westernblot雜帶及背景臟問題
先說這個實驗總體的背景，有黑點，這種背景非常像封閉液沒有完全溶解帶有雜質，或者是容器沒洗干凈，有臟東西了，最好把封閉液用0.22um的膜過濾一下再做。然后其他器皿都洗刷干凈。洗液里面加點tween試試。再一個看條帶，感覺特異性不太好，條帶太多了。看過抗體廠家提供的圖也是這樣的嗎？可以先試試把抗體濃度降低，孵育時間縮短，減少非特異結合。但是從你的情況看，估計很容易導致特異蛋白沒信號，不過還是值得一試的。內參看的話，抗體特異性好很多呢。所以可能抗體的問題會比較大。這個抗體別人用怎么樣啊？......閱讀全文
PCR有雜帶怎么辦
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
PCR只有雜帶，沒有目的條帶
有可能是沒有目標基因，導致PCR只有雜帶PCR片段過長，無法得到目標產物PCR說明：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇
pritA蛋白純化有雜帶咋辦
用肝素柱進一步純化。如果結合核酸可以考慮用肝素柱進一步純化。鎳柱純化的時候不用咪唑梯度濃度洗雜，一般用低濃度（10 mM）的溶液洗就可以了，如果有chaperone的話可以用高鹽洗一下。
純化蛋白有雜帶但是很細
1.仔細研究填料的說明書，同樣是His-tag或GST標簽的填料，但不同廠家，或者不同分辨率，其緩沖液和洗脫濃度都是有差異的，務必注意！比如，在選擇填料時，可選擇顆粒稍微細些的填料，分辨率會更好些。2.在樣品的各階段都要控制雜蛋白，以最常見的His-tag，可溶表達為例，上樣時，加入低濃度（5-10
WesternBlot有很多雜帶原因分析
1）目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小2) 樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作3）雜蛋白多，建議處理目的蛋白4）抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體5）抗體孵育
PCR只有雜帶，沒有目的條帶
有可能是沒有目標基因，導致PCR只有雜帶PCR片段過長，無法得到目標產物PCR說明：聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇
PCR產物雜帶很多，如何解決
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
PCR產物雜帶很多，如何解決
在你現有的退火溫度上各增加三度，降低三度，都去試一下先；如果雜帶的長度比目的帶長的話，就適當縮短退火和延伸時間。
western－blot－雜帶及背景臟問題
先說這個實驗總體的背景，有黑點，這種背景非常像封閉液沒有完全溶解帶有雜質，或者是容器沒洗干凈，有臟東西了，最好把封閉液用0.22um的膜過濾一下再做。然后其他器皿都洗刷干凈。洗液里面加點tween試試。再一個看條帶，感覺特異性不太好，條帶太多了。看過抗體廠家提供的圖也是這樣的嗎？可以先試試把抗體濃度
WB結果總有雜帶怎么辦
1、更換一抗，換單克隆的。2、不換一抗，降低一抗稀釋比，這樣目的條帶會變弱，不過雜帶也會，有時候就可以去掉雜帶了。3、多封閉一下。4、洗膜的時候多洗幾次。
PCR儀RACE的PCR結果有雜帶
RACE PCR雜帶或非特異性PCR條帶可能是由于以下原因： *GSP與其他cDNA的非特異性結合會導致在擴增目的產物時得到無關產物。 *GeneRacer引物和cDNA的非特異性結合會導致產生一端帶有GeneRacer引物序列的PCR產物。 *RNA降解。 *PCR管或試劑污染。 注
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因？
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
做得GST融合純化總有雜帶如何去掉
可以在平衡緩沖液里加一些鹽,0.2-0.5MNaCl，這樣可降低一些因離子作用帶來的非特異吸附。同時在平衡液里加0.5%吐溫等表面活性劑，這樣應該有些改善。此外你也可以用階段洗脫的方法,例如用5mM和10mM還原谷胱甘肽去分別去洗脫，看看有沒有什么區別。還要注意的問題是超聲破碎時注意功率和時間，避免
Western－Blot中雜帶較多有哪些原因
1、封閉問題，可以選擇牛奶封閉，并且封閉時間可以延長，4℃過夜都是可以的。2、抗體的非特異性過高，選擇特意性強的抗體，單克隆抗體比多克隆抗體好。3、蛋白質降解。4、蛋白質亞型也一起曝出來。
做western顯影出現很多雜帶是什么原因
有很多種原因，舉例如下：1.抗體濃度過高2.SDS造成非特異性結合3. 二抗試劑的非特異結合4.一抗特異性差推薦采用已經經過廠家驗證的WB應用抗體，有圖有真相像義翹的WB抗體一樣，用起來才放心。另，最好放上自己的實驗條件和結果圖片，可以讓大家幫你分析分析。
