核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些蛋白質結構分析方法:X射線晶體衍射分析和核磁共振x 射線衍射法的分辨率可達到原子的水平,使它可以測定亞基的空間結構、各亞基間的相對拓撲布局,還可清楚的描述配體存在與否對蛋白質的影響。多維核磁共振波譜技術已成為確定蛋白質和核酸等生物分子溶液三維結構的唯一有效手段。NM R技術最大的優點不在于它的分辨率,而在于它能對溶液中和非晶態的蛋白質進行測量。蛋白質的序列結構測定:1.到目前為止,最經典的蛋白質的氨基酸序列分析方法是,sarI等人基于Edman降解原理研制的液相蛋白質序列儀,及后來發展的固相和氣相的蛋白質序列分析儀。2.質譜:早期的質譜電離的方式主要是電子轟擊電離(EI),它要求樣品的揮發性好,一般與氣相色譜聯用。但使用G C/M S分析,肽的長度受到限制,只能分析小的肽段。近年來,在離子化的技術及儀器方面取得了突破性進展,使得質譜所能測定的分子量的范圍大大超出了10k u。因此,軟離子化技......閱讀全文
核酸質譜儀種類
核酸質譜儀種類有多種。1、按分析目的可分:化驗室核酸質譜儀和工業核酸質譜儀。2、按質量分析器的時空屬性可分:時間型核酸質譜儀和空間型核酸質譜儀。3、按結構可分:臺式核酸質譜儀和落地式核酸質譜儀。4、按分辨率可分:低分辨核酸質譜儀和高分辨核酸質譜儀。5、按離子化方式可分:電子轟擊電離核酸質譜儀、快原子
核酸探針標記
實驗概要核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。實驗原理分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因
核酸的提取
要回答這個問題要確定你是在哪一步發現降解了。是在質粒提取后后,直接點樣發現降解的話,可能是提取過程中大腸桿菌富含DNase,或是操作過程中堿裂解過長如果是在酶切過程中降解了,可能有鹽離子污染導致特異性酶變成非特異性酶了,把質粒都降解了。如果是在保存一段時間發現降解了,可能是保存液不是TE或是質粒發生
核酸的定量
核酸的定量 核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長 260 nm。 每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD 的吸光值分別相當于50μg/ml的d
核酸理論含量
一.質粒DNA含量?質粒名稱質粒大小拷貝數DNA含量(每ml)PGEM ? ? ? ? ? ?PUC ? ? ? ? ? ?PBR3222,700bp ? ? ? ? ? ?2,700bp ? ? ? ? ? ?4400bp300-700 ? ? ? ? ? ?500-700
什么核酸復性?
變性DNA在適當條件下,可使兩條分開的單鏈重新形成雙螺旋DNA的過程稱為復性(renaturation)。當熱變性的DNA經緩慢冷卻后復性稱為退火(annealing)。DNA復性是非常復雜的過程,影響DNA復性速度的因素很多:DNA濃度高,復性快;DNA分子大復性慢;高溫會使DNA變性,而溫度過低
核酸序列分析
【實驗目的】1、?掌握已知或未知序列接受號的核酸序列檢索的基本步驟;2、?掌握使用BioEdit軟件進行核酸序列的基本分析;3、?熟悉基于核酸序列比對分析的真核基因結構分析(內含子/外顯子分析);4、?了解基因的電子表達譜分析。【實驗原理】針對核酸序列的分析就是在核酸序列中尋找基因,找出基因的位置和
什么是核酸
核酸是在科學家們研究細胞核時被發現的,也就是說,核酸是從細胞核里提取出來的一種酸性物質,所以稱之為核酸。核酸有兩大類:一種是脫氧核糖核酸,簡稱DNA;一種是核糖核酸,簡稱RNA。我們通常意義下的核酸,就是指DNA,它在細胞里含量極少,如果要提出它,比沙里淘金還難。一個雞蛋里DNA的含量占雞蛋總量的2
核酸檢測精度
