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六孔板細胞長至80%-90%confluence,一孔約為5-8x105細胞,按1：6傳，三天長滿。如果想快點，就1：3傳吧。要想達到你想要的生長時間和狀態，建議根據一定范圍分幾個密度摸一下，再確定。在傳代時，一般一個孔接種密度為1-2x10000每平方厘米。12孔的底面積為4.5平方厘米。不知道這個細胞的大小多大。但你可以通過經驗來增加細胞密度。比如你接5萬，3天長滿。你接10萬時，第一天或第二天，觀察下，看是否可以傳代......閱讀全文
3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死，在無菌操作下取組織，放 在 4°C無血清培養基中，最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得
一、細胞： 1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣
一、細胞： 1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。
前言自然殺傷細胞(Nature Killer Cells, NK)是骨髓衍化的淋巴細胞，其最初通過巨大的顆粒性狀被識別。NK細胞能自發殺滅多種腫瘤細胞，同時還可保護正常的細胞，從而被認為是癌癥的克星。最重要的是，不管是在胞內還是胞外，NK細胞不需要免疫接種或提前激活，就能夠自發溶解特定的腫瘤靶細胞，
細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具，形狀、規格、用途多樣。 你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫？ 你是否正為如何方便、正確使用培養板而苦惱？ 你對如何處理培養板是否也有困惑？ 對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會？ 細胞
人類多能干細胞(hPSCs)因其擁有分化為機體所有類型細胞的能力，使得hPSCs成為研究發育機制以及疾病機理最常用的工具，同時在再生醫學以及疾病治療領域也有非常廣泛應用。人類多能干細胞因其來源不同又可分為胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs）和誘導多能干細胞（induce
人類多能干細胞(hPSCs)因其擁有分化為機體所有類型細胞的能力，使得hPSCs成為研究發育機制以及疾病機理最常用的工具，同時在再生醫學以及疾病治療領域也有非常廣泛應用。人類多能干細胞因其來源不同又可分為胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs）和誘導多能干細胞（induced
1、流式所需細胞數問：我目前準備做流式，要做10 個標本，但是細胞總數不多了，我能不能把原來在100ml培養瓶培養的細胞轉移到25ml里培養，這樣把細胞重懸后，1個100ml的可以分到4個25ml里。請問這樣可以嘛？細胞數夠嘛？據說做流式至少要105次方個細胞以上才行。丁香網友漂泊認為：細胞數是夠的
一、細胞：1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，
細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具，形狀、規格、用途多樣。 你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫？ 你是否正為如何方便、正確使用培養板而苦惱？ 你對如何處理培養板是否也有困惑？ 對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會？ 細胞培養板的選擇 1）細胞培養板依底部形狀的不同可分為
欄主要分為基因操作工具、細胞實驗部分、動物模型部分、組織水平部分、分子機制部分和實驗方案范例六大專題。接下來將為大家分享細胞生物學的細胞增殖相關研究方法。 MTT分析法 MTT為黃色化合物，是一種接受氫離子的染料，可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈，在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下tetraz
(4)細胞分布不均及解決辦法問：我的細胞接種培養板，細胞總是聚集在周邊部分，該如何處理啊？我看園子里有的戰友的細胞卻是聚集在中間，是不是板子的質量問題啊？答：請問你的細胞是如何混勻的？是滴管吹打還是振蕩培養板？如果是后者，而且是轉圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分，導致細胞中間少
細胞鋪板是細胞實驗中最常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，我們卻經常遇到：如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現象，導致我們只能扔掉，重新鋪板。既耽擱時間又浪費了細胞及培養板等資源。歷經多次失敗后，才發現原來細胞鋪板是有規律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的技巧。 如下圖為：細胞鋪板時，
一、制作標準曲線（測定細胞具體數量時）1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞。2、按比例（例如：1/2比例）依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔。3、接種后培養2-4小時使細胞貼壁，然后加CCK試劑培養一定時間后測定OD值，
乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒產品編號產品名稱包裝C0017乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒500次產品簡介：一基的乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也稱乳酸脫氫酶檢測試劑盒(LDH Assay Kit)或乳酸脫氫酶釋放檢測試劑盒(LDH Relea
