WIKI資訊

多色探針熔解技術有何潛力？

多色探針熔解曲線分析技術熒光PCR是應用最廣的核酸檢測平臺。熒光PCR操作簡單、閉管反應，可有效降低擴增產物污染，但一大缺點在于它所能檢測的靶標數目有限。這也是熒光PCR在臨床應用受到制約的重要因素，但隨著多色探針熔解曲線分析技術的出現，卻很好的解決了這個問題，即能夠在保留熒光PCR優點的同時也能突破它檢測靶標有限的瓶頸。探針熔解曲線分析指的是在PCR完成后，通過實時監測溫度變化過程中探針熒光強度變化的情況，得到熒光強度或者熒光強度相對溫度的負導數隨溫度變化的曲線，即探針熔解曲線 ,從探針熔解曲線上可以獲得探針與靶序列雜交的熔點值（Tm值）。當熒光探針與不同的靶序列雜交時，由于堿基匹配程度不同，形成雙鏈DNA的穩定性也各不相同，其Tm值也就存在差異。一條熒光探針可同多條序列相近的靶序列雜交產生不同的Tm值，因此根據Tm值的差異就可以實現不同靶的檢測和區分，即Tm值的多重檢測，若同時結合多色熒光檢測就可以大大提高單個反應中檢測的靶......閱讀全文