蛋白兩次純化后雜帶反而變多，什么原因
很可能是蛋白降解，推薦考慮后續實驗需求，嘗試加一些蛋白酶抑制劑。
SDSpage凝膠電泳出現雜帶是什么問題
SDS-PAGE 電泳過程中常見問題以及解決方法 2 Q:SDS-PAGE 電泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進 SDS(
SDSpage凝膠電泳出現雜帶是什么問題
SDS-PAGE 電泳過程中常見問題以及解決方法 2 Q:SDS-PAGE 電泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,是在聚丙烯酰胺凝膠系統中引進 SDS(
酵母雙雜是什么？
酵母雙雜交技術，它是通過利用轉錄激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由兩個結構域組成，一個為N端的DNA結合域（DNAbinding domain，DBD），另一個是C端的轉錄激活域（active domain，AD），二者可以從核酸一級結構上分開而獨立表達出有功能的結構域；當二者在物理空
什么是酵母雙雜？
酵母雙雜交技術，它是通過利用轉錄激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由兩個結構域組成，一個為N端的DNA結合域（DNAbinding domain，DBD），另一個是C端的轉錄激活域（active domain，AD），二者可以從核酸一級結構上分開而獨立表達出有功能的結構域；當二者在物理空
“進口羊雜”來歷不明
3·15前夕，瀘州市龍馬潭區禧羊羊·羊莊被瀘州市食藥監局查出問題，執法人員現場發現回收油、過期調料、違規食品添加劑和來歷不明的“進口羊雜”等。報道后，瀘州市食藥監局曾專門約談該餐飲店負責人，對其進行了批評教育。24日，瀘州市食藥監局向該餐飲店下發《行政處罰意見書》，擬依法對禧羊羊·羊莊
雜散光的五種定義
目前，國際上很多學者都很重視雜散光，他們對雜散光的定義各異。下面介紹國內外學者對雜散光的幾種定義。(1) ASTM的定義美國的ASTM認為：雜散光既難給出確切的定義，又難進行準確的測量。人們常將雜散光定義為在單色器額定通帶之外的透射輻射能量與總的透射能量之比。(2) Richard的定義日本學者Ri
紫外雜散光標準品
可溯源標準品用于驗證分光光度計雜散光規格。 描述 每種雜散光標準品都會在特定波長以下停止透光。在該截止點以下，任何測量值都可歸于儀器雜散光。不滿足儀器規格的雜散光測量值可能表示儀器燈源出現問題，會導致分析錯誤。提供下列標準品用于測定雜散光：氯化鉀，截止點在 200
石墨炔雜化獲進展
燃料電池具有零污染、能量轉化效率高、適用范圍廣泛等眾多優點，使其成為最具前景的新型能源轉化裝置之一。燃料電池的陰極氧還原反應(ORR)是一個動力學遲緩的過程，需要在催化劑的作用下才能輸出有效的電流密度。傳統的 ORR 催化劑主要為價格昂貴的鉑類材料。在燃料電池發電系統中，燃料電池電堆成本占總成本
關于雜化的分類介紹
等性雜化：參與雜化的軌道完全相同的雜化叫做等性雜化。 不等性雜化：參與雜化的軌道不完全相同的雜化叫做不等性雜化。 雜化軌道的類型取決于原子所具有的價層軌道的種類和數目以及成鍵數目等。常見的有： sp雜化：sp雜化是指由原子的一個ns和一個np軌道雜化形成兩個sp雜化軌道，每個sp雜化軌道各
染色體顯帶技術_－喹吖因顯帶（Q顯帶）
實驗材料晾干的中期染色體玻片試劑、試劑盒喹吖因溶液McIlvaine緩沖液鏡油弱熒光儀器、耗材玻片染色缸熒光顯微鏡實驗步驟1.將晾干的中期染色體玻片放人盛有喹吖因溶液的玻片染色缸中，室溫放置 5 min。2.在一個裝有水的染色缸中反復浸沾洗滌玻片。再次用水清洗。空氣晾干。如需要，可在避光、干燥處保存
“疑難雜癥”的基因秘密
所謂“罕見病”顧名思義就是指那些發病率極低的疾病，又稱孤兒病，也就是我們平時說到的疑難雜癥，目前確認的罕見病有六七千種，約占人類疾病的10%，在這些疾病中，約有80%是遺傳缺陷所致，而且重要的是多數都是單基因（例如α1-抗胰蛋白酶缺乏癥）缺陷，而另一些是由于幾個基因突變，這就為這類疾病的診斷和治
雜散光與儀器學理論
摘要：雜散光是紫外可見分光光度計等光學類分析儀器的重要性能技術指標之一，它是光學類分析儀器分誤差的主要來源之一，它限制儀器對被分析樣品的濃度的上限。 ??????? 雜散光是紫外可見分光光度計等光學類分析儀器的重要性能技術指標之一，它是光學類分析儀器分誤差的主要來源之一，它限制儀器對被分析樣
雜化的基本信息介紹
在成鍵過程中，由于原子間的相互影響，同一原子中幾個能量相近的不同類型的原子軌道（即波函數），可以進行線性組合，重新分配能量和確定空間方向，組成數目相等的新的原子軌道，這種軌道重新組合的過程稱為雜化（hybridization），雜化后形成的新軌道稱為 雜化軌道（hybrid orbital）。雜