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蛋白酶的種類繁多,不同的蛋白酶的性質和催化反應條件各不相同,無法規定一個統一的測定方法,使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1福林酚法蛋白酶催化蛋白質水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)與福林試劑反應,生成藍色復合物,藍色深淺與含酚基氨基酸的多少成正比,以此來測定酶的活力。2 甲醛滴定法蛋白酶催化蛋白質水解成氨cc基酸,再用甲醛固定氨基酸的氨基,用0.1mol/LNaOH溶液滴定生成的氨基酸,從而測定其酶活。3 DHT-酪蛋白法用5-氨基四唑重氮鹽將酪氨酸中部分組氨酸和酪氨酸重氮化,得到黃色的重氮5-氨基四唑酪蛋白(DHT-酪蛋白)。以DHT-酪蛋白為底物,在蛋白酶作用下,水解生成DHT-肽,二價離子可與DHT-蛋白與DHT-肽形成穩定的可溶性紅色螯合物,而鋅離子可迅速沉淀DHT-酪蛋白,但不沉淀DHT-肽。選用合適濃度的鋅離子和鎳離子作為沉淀劑和顯色劑,利用比色法可測定蛋白酶活力......閱讀全文
蛋白酶的種類繁多,不同的蛋白酶的性質和催化反應條件各不相同,無法規定一個統一的測定方法,使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1福林酚法蛋白酶催化蛋白質水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)與福林試劑反應,生成藍色復合物,藍色深淺與含酚基氨基酸的多少成正比
實驗原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動物胰臟中，在Ca2+的存在下，被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開，失去一段六肽，分子構象發生一定改變后轉變為有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量約為24000，其等電點約為pH8.9，胰蛋白酶的分子量與其酶原接
三、儀器食品加工機和高速分散器；研缽；大玻璃漏斗；布氏漏斗；抽濾瓶；紗布；恒溫水浴；紫外分光光度計；秒表；pH試紙。操作方法一、豬胰蛋白酶制備（一）豬胰蛋白酶原的提取豬胰臟1.0Kg（新鮮的或殺后立即冷藏的），除去脂肪和結締組織后，絞碎。加入2倍體積預冷的乙酸酸化水（pH2.5）于10～15℃攪拌提
實驗原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動物胰臟中，在Ca2+的存在下，被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開，失去一段六肽，分子構象發生一定改變后轉變為有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量約為24000，其等電點約為pH8.9，胰蛋白酶的分子量與其酶原接
蛋白酶K(ProteinaseK)，來源于林伯氏白色念球菌（TritirachiumalbumLimber）的蛋白酶K基因，屬于絲氨酸蛋白酶類，具有極高的酶活性和廣泛的底物特異性。 蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的樣品處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用，能增加探針與靶核酸結合的機會
Anson 測定法 酪蛋白測定法 偶氮酪蛋白測定法 茚三酮測定法 實驗方法原理
實驗材料胰蛋白酶試劑、試劑盒磷酸鉀N'-苯甲酰-L-精氨酰對硝基苯胺儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」25℃，在 405 nm 測定吸光值，ε405＝9620 l/（mol·cm）。注意事項其他試劑：0.3 mol/L 磷酸鉀，pH 8.020 mool/L N
實驗材料胃蛋白酶試劑、試劑盒血紅蛋白三氯乙酸HCl儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」1.樣品和對照組的處理：5 min，37℃2. 離心 5 min3. 記錄 280 nm 吸收值4. 計算展開 注意事項其他試劑：2％ 血紅蛋白（在 100 ml 水中溶解 2.5
基本方案 實驗方法原理 實驗材料
基本方案 實驗方法原理 實驗材料