細胞外囊泡的檢測方法
外泌體具有磷脂雙分子膜結構,導致其沉降系數和蛋白質聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在特異性膜蛋白如CD9和CD81,前者被證實和腫瘤遷移有關,后者與丙型肝炎病毒的侵染有關。而因為外泌體具有這些顯著的易分離的特點,我們可以通過密度梯度離心,親和層析等方法對外泌體進行分離和純化。細胞外囊泡的檢測方法目前細胞外囊泡(EVs)的檢測方法主要有掃描電子顯微鏡、原子力顯微鏡、動態光散射技術、納米微粒追蹤分析術(NTA)、流式細胞儀和ELISA等,由于通量高、用時短、操作簡單,ELISA和流式細胞儀是比較常用的方法。ELISA方法容易受其他可溶性抗原的干擾,而且無法知道囊泡的大小、數量等信息;流式細胞儀不僅可以檢測囊泡的大小、數量,而且通過細胞特異的標記物染色可以檢測囊泡的來源,將囊泡進行分類,因此,流式細胞儀理論上是進行囊泡快速、高通量、多參數檢測的較優選擇。然而,傳統流式細胞儀針對的樣本主要是細胞,散射光的檢測極限通常是300-5......閱讀全文
Th細胞和Tc細胞到底是什么細胞
(1)Th細胞全稱輔助性T細胞(外文名helper T cell),能分泌多種細胞因子。Th均表達CD4,通常所稱的CD4+T細胞即指Th。HIV能特異性地破壞Th細胞,導致患者免疫系統癱瘓。(2)Tc 亦稱殺傷T細胞(killer T cell,TK),具有殺傷靶細胞活性的T細胞亞群。其表面標志為
設計“殺手細胞”消滅癌細胞
最近,康奈爾大學的生物醫學工程師,開發出一種專門的白細胞——被稱為“超級自然殺傷細胞”,能夠在淋巴結中找到癌細胞,并只有一個目的:摧毀它們。這一突破可停止癌癥轉移的發生,相關研究結果發表在本月的《Biomaterials》。本文資深作者、生物醫學工程教授Michael R. King說:“我們希
細胞技術專題:細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
細胞計數板怎么數細胞
實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。具體操作:1. 將計數板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計數板。2. 將細胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流
細胞因子活化免疫細胞
細胞因子腫瘤治療中的另一種方法是通過體外與免疫細胞共育,以使這些細胞活化,然后再回輸入患者體內,進行過繼免疫細胞療法。在這方面研究得最多的是淋巴細胞激活的殺傷細胞(lymphokine activated killercell,LAK)和腫瘤浸潤淋巴細胞(tumor infiltrating l
巨噬細胞和單核白細胞
·?????????Lymphocyte Transformation?(Donis-Keller lab)Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from antico
細胞診斷、腫瘤細胞分類要訣
細胞診斷要訣鏡下觀察要周到,每個視野不漏掉;看完背景看細胞,低倍高倍仔細瞧;先看形態和大小,核漿比例有多少;核的結構最重要,核質又多又粗糙;核膜核仁均異常,病理分裂偶見到;單個細胞不能斷,足量細胞方有效;只有成堆無分散,重復檢查再報告。
自然殺傷細胞的細胞表型
人NK細胞mIg-,部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性,表達IL-2受體β鏈 (P75,CD122),CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1(見表7-10)。一種穩定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子,1
細胞計數實驗——細胞計數實驗
實驗方法原理平板菌落計數法是將待測樣品經適當稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個細胞,取一定量的稀釋樣液接種到平板上,經過培養,由每個單細胞牛長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞。統計菌落數,根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。但是,由于待測樣品往往不易
免疫細胞的免疫細胞種類
T淋巴細胞即胸腺依賴淋巴細胞(thymus dependent lymphocyte)。亦可簡稱T細胞。來源于骨髓的多能干細胞(胚胎期則來源于卵黃囊和肝)。目前認為,在人體胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干細胞或前T細胞遷移到胸腺內,在胸腺激素的誘導下分化成熟,成為具有免疫活性的T細胞。成熟的T細
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡,乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此,有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞因子活化免疫細胞
細胞因子腫瘤治療中的另一種方法是通過體外與免疫細胞共育,以使這些細胞活化,然后再回輸入患者體內,進行過繼免疫細胞療法。在這方面研究得最多的是淋巴細胞激活的殺傷細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞。LAK是從腫瘤患者外周血中分離的單個核細胞,在體與IL-2共育,使之活化并增殖后,回輸入病人體內,可抑制腫瘤生長。
骨髓細胞包括哪些細胞
骨髓的原始細胞包括哪些細胞由于生理變異和不同的調查資料,正常骨髓象各系統各階段細胞比值變動范圍較大,所以正常骨髓象實際含義是正常范圍骨髓象,下降數據可做為骨髓涂片中各種血細胞正常值的參考:粒細胞系統占比例最大,約1/2強。一般原始粒細胞
細胞毒性T細胞簡介
細胞毒性T淋巴細胞(CTL),是白細胞的亞部,為一種特異T細胞,專門分泌各種細胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質具有殺傷作用,與自然殺傷細胞構成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。 細胞毒性T淋巴細胞又稱殺傷性T淋巴細胞,是機體抗腫瘤機制的重要環節,也是腫瘤免疫過繼療法主要效應細
白細胞是免疫細胞嗎?
