DNA的測序技術2
一:儀器:離心機,PCR儀,高壓電泳儀, 測序槽 ,搖床 ,染色,脫色缸易生物儀器庫:http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物試劑庫:http://www.ebioe.com/yp/product-list-43.html二:試劑:測序反應試劑 ,硝酸銀,硫代硫酸鈉,碳酸鈉,37%甲醛,冰乙酸,乙醇,硅化及反硅化試劑固定/終止液:10%冰乙酸染色液:混合2g硝酸銀,3ml 37%的甲醛于2l超純水中顯影液:在2l超純水中溶解60g碳酸鈉,冷卻至10-12℃,臨用前再加入3ml 37%甲醛,400μl 硫代硫酸鈉(10mg/ml)。現配現用。三:操作(一):測序反應操作1:標記4個0,5ml的微量離心管(G.A.T.C),每管加入2μl相應的d/ddNTP混合物,蓋上蓋子,保存于4℃或冰浴備用。2:另外準備離心管按下表分別加入各種試液任意模板平端 克窿到PGEM載體多克窿位點區......閱讀全文
DNA測序
實驗方法原理 ABI ?PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈DN
DNA測序
DNA測序(主要內容如下)·?????????Sequencing Gel Preparation·?????????Preparation of Templates?·?????????DNA Sequencing by the Dideoxy Method·?????????DNA Sequen
DNA測序
? ? ? ? ? ? ? ? 自動測序法 雙脫氧鏈末端終止法 非同位素銀染 鳥槍法 Maxam-Gilbert化學修飾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法
DNA測序PCR測序反應
1. 取0.2 ml的PCR管,用記號筆編號,將管插在顆粒冰中,按下表加試劑: 所加試劑 測定模板管 標準對照管 BigDye Mix 1 μl 1 μl 待測的質粒DNA 1 μl - pGEM-3Zf (+) 雙鏈DNA - 1 μl 待測DNA的正向引物 1 μl - M13(
DNA測序的測序技術
高通量測序技術(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術(Next-generation sequencing technology),以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定和一般讀長較短等為標志。根據發展歷史、影響力、測序原理和技術不同等,主要有以
DNA測序的測序原理
DNA測序的測序原理是:利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團,使延長的寡聚核苷酸
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今dna序列分析的主流。美國peabi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種型
DNA測序技術
目前還有一種基于半導體芯片的新一代革命性測序技術——Ion Torrent。該技術使用了一種布滿小孔的高密度半導體芯片, 一個小孔就是一個測序反應池。當DNA聚合酶把核苷酸聚合到延伸中的DNA鏈上時,會釋放出一個氫離子,反應池中的PH發生改變,位于池下的離子感受器感受到H+離子信號,H+離子信號再直
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今 dna序列分析的主流。美國pe abi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一
簡述DNA測序的測序規律
生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點,但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。 由于DNA上的每一個堿基出現在可變終止端的機會均等,因此上述每一組產物都是一些寡核苷酸混合物,這些寡核苷酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。 在可以區分長度僅