核酸檢測是現代比較先進的一種檢測方法,可以檢測出大部分的病毒,當然很多的病毒不需要用到核酸檢測,普通的檢測就能夠知道了,畢竟核酸檢測相對成本會高一點的,核酸檢測是有精度的,接下來我們來具體了解一下核酸檢測精度吧。核酸檢測精度為多少目前核酸檢測是比較新型的檢測手段,那么核酸檢測精度為多少呢?核酸檢測的
核酸pcr步驟
一、個人三級防護穿戴帶一次性帽子、佩戴醫用N95、一次性防護服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一層乳膠手套、外層一次性隔離衣、防護目鏡、第二層乳膠手套、穿戴完畢后應盡快通過專用緩沖間或者走廊,進入核酸提取區(專業核酸提取實驗室)。?二、樣本滅活處理核酸檢測須有兩名工作人員快速通過進入實驗室,進行滅活實
什么叫核酸檢測?湖北進行多少核酸檢測了
核酸檢測是一種靈敏度較高的核酸檢測方法,能夠檢測得出剛染上人類免疫缺陷病毒(HIV)等病毒。 5月18日,湖北省新型冠狀病毒肺炎疫情防控工作指揮部召開第97場新聞發布會,介紹湖北省新冠肺炎疫情常態化科學精準防控工作。 湖北省委副秘書長陳亮介紹,武漢市對離漢人員、教職員工、醫務人員等實施核酸
核酸研究提取方法升級之磁珠核酸提取
核酸是現代生物醫學研究中非常關鍵的研究課題,其包括核酸的結構以及核酸的功能。但是在無論做什么研究,diyi步必須對核酸進行分離與純化。 在以前傳統的分離技術中是沉淀,離心等分離過程,他們具有好多不足之處,方法繁瑣,浪費時間而且結果收率低,是一個認為操作的過程,而現在運用磁珠法進行核酸提取,
核酸提取對核酸質譜的重要性
核酸提取對核酸質譜的重要性在于核酸提取的效果好不好決定核酸質譜的準確性,核酸提取效果好,核酸質譜更準確。
核酸疫苗的應用及常見的核酸疫苗介紹
有關質粒DNA疫苗在人類及動物產生預防和治療作用的研究報道不斷增加,應用范圍也逐漸擴大。人們期望用核酸疫苗來征服諸如微生物感染性疾病、寄生蟲病等頑癥,并用于腫瘤、遺傳病和其他多種疾病的基因水平治療,所以作了多方面的嘗試。非病毒微生物感染性疾病的核酸疫苗非病毒微生物感染時,非病毒微生物蛋白都由微生物本
在提取核酸時,利用了核酸的什么特性
核酸提取利用了核酸的理化特性。核酸分離、純化原則:1.保持核酸分子一級結構的完整性.因為遺傳信息全部儲存在一級結構之中,核酸的—級結構還決定其高級結構的形式以及和其他生物大分子結合的方式.2.分離核酸原則:1)溫度不要過高;2)控制pH值范圍(pH值5-9); 3)保持一定離子強度; 4)減少物理因
核酸透射電鏡樣品制備實驗——核酸樣品
實驗方法原理很多球狀蛋白均能在水溶液或鹽溶液的表面形成不溶的變性薄膜,在適當的條件下這一薄膜可以成為單分子層,由伸展的肽鏈構成為一個分子網。當核酸分子與該蛋白質單分子膜作用時會由于蛋白質的氨基酸堿性側鏈基團的作用,使得核酸從三維空間結構的溶液構型吸附于肽鏈網而轉化為二維空間的構型,并從形態到結構均能
核酸提取和核酸濃度、純度的原理及方法
【實驗原理】 DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。在DNA提取過程中應做到:1、根據不同研究需要,保證結構的相應
關于艾滋病核酸檢測—核酸的提取方法介紹
艾滋病核酸檢測—核酸的提取方法:核酸提取均采用磁珠法。 1、磁珠提取的原理: 將磁珠上標記特異性吸附核酸的物質特異性吸附核酸,并通過磁分離技術將病毒核酸從裂解液中提取出來。 2、步驟: 裂解—吸附—洗滌—洗滌—洗滌—洗脫 3、優點: a.磁珠提取特異性高,受標本因素影響小,靈敏度高
核酸提取儀分類
1. 根據儀器型號大小不同劃分 1) 自動液體工作站 自動液體工作站是功能非常強大的設備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增、檢測等功能,實現標本提取、擴增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應用,不太適合常規實驗室提取核酸,一般都應用在單一類標本并且一次提取標本量非常大(至少
