NanoLuc?螢光素酶技術
NanoLuc?螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個氨基酸),發光更亮,比任何現有的生物發光酶用途更加廣泛的特點,它是目前性能最好的生物發光報告基因之一。NanoLuc?螢光素酶的這些屬性為報告基因檢測提供了新的功能,在需要更高靈敏度的復雜生物學應用中深具潛力。 NanoLuc技術包含一種新型底物 ――furimazine和一種獨特的酶(NanoLuc?螢光素酶),前者由Promega公司有機化學家開發,后者由Promega公司的研究科學家利用定向進化技術開發。它具有無可比擬的小巧體積,可以用于增強的病毒傳遞和蛋白融合,而且它很容易從細胞中分泌。NanoLuc?螢光素酶比螢火蟲(Photinus pyralis)或海腎(Renilla reniformis)螢光素酶的發光高兩個數量級,在難轉染的細胞中也能獲得更好表現。此外,NanoLuc可應用......閱讀全文
螢光素酶的應用
螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉染到細胞中。研究者利用基因工程已經使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞、T
NanoLuc?螢光素酶技術
??????? NanoLuc?螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個氨基酸),發光更亮,比任何現有的生物發光酶用途更加廣泛的特點,它是目前性能最好的生物發光報告基因之一。NanoLuc?螢光素酶的這些屬性為報
NanoLuc?螢光素酶技術
NanoLuc?螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個氨基酸),發光更亮,比任何現有的生物發光酶用途更加廣泛的特點,它是目前性能最好的生物發光報告基因之一。NanoLuc?螢光素酶的這些屬性為報告基因檢測提供了新的功能,在需要更高靈敏
螢光素酶的生產反應
螢光生成反應通常分為以下兩步:螢光素 +ATP→ 螢光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi螢光素化腺苷酸 +O2→ 氧螢光素 +AMP+ 光這一反應非常節省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉化為光,剩余的能
關于螢光素酶的簡介
螢光素酶(英語:Luciferase)是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus pyralis的螢火蟲體內的螢光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應
概述螢光素酶的應用
螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉染到細胞中。研究者利用基因工程已經使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞
螢光素酶的反應機制
螢光生成反應通常分為以下兩步:螢光素 +ATP→ 螢光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi螢光素化腺苷酸 +O2→ 氧螢光素 +AMP+ 光這一反應非常節省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉化為光,剩余的能
螢光素酶的應用介紹
螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉染到細胞中。研究者利用基因工程已經使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞、T
螢光素酶的基本信息
螢光素酶(英語:Luciferase)是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus pyralis的螢火蟲體內的螢光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速
螢光素酶的基本信息
螢光素酶(英語:Luciferase)是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus pyralis的螢火蟲體內的螢光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速
簡述螢光素酶的基本信息
螢光生成反應通常分為以下兩步: 螢光素 +ATP→ 螢光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi 螢光素化腺苷酸 +O2→ 氧螢光素 +AMP+ 光 這一反應非常節省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉
關于螢光素酶的生物發光介紹
生物發光現象是在生物體內,由于生命過程的變化,化學反應將化學能轉化為光能而發光的現象。生物發光在英語中名為bioluminescence,該詞為合成詞,是由希臘語中代表生命的bios與拉丁語中意為光的lumen組合而成。大部分發光與三磷酸腺苷(ATP)有關,發光的化學反應不限于在細胞內外發生。對
雙螢光素酶報告基因檢測
螢光素酶報告基因系統廣泛應用于真核生物基因表達和細胞生理學研究,包括受體活性、轉錄因子、細胞信號轉導、mRNA加工和蛋白質折疊等。螢光素酶是理想的報告基因,因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶,一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶。單螢光素酶報告基因實驗往往會受到各種實驗條件的影響,而雙螢光素
關于Promega螢光素酶技術發光史里程碑介紹
1990年12月,Promega首次提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術的應用可能性。當時的人們認為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,可能會對分子生物學家的研究產生重要的影響。幾個月后,第一代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Prom