我做了穩定轉染，從G418濃度確定到最后的單克隆化鑒定。有自己的體會也有其他戰友遇到的情況, 和大家分享. 沒有總結好的地方，大家補充。篩選之前確定G418濃度：1，由于每種細胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉劑中有效的G418含量大約為0.722
一、制作標準曲線（測定細胞具體數量時）1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞。2、按比例（例如：1/2比例）依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復孔。3、接種后培養2-4小時使細胞貼壁，然后加CCK試劑培養一定時間后測定OD值，
在過去的五年中，熒光蛋白在監測體內生物學研究中，起到越來越重要的作用。源于維多利亞多管發光水母中的綠色熒光蛋白(GFP)是zui早被我們應 用的熒光蛋白，但是隨著時間的推移，現在我們可以使用的熒光蛋白種類也越加豐富，包括加強型的變異GFP蛋白、從其他種類水母中發現的熒光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它們都可以
細胞鋪板是細胞實驗中最常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，我們卻經常遇到：如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現象，導致我們只能扔掉，重新鋪板。既耽擱時間又浪費了細胞及培養板等資源。歷經多次失敗后，才發現原來細胞鋪板是有規律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的技巧。 如下圖為：細胞鋪板時
1．細胞培養與MTT問:做MTT時，96孔培養板細胞濃度該是多少？答:我覺得細胞的濃度并不需要那么精確，關鍵是接種于每孔的細胞數就大致處于同一水平。比如我做MTT，起初用的細胞濃度為5000/ml，每孔100ul，培養3天觀察，發現細胞數太少，各孔OD值反面難于比較。后來我換用 10000/ml，結
結晶紫法活性測定1、取對數生長期的人胰腺癌SW1990細胞，用0.25%胰酶（以無鈣鎂離子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培養基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml鏈霉素，pH7.2）吹打細胞，使形成細胞懸液。進行細胞計數，使細胞數為2~2.5×105個
實驗方法原理 MTT法是Mosmann 1983年報道的，以后此方法得到了迅速發展并廣泛應用于臨床與科研研究。其原理是活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物（formazan)，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺
實驗方法原理紅景天苷不僅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保護肝臟、改善心腦血管功能和提高中樞神經系統功能等多種藥理作用，還可以起到抗疲勞、抗缺氧、抗腫瘤、抗病毒和增強免疫功能的藥理作用。巨噬細胞是機體免疫系統的重要遞呈細胞，在特異性和非特異性免疫過程中均發揮著重要的作用。實驗材料小鼠試劑、試劑盒S
MTT比色法 實驗方法原理 活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物（formazan)，并沉淀在細胞中，而
四唑鹽（MTT）比色法可應用于：（1）檢測細胞存活和生長；（2）大規模的抗腫瘤藥物篩選；（3）細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定；（4）生物活性因子的活性檢測。 實驗方法原理活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物（formazan)，并沉淀在細胞中，而死細胞沒有這種
Cell Counting Kit-8（簡稱CCK8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。相信做細胞的童鞋們對他都很熟悉，然鵝，你確定你使用CCK-8試劑的方式是完全正確的嗎？我們還是來仔細了解下吧： 一、CCK8檢測細胞增殖/毒性的原理 WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基
結晶紫法活性測定1、取對數生長期的人胰腺癌SW1990細胞，用0.25%胰酶（以無鈣鎂離子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培養基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml鏈霉素，pH7.2）吹打細胞，使形成細胞懸液。進行細胞計數，使細胞數為2~2.5x105個
實驗原理 將細胞小室（Transwell小室）放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上室內盛裝上層培養液，下室內盛裝下層培養液，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、
使用說明：1.Calcein AM/PI檢測工作液的配制:按照96孔板每孔100μl Calcein AM/PI檢測工作液的體系，參考下表配制適量的Calcein AM/PI檢測工作液，并充分混勻。10個樣品100個樣品1000個樣品Calcein AM (1000X)1μl10μl100μlPI&
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成