長環境下,其基因表達情況是不完全相同的。羅氏GS-FLX-Titanium第二代
(第二代高通量測序技術-454) 轉錄組即特定細胞在某一功能狀態下所能轉錄出來的所有RNA的總和,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。與基因組不同的是,轉錄組的定義中包含了時間和空間的限定。同一細胞在不同的生長時期及生長環境下,其基因表達情況是不完全相同的。羅氏GS-FLX-Titaniu
近年來,RNA修飾的研究已成為當今生命科學領域最前沿最熱門的研究方向之一,不斷有CNS的文章問世,m5C RNA修飾的分子機理研究越來越清晰,也不斷有學者探尋如何更全面的獲得貼近真實的m5C修飾的原貌。近期,來自德國的Frank Lyko和Mark Helm團隊在GENOME RESEARCH(
導讀近年來,RNA修飾的研究已成為當今生命科學領域最前沿最熱門的研究方向之一,不斷有CNS的文章問世,m5C RNA修飾的分子機理研究越來越清晰,也不斷有學者探尋如何更全面的獲得貼近真實的m5C修飾的原貌。近期,來自德國的Frank Lyko和Mark Helm團隊在GENOME RESEA
Genome Sequencer FLX (GS FLX)系統是羅氏454 公司的第二代測序臺,GS FLX的命名正是來源于其在多領域的靈活(flexible)應用。隨著該系統性能和應用領域的不斷提升和擴展,必將帶動整個測序領域的技術發展,
基因表達譜芯片可使是科研工作者實現在MRNA水平上同時平行研究成百上千乃至上萬條基因的表達關系。 它與傳統的研究基因表達的方法(如差異cDNA文庫篩選、Northern blot和PCR)相比較,可為使用者節省大量的研究經費和時間并獲得范圍更廣、更具有關聯性的研究結果。它的主要用途是用于大規
基因融合或易位可能產生功能改變的嵌合蛋白,也可能重新排列基因啟動子,通過激活原癌基因或抑制抑癌基因導致細胞信號通路紊亂,它們在腫瘤的發生過程中扮演著重要的角色。[1,3] 例如,BCR–ABL1融合會導致酪氨酸激酶活性以及下游PI3K和MAPK信號通路的組成型激活,使細胞逃避凋亡,實現無限增殖。