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術,是在同一PCR體系中加入多對特異性引物,一次擴增多個DNA片斷,實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本,減少了工作量,提高了檢測效率,并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯,檢出率低等問題。淋病患者往往
核酸提取儀簡介
核酸提取儀,是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型自動核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。大型自動液體工作站因為設備成本高昂,運行成本高,適合一次提取幾千個同一種類標本,所以真正
核酸的分離方法
核酸(nucleic acid)是遺傳信息的攜帶者,是基因表達的物質基礎.無論是進行核酸結構還是功能研究,首先需要對核酸進行分離和純化.核酸樣品質量將直接關系到實驗的成敗.核酸分離、純化原則:1.保持核酸分子一級結構的完整性.因為遺傳信息全部儲存在一級結構之中,核酸的—級結構還決定其高級結構的形式以
核酸檢測流程
1、首先,醫務人員會使用咽拭子擦拭受檢者鼻腔或者喉嚨扁桃體處,采集唾液分泌物,這個過程其實蠻疼的。2、將人體分泌物采集出來以后,咽拭子浸到保存液中,將管子蓋子旋好進行留樣。3、然后,將樣本裝入到干凈的密封袋中封好,送到相關部分進行檢測。4、相關部門將送來的樣本,送到指定實驗室做核酸提取實驗。5、核酸
核酸檢測系統概述
核酸檢測系統是一種用于基礎醫學領域的分析儀器,于2017年11月22日啟用。 技術指標 新型安捷倫 4200 TapeStation 系統是安捷倫樣本質控的最新力作。它結合了2100生物分析儀在RNA質控上的出色能力,繼承了2200 TapeStation在DNA完整性評估上的突破,同時融入
什么是核酸疫苗
核酸疫苗也稱之為DNA疫苗或裸DNA疫苗。它與活疫苗的關鍵不同之處是編碼抗原的DNA不會在人或動物體內復制。核酸疫苗應包含一個能在哺乳細胞高效表達的強啟動子元件例如人巨細胞病毒的中早期啟動子;同時也需含有一個合適的mRNA轉錄終止序列。肌內注射后,DNA進入胞漿,然后到達肌細胞核,但并不整合到基
提取核酸的步驟
一、DNA的分離利用核蛋白溶于水和高鹽溶液,但不溶于生理鹽溶液的性質進行分離。流程:破細胞→濃鹽溶液提取→生理鹽溶液沉淀→苯酚變性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。
核酸疫苗的功效
核酸疫苗也稱之為DNA疫苗或裸DNA疫苗。它與活疫苗的關鍵不同之處是編碼抗原的DNA不會在人或動物體內復制。核酸疫苗應包含一個能在哺乳細胞高效表達的強啟動子元件例如人巨細胞病毒的中早期啟動子;同時也需含有一個合適的mRNA轉錄終止序列。肌內注射后,DNA進入胞漿,然后到達肌細胞核,但并不整合到基因組
核酸疫苗的優勢
核酸疫苗具有潛在而巨大的優越性:①DNA疫苗是誘導產生細胞毒性T細胞應答的為數不多的方法之一;②可以克服蛋白亞基疫苗易發生錯誤折疊和糖基化不完全的問題;③穩定性好,大量的變異可能性很小,易于質量監控;④生產成本較低。⑤理論上可以通過多種質粒的混合物或者構建復雜的質粒來實現多價疫苗。⑥理論上抗原合成穩
提取核酸的步驟
一、DNA的分離利用核蛋白溶于水和高鹽溶液,但不溶于生理鹽溶液的性質進行分離。流程:破細胞→濃鹽溶液提取→生理鹽溶液沉淀→苯酚變性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。
什么是核酸檢測
?核酸檢測是在實驗室的條件下,通過分析致病微生物DNA或者RNA基因學的序列,進行臨床病因學的確診。此種核酸檢測的方法是利用PCR擴增的方法進行檢測,需要很多的步驟,最快也要6個小時才能出結果。此種檢測靈敏度高、成本高,完全手工操作,工作量非常大,同時要求實驗室的條件也非常高。它是目前及早確定病人是