所有的白細胞均參與免疫應答,它們包括:T細胞、B細胞、自然殺傷細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、粒細胞、肥大細胞,以及它們的前體細胞(例如胸腺細胞)、祖細胞、干細胞等,是免疫系統的功能單元。根據功能,免疫細胞可分為非特異性免疫細胞、特異性免疫細胞和抗原呈遞細胞。非特異性免疫細胞包括巨噬細胞、中性
巨噬細胞和粒細胞區別
中性粒細胞和巨噬細胞之間的主要區別在于中性粒細胞不是抗原呈遞細胞,而巨噬細胞是抗原呈遞細胞。?中性粒細胞和巨噬細胞是屬于先天免疫系統的白細胞,它們是抵抗病原體的主要初始防御者。 這些專門的細胞可以在稱為“diapedesis(滲出)”的過程中通過血管的小孔擠壓,終使它們能夠輕松到達感染區域。 通常,
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡,乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此,有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
裸細胞的細胞功能簡介
NK細胞能通過ADCC效應定向殺傷與IgG抗體結合的靶細胞,在機體的抗病毒感染和抗腫瘤免疫方面起著較重要的作用。在病毒感染的早期就能殺傷被病毒感染的靶細胞,在抗原特異性Tc細胞尚未形成前就能清除病毒。已發現T細胞和B細胞正常而NK細胞缺陷的個體,對病毒感染特別敏感,易患威脅生命的病毒感染。已知體
CHL細胞,正常倉鼠肺細胞
污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。3.購買之細胞冷凍管經解凍后
細胞化學詞匯細胞癌基因
中文名稱:細胞癌基因存在位置:正常的細胞基因組激活前作用:促進正常細胞生長增殖分化和發育激活后作用:使細胞發生惡性轉化定義:存在于正常的細胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發育等生理功能。細胞癌基因:存在于正常的細胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進正常細
細胞生長檢測——直接計數細胞
1、如果靶細胞是帖壁細胞,在細胞因子作用適當時間后,用生理鹽水洗去死亡細胞,用0.25%胰蛋白酶液消化細胞。加適量生理鹽水吹打,使細胞分散成單個細胞。直接在血細胞計數板上計數細胞。2、如果靶細胞是懸浮細胞,則需要用染色劑區分死細胞和活細胞然后再計數。通常用臺盼藍染色細胞,活細胞可以排除進入細胞的臺盼
關于宿主細胞的細胞介紹
受體細胞也叫宿主細胞。受體細胞有原核受體細胞(最主要是大腸桿菌)、真核受體細胞(最主要是酵母菌)、動物細胞和昆蟲細胞(其實也是真核受體細胞)。原核受體細胞中,最常用的宿主細胞是大腸桿菌。
細胞診斷、腫瘤細胞分類要訣
細胞診斷要訣 鏡下觀察要周到,每個視野不漏掉; 看完背景看細胞,低倍高倍仔細瞧; 先看形態和大小,核漿比例有多少; 核的結構最重要,核質又多又粗糙; 核膜核仁均異常,病理分裂偶見到; 單個細胞不能斷,足量細胞方有效; 只有成堆無分散,重復檢查再報告。
按細胞比重分離B細胞
按細胞比重分離B細胞1.將2~3ml含3×107純化的B細胞(B細胞>90%)的細胞懸液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平離心1000×g 20分鐘。2.吸去無細胞上清液,交界面的低密度B細胞和大部分Percoll溶液。由于此時細胞沉淀非常松散,需留下約0.2ml Percol
單細胞研究指南:細胞分離
多細胞生物的每個細胞都攜帶著相同的遺傳學信息。不過,近年來蓬勃發展的單細胞研究告訴我們,每一個細胞都是獨一無二的。不同類型的細胞激活特定組合的機制,即使是同類型細胞,基因表達也會出現差異。 那么,細胞之間的哪些差異有生物學意義,哪些差異來自于技術偏好呢?要獲得可靠的結果又需要研究多少細胞呢?這
細胞活性檢測Orangu?細胞計數
Orangu?計數法Orangu? solution(Cell Guidance,貨號:OR01-500)是一種無細胞毒性、高靈敏度、比色法,用于測定細胞增殖和細胞毒性的細胞活性試劑。利用WST-8(細胞代謝的一種水溶性的四唑鹽)在細胞內線粒體脫氫酶作為電子介質的情況下,它被還原為橙色的甲瓚染料,且
關于干細胞的細胞簡介
干細胞(stem cell,SC)的“干”,譯自英文“stem”,意為“莖干”、“干”和“起源”。干細胞群的功能即為控制和維持細胞的再生。一般來說,在干細胞和其終末分化的子代細胞之間存在著被稱為“定向祖細胞”的中間祖細胞群,它們具有有限的擴增能力和限制性分化潛能。這些細胞群的功能是增加干細胞每次
組織細胞包括什么細胞?
構成機體的細胞均可以稱之為組織細胞。如表皮細胞、肝臟細胞。朗格漢斯細胞組織細胞增生癥(LCH)是原因未明的單克隆CD1a組織細胞增生性疾病。臨床特點是:發熱,皮疹,齒齦腫脹,咳嗽,喘憋,肝脾淋巴結腫大,或伴有貧血,有的病變侵犯到中樞神經系統,胃腸道系統引起各種癥狀。
自然殺傷細胞的細胞來源
NK細胞確切的來源還不十分清楚,一般認為直接從骨髓中衍生,其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明,胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴結和骨髓中也有
自然殺傷細胞的細胞來源
NK細胞確切的來源還不十分清楚,一般認為直接從骨髓中衍生,其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明,胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴結和骨髓中也有NK