DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩定的雙鏈區.如果兩DNA有一段相同堿基的話,就能形成氫鍵,且形成穩定的雙鏈區......閱讀全文
DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩定的雙鏈區.如果兩DNA有一段相同堿基的話,就能形成氫鍵,且形成穩定的雙鏈區
一、雜交 通過堿基對之間非共價鍵(主要是氫鍵)的形成即出現穩定的雙鏈區,這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補,所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序(即某種程度的同源性)就可以形成雜交雙鏈。分子雜交可在DNA與DNA、RNA與RNA或RNA與D
DNA點雜交l????????DNA斑點印跡的制備預備1.冰浴中以70W左右的超聲波處理基因組DNA 1min,用瓊脂糖凝膠電泳檢測片段大小,這些片段大小均應為7~10kb。2.用TE緩沖液將DNA稀釋至0.5μg/μl。?斑點印跡的制備1.加熱5μg DNA(在10μl TE緩沖液中)至95℃?1
分子雜交技術? 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。 雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DNA
分子雜交儀(又名:分子雜交箱、分子雜交爐)廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學領域中具有廣泛地應用,而且在臨床診斷上的應用也日趨增多。
分子雜交儀(又名:分子雜交箱、分子雜交爐)廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學領域中具有廣泛地應用,而且在臨床診斷上的應用也日趨增多。
六、核酸分子雜交實驗因素的優化 (一)探針的選擇 根據不同的雜交實驗要求,應選擇不同的核酸探針。在大多數情況下,可以選擇克隆的DNA或cDNA雙鏈探針。但是在有些情況下,必須選用其它類型的探針如寡核苷酸探針和RNA探針。例如,在檢測靶序列上的單個堿基改變時應選用寡核苷酸探針,在檢測單鏈
六、核酸分子雜交實驗因素的優化 (一)探針的選擇 根據不同的雜交實驗要求,應選擇不同的核酸探針。在大多數情況下,可以選擇克隆的DNA或cDNA雙鏈探針。但是在有些情況下,必須選用其它類型的探針如寡核苷酸探針和RNA探針。例如,在檢測靶序列上的單個堿基改變時應選用寡核苷酸探針,在檢測
四、核酸探針的標記和檢測 分子雜交是核酸鏈間堿基配對規則的一種結合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測,必須將雜交鏈中的一條用某種可以檢測的分子進行標記,這條鏈就稱為核酸探針。因此,核酸探針的制備是分子雜交技術的關鍵。最早采用的也是目前最常用的核酸探針標記
分子雜交儀又稱“分子雜交爐”或“分子雜交箱”根據不同實驗的需要可以選擇不同的規格型號的雜交儀。是現代實驗室采用雜交技術的理想設備,可替代塑料雜交袋和水浴搖床,并避免雜交袋破損帶來污染危險。雜交爐采用微機控溫精確,爐內空氣循環裝置設計獨特,升溫速度快等特點。?????? 廣泛地使用于克隆基因的篩選