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1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段； 2、為傳代培養創造條件； 3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。......閱讀全文
實驗概要本文介紹了原代細胞分離技術，包括懸浮細胞的分離方法和實體組織材料的分離方法。實體組織材料的分離方法有機械分散和消化分離兩種。實驗步驟1. 懸浮細胞的分離方法 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中，1000rpm/分鐘離心5分鐘。
一、原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。二、儀器、材料及試劑儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術
PriCells-原代細胞鑒定技術 一、形態學鑒定1. 在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態學特征2. 細胞染色檢查 ：a) 將無菌玻片置于細胞培養皿中，加細胞懸液后培養；b) 待細胞長滿玻片后取出，用PBS清洗，之后放于載玻片上，待其自然干燥；c)
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打
原代細胞（primary culture cell）是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的
1. 懸浮細胞的分離方法 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中，1000rpm/分鐘離心5分鐘。 2) 去掉上清，離心沉淀用無鈣、鎂的PBS清洗后1000rpm/分鐘離心5分鐘。此步重復兩次。 3) 用培養基重懸，調整適當細胞濃度后分瓶培養。 4) 如選用懸液中某種細胞，
原代細胞可用來轉染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以內的小分子 RNA 和 DNA，可轉染絕大多數原代細胞。目前，無論國外還是國內，原代細胞的核酸轉染都是個熱點難題，市場還缺乏真正有效的商品化的原代細胞核酸轉染試劑。原代細胞能夠高效轉染絕大多數原代細胞
（1）胰蛋白酶 純化法 ●在去除不需要的組織后，使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4 mm小片，通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀，去除上清液。重復清洗2到3次。 ●將盛有組織碎片的容器置于冰上，去除殘留的上清液。加入0.25%溶解在無鈣鎂的平衡鹽溶液中的胰蛋
原代細胞組成結構1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組
. 原代細胞凍存復蘇技術簡介在ELISPOT檢測的應用中，往往需要用到凍存的淋巴細胞樣品作為檢測細胞。由于ELISPOT檢測的是細胞的免疫功能，不僅僅需要保持細胞的存活率，而且還要保證細胞的功能不發生變化。傳統的細胞凍存方法通常是為了保存細胞株，對細胞存活率的要求不高，更沒考慮保持細胞原有