乳腺生物反應器的原理是外源基因在乳腺特異性表達需要乳蛋白基因的一個啟動子和調控區,即引導泌乳蛋白基因表達的序列,將外源基因置于乳腺特異性調節序列之下,使之在乳腺中表達,通過回收乳汁獲得重要價值的生物活性蛋白。從研究成果看,與傳統的原核系統及細胞發酵系統相比,動物乳腺生產的重組蛋白產品具有以下特點:生物活性高,無污染,純化簡單,產量高,成本低。已克隆并用作構建載體的乳蛋白基因主要有-乳球蛋白(BLG)基因、s1-酪蛋白基因、-酪蛋白基因、乳清酸蛋白(WAP)以及乳清蛋白基因[2]。大多數的乳蛋白基因的啟動子已用于外源基因在轉基因動物乳腺中的表達。s1-酪蛋白基因和-乳球蛋白的啟動子尚有未知因素的作用,它們在轉基因動物中表達水平低或表達不穩定。-酪蛋白的啟動子在轉基因動物中表達水平也很低。綿羊-乳球蛋白、山羊酪蛋白和牛s1-酪蛋白啟動子在轉基因動物乳腺中維持異種蛋白的表達水平較高。如果得用目的基因的DNA序列而不是cDNA,表達效果......閱讀全文
乳腺生物反應器的原理是外源基因在乳腺特異性表達需要乳蛋白基因的一個啟動子和調控區,即引導泌乳蛋白基因表達的序列,將外源基因置于乳腺特異性調節序列之下,使之在乳腺中表達,通過回收乳汁獲得重要價值的生物活性蛋白。從研究成果看,與傳統的原核系統及細胞發酵系統相比,動物乳腺生產的重組蛋白產品具有以下特點:生
通常讓目的基因在一定器官或組織中表達的轉基因動物稱為動物生物反應器。根據表達部位的不同,動物生物反應器主要分為血液生物反應器、乳腺生物反應器、膀胱生物反應器和家禽輸卵管生物反應器。血液生物反應器目的基因在血液中表達的轉基因動物叫做動物血液生物反應器。近年來,動物血液生物反應器取得了很大的進展。由于一
以動物的乳腺或其它組織作為生物反應器生產貴重的醫用蛋白,是動物轉基因技術的另一特殊形式。由于轉基因動物的遺傳結構發生了變化,并能穩定地遺傳給后代,外源基因不僅能在轉基因動物得到整合和表達,而且能獲得組織特異性(乳腺組織)和發育特性(妊娠后期和泌乳期)表達,利用這一點能產生轉基因泌乳家畜,還能生產出短
血液生物反應器比較適合生產人血紅蛋白、抗體和生產非生物學活性狀態的融合蛋白,而有活性的蛋白或多肽(如激素、細胞分裂素、組織血纖維溶酶因子等)由于進入了動物血液循環系統而影響動物的健康。已有多種通過轉基因動物生產的具有生物學功能的人血紅蛋白問世。
乳腺生物反應器是目前生產外源蛋白Z有效的生物反應器,也是目前國際上唯yi證明可以達到商業化生產水平的生物反應器。其原理是外源基因與乳腺蛋白基因的啟動子構建成基因表達載體,使外源基因在乳腺中表達,通過回收乳汁獲得重要價值的目的蛋白。由于乳腺固有的優越性使之成為生產YY蛋白的工廠。利用乳腺生物反應器主要
轉基因動物的問世,為利用基因工程手段獲得低成本、高活性和高表達的產物開辟了一條重要途徑。作為生物反應器的轉基因動物,主要是利用其乳腺組織和血液組織進行定位表達,特別是用乳腺組織生產具有生物活性的多肽藥物和具有特殊營養意義的蛋白質,已成為一個新興的轉基因制藥業,它的優越性有如下幾點[4]。3.1 表達
將所需目的基因構建入載體,加上適當的調控序列,轉入動物胚胎細胞,使轉基因動物分泌的乳汁中含有所需要藥用蛋白。從融合基因轉入胚胎細胞到收集蛋白質有一個過程,包括胚胎植入、分娩和轉基因動物的生長。轉基因動物從出生到第一次泌乳,豬、羊、牛各需12、14、16個月;并且只有雌性動物泌乳且不連續,一般可持續2
轉基因動物是指經人的有意干涉,通過實驗手段,將外源基因導入動物細胞中,穩定地整合到動物基因組中,并能遺傳給子代的動物。Palmiter等(1982)將含有小鼠金屬巰蛋白基因啟動子的DNA片斷與大鼠生長激素基因融合,用微注射的方法導入小鼠受精卵,移植給受體,產下了21 只仔鼠,6 只比同窩仔鼠生長快,
將所需目的基因構建入載體,加上適當的調控序列,轉入動物胚胎細胞,使轉基因動物分泌的乳汁中含有所需要藥用蛋白。從融合基因轉入胚胎細胞到收集蛋白質有一個過程,包括胚胎植入、分娩和轉基因動物的生長。轉基因動物從出生到第一次泌乳,豬、羊、牛各需12、14、16個月;并且只有雌性動物泌乳且不連續,一般可持
動物細胞體外培養時,生物反應器是整個培養過程的關鍵設備,為細胞提供了一個適宜的生長環境,使之快速增殖并形成所需的生物組織制品。