電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。 電泳現象早在1890年就被發現,1907年有人曾在瓊脂中電泳,研究白喉毒素。1937年由Tiselius制成界面電泳儀,并開始用于蛋白質的研究。從此,人們才逐漸認識到電泳技術對于生物科學研究是一種重要工具。然而,界面電泳結構復雜,價格昂貴難于普及。1940年左右,以紙為支持物的電泳問世后,電泳技術得到迅速發展。 電泳技術以支持物分,可分為:紙電泳,醋酸纖維素薄膜電泳,淀粉凝膠電泳,瓊脂(糖)凝膠電泳及聚丙烯酰胺凝膠電泳等。經凝膠形狀分有水平平板電泳,園盤柱狀電泳及垂直平板電泳。各種類型的電泳技術概括如表。 各......閱讀全文
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。電泳現
影響電泳技術的因素介紹
1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
電泳技術的影響因素
1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
單細胞凝膠電泳技術影響因素的分析
單細胞凝膠電泳(SCGE)又稱“彗星”法,是一種操作簡便、快速、敏感性高的DNA損傷與修復的檢測技術。盡管此法無需復雜的實驗條件,但在建立過程中可能受諸多因素的影響而難以得到較理想的結果,我們就其主要的影響因素作如下分析。1.瓊脂糖凝膠薄板的制備:該實驗需要制備兩層瓊脂糖凝膠薄板,應注意瓊脂糖的濃度
電泳技術基本原理和影響電泳速度的因素2
設:某物質(A)在電場中移動的距離為 另物質(B)的移動距離為 則:兩物質移動距離之差為: 3-3 (3-3)式指出物質A、B能否分離決定于兩者的遷移率。如兩者的遷移率相同,則不能分離;如有差別則能分離。實驗所選擇的條件如電壓和電泳時間與兩物質的分離距離成正比
電泳技術基本原理和影響電泳速度的因素1
電泳是指帶電粒子在電場中向異性電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質,當溶液pH值大于蛋白質等電點時,蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,反之則帶正電荷,向負極移動。當蛋白質溶液pH值與蛋白質的等電點相等,靜電荷為零則不移動。電泳技術常以有無支持物來分類。電泳中不用支持物在溶液中進行的電泳稱為自
影響電泳的因素
?不同的帶電顆粒在同一電場中泳動的速度不同。常用泳動度(或遷移率)來表 示。泳動度是指帶電? 顆粒在單位電場強度下泳的速度。影響泳動度的主要因素有:1、首先決定于帶顆粒的性質,即顆粒所帶凈電荷的數量,大小及形狀。 一般說來,顆粒帶凈電荷多,直徑小而接近于球形,則在電場中泳動速度快,反 之則慢。泳動
影響電泳的因素
1.電場強度?電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來分
影響電泳的因素
1.電場強度 電場強度也稱電位梯度,它是指單位長度的電位降。電場強度對電泳起重要的作用。電場強度愈大,則帶電粒子的移動愈快。根據所用電場強度大小,可將電泳分為常壓電泳(100~500V)和高壓電泳(500~10000V)。常壓電泳分離時間長,多用于分離蛋白質等大分子物質;高壓電泳分離時間短,多用來
電泳技術簡單介紹
電泳技術原理(以瓊脂糖凝膠電泳為例) 1、首先介紹使用的載體--瓊脂糖。 瓊脂糖是線性的多聚物,基本結構是1,3連結的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形
轉移電泳技術介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交,但瓊脂糖不適合于進行雜交操作,1975年,Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜(NC膜)上,再進行雜交的方法,被稱為Southern印跡法。隨后,Alwine等將類似方法用于RNA印跡,被戲稱為Northe
電泳技術的應用介紹
過程如何運作有機分子通常帶有正電荷或負電荷,這會使它們對電流作出響應。帶正電荷的分子向電場的負極遷移,帶負電荷的分子向正極遷移。電荷較大的分子在施加電荷時趨向于更快地移動并傳播更遠。但是,它們也會因摩擦而減慢,而摩擦又受分子的大小和形狀以及測試所用介質的影響。通過控制電流和測試介質提供的摩擦力,研究
電泳技術的應用介紹
1.聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應,可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開,并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法,可以檢出10-9~10-12g的樣品,且重復性好,沒有電滲作用。
電泳技術的過程介紹
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷的涂料離子移動到陰極,并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物,沉積于工件表面。它包括四個過程:電解(分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質,涂膜沉積
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳:在直流電場中,帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動,稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術,就是分離和鑒定混合物中帶電粒子(包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞,如細菌和紅細胞等)的技術。 ? 電泳裝置:由電泳儀(電源)和電泳槽(混合樣品電泳時的支持物)組成。 ? 電泳儀(電
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳:在直流電場中,帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動,稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術,就是分離和鑒定混合物中帶電粒子(包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞,如細菌和紅細胞等)的技術。?電泳裝置:由電泳儀(電源)和電泳槽(混合樣品電泳時的支持物)組成。 電泳儀(電源):為
毛細管電泳技術的分離因素
緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,在相同的pH下,不同緩沖試劑的分離效果不盡相同,有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度,從而影響Zeta電勢,而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高,離子強度增加,雙電層
影響膠體電泳的因素
影響電泳泳動度的因素:1、顆粒性質:顆粒的直徑、形狀及所帶靜電荷量對泳動速度有較大影響。一般來說顆粒帶凈電荷量越多,或其形狀越接近球形,在電場中的泳動速度就越快。反之則越慢。2、電場強度:電場強度是指每一厘米的電位降。又稱為電位梯度或電勢梯度。它對泳動速度起著十分重要的作用。電場強度越高,帶電顆粒的
凝膠電泳技術介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中,DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時,在電場作用下,迫使DNA變形擠過篩孔,而沿著泳動方向伸直,因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向,則DNA分子必須改變其構象,沿新的泳動方面伸直,而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
關于電泳技術的應用介紹
1.聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應,可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開,并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法,可以檢出10-9~10-12g的樣品,且重復性好,沒有電滲作用。
電泳技術
電泳技術簡介?電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。?????電泳技術的基本原理和分類
電泳技術
電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具 有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷, 在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在 蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。 電泳現象早在1
電泳技術
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。??? 電泳技術的基本原理和分類 在電場中,推
電泳技術的過程
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷的涂料離子移動到陰極,并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物,沉積于工件表面。它包括四個過程:電解(分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質,涂膜沉積
火箭電泳技術
(一)原理抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳,在電場作用下,抗原向一個方向移動,在移動的過程中,逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大,說明抗原量越多,二者呈正相關,因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。(二)材料與試劑1.0.05mol/L pH8.6巴比妥緩沖液配成2
火箭電泳技術
(一)原理??? 抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳,在電場作用下,抗原向一個方向移動,在移動的過程中,逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大,說明抗原量越多,二者呈正相關,因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。?(二)材料與試劑1.0.05mol/L pH8.6巴比妥緩
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團,它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電,在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團,它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電,在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以