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1、附著型胞(adherentcell)（1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，則在trypsin-EDTA作用后，加入適量含血清之新鮮培養基終止trypsin作用，離心后再吸掉上清液。（4）輕拍培養瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量之新鮮培養基，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養瓶中，以正常培養條件培養。2、懸浮型細胞(suspensioncell)（1）吸出細胞培養液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。（2）吸掉上清液，加入適量之新鮮培養基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養瓶中，以正常培養條件培養。3、融合瘤(hybridoma)（1）有些hybrido......閱讀全文
1、附著型胞(adherentcell)（1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去tryps
實驗步驟1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速
1．懸浮生長細胞傳代多采用離心法傳代。1000轉/分,20-30秒后去上清。沉淀細胞加新培養液后再混勻傳代。亦有直接傳代法，即懸浮細胞沉淀在瓶壁時，將上清培養液去除1/2-1/3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代.2．半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但貼壁不牢，可
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。
原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。儀器、材料及試劑儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血
1、無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’sphosphate-bufferedsaline,Ca++/Mg++free,D-PBS, GibcoBRL21600-010)2、trypsin-EDTAsolution(0.05%trypsin-0.53mMEDTA-4Na,GibcoBRL25300
材料和器材材料：培養瓶，試管，移液管，巴斯德吸管，廢液缸，75%酒精棉球，酒精燈，培養細胞。藥品：培養基(RPMI1640或DMEM)，小牛血清或胎牛血清，0.25%胰蛋白酶，Hank's液。儀器：CO?培養箱，倒置顯微鏡，超凈臺。
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。為了保持細胞正常的二倍體核型，傳代培養一般
原代培養 原理 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用 EDTA 或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖這一過程稱原代培養。 儀器、材料及試劑 儀器：培養箱（調整至 37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