螢火蟲螢光素酶在ATP檢測中的應用
前言:生物發光是一種在生物體內由酶將化學能轉化為光能的現象,在自然界中有超過30種生物發光體系,而我們所熟知的螢火蟲的發光體系就是其中研究最早,應用也最廣泛的一種。螢火蟲的發光現象是由其體內的螢光素酶(luciferase)的催化下三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP
D螢光素-Protocol-在生物發光檢測中的應用
D-螢光素,螢火蟲螢光素酶的化學發光底物,廣泛用于體外生物發光、體內活體成像。螢螢之光,照亮您的科研之路!?■ Q: D-螢光素的作用原理D-螢光素 (D-Luciferin) 是螢火蟲螢光素酶 (Firefly Luciferase) 的化學發光底物。在ATP 和螢光素酶存在下,螢光素能夠被氧化發
螢光顯微鏡原理
螢光顯微鏡原理:(A) 光源:光源幅射出各種波長的光(以紫外至紅外)。(B) 激勵濾光源:透過能使標本產生螢光的特定波長的光,同時阻擋對激發螢光無用的光。?(C) 螢光標本:一般用螢光色素染色。?(D) 阻擋濾光鏡:阻擋掉沒有被標本吸收的激發光有選擇地透射螢光,在螢光中也有部分波長被選擇透過。 以紫
螢光顯微鏡計數檢測
用 + 號表示熒光強度:無熒光(-)、可疑熒光(±)、熒光清楚可見(+)、熒光明亮(++)、熒光閃亮(+++~++++)。
熒光素酶的分析
螢光素或螢光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生螢光的底物和其對應的酶的統稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發光的生物體用不同的螢光素酶來催化不同的發光反應。最為人所知的發光生物是螢火蟲,而其所采用不同的螢光素酶與其他發光生物如螢光菇(發光類臍菇,Omphalotus oleariu'
綠螢光蛋白的發光原理
我們知道,熒光的發光是被一定波長光激發后,電子被激發到高能級,隨后向低能級躍遷的過程中發出比激發光波長更長的熒光,這也就是上面提到的受激輻射。我們將能接受光輻射,并躍遷發出顏色光的基團叫做生色團。綠色熒光蛋白含有一個三肽的單位Ser(65)-Tyr(66)-Gly(67),在蛋白質折疊的時候,這三個
瑩光、熒光、螢光,有何區別
瑩光,就如螢火蟲在夜晚發出的光亮。許多古瓷畫面,由于年深日久地受自然界空氣流動的磨損,以及氣溫變化的影響,使釉面分子散失,從而形成一種如玉似脂的光澤,叫做“瑩光”或“酥光”。熒光,又作“螢光”,是指一種光致發光的冷發光現象。
熒光素酶實驗(luciferase-assay)通常變化多少倍才算明顯
Dual-Luciferase?Reporter Assay System E1910Dual-Luciferase? Reporter (DLR?) Assay System (Dual-Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統) 為雙報告基因檢測提供有效的手段。 在DLR? 檢測中,螢
實用的熒光素酶報告基因檢測工具的分類
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產生生物發光的酶的統稱,其中最有代表性的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gauss
纖維素酶能否酶解纖維素
成熟棉纖維的主要成分是纖維素,纖維素是天然高分子化合物,由葡萄糖分子按β-1,4糖苷鍵連接而成。棉纖維中大分子的排列比較復雜,纖維內某些區域由于大分子的橫向吸引使大分子排列比較整齊密實,縫隙孔洞較少,這稱為結晶區。相反,另一些區域大分子排列比較紊亂,堆砌比較疏松,其中有較多的縫隙孔洞,密度較低,這稱
生物發光技術在生命科學中的應用(二)
為了進一步提高檢測基因的效率,我們對螢光素酶基因序列的密碼子進行了優化,使得它在多種哺乳細胞中的表達水平提高了5~10倍;同時,為了減少對基因的非特異性調控,我們也對螢光素酶的載體進行了優化,去除了載體上哺乳動物轉錄因子結合序列的保守序列,從而大大降低了實驗的本底,顯著提高了實驗的相對信號強度。優化
關于熒光素酶的基本介紹
螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中最有代表性的是一種學名為Photinus pyrali'的螢火蟲體內的螢光素酶,螢火蟲發光的腹部或海洋的藍色發光波浪將大自然中生物發光奇跡呈現于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現象被認為是發展生物分
生物發光技術在生命科學中的應用
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用,生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中,我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用,以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的
熒光素和熒光素酶是什么
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發和發射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統
熒光素酶的種類以及應用
在細胞和基因的微觀世界中研究探索,遺傳報告基因是非常有用的"可視化和量化"工具,具有廣泛的應用。熒光素酶(螢光素酶)以出色的靈敏度、使用方便、可以定量檢測而成為理想的報告基因。熒光素酶不是特定的分子,是一類中能催化產生生物發光的酶的統稱,不同來源的熒光素酶各有特點,可催化底物發出不同顏色的光,有的還
生物發光技術在生命科學中的應用
隨著發光(luminescence)技術在多種生物實驗中的廣泛應用,生物發光(bioluminescence)技術越來越成為首選的生物檢測手段。在這篇文章中,我們將詳細討論生物發光技術在生物檢測中的應用,以及它與其它發光檢測手段相比所顯示出的優點。 1 生物發光的特點 根據產生光子的