聚合酶鏈式擴增反應。通過電泳進行產物定量只是相對的大概估算,一般的marker都有這樣的功能,比如你的產物小于2000bp的話,你在泳道加入5ul 的TAKARA的DL2000marker,其中最亮的一條帶750bp含量約為150ng,其他的條帶約為50ng,根據你的條帶的明暗和marker進行比較,即可粗略的估算你的產物的量。......閱讀全文
聚合酶鏈鎖反應,Polymerase chain reaction,簡稱PCR,是一種分子生物學技術,用于擴增特定的DNA片段,這種方法可在生物體外進行,不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。PCR這項技術,被廣泛地運用在醫學和生物學的實驗室,例如用于判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的
實驗概要 PCR擴增目標DNA片段。 實驗原理 多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。 ? 1. 模板DNA的變性:模板DN
(4)引物的熔點溫度(Tm值)要適當。Tm值與引物的堿基組成和長度有關;PCR引物的GC/AT應與要擴增的模板DNA相當或略高些。一般熔點溫度以大于55℃為宜。(5)引物的3,末端必須與模板嚴格互補,而5,末端的要求可靈活些。(6)目前在引物選擇中已廣泛應用計算機軟件,從EMBL或Genebank中
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多重PCR(multiplex PCR),其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定。重PCR的特點有:①高效性在同一PCR反應管內同時
[實驗目的] 通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。 [實驗原理] 多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個循環后,DNA擴增2n倍
多重PCR擴增實驗可以用于:(1)在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物,或對有多個型別的目的基因進行分型,特別是用一滴血就可檢測多種病原體;(2)多重PCR很適宜于成組病原體的檢測,如肝炎病毒,腸道致病性細菌,性病,無芽胞厭氧菌,戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢;(3)多種病原體在同一反應管
一、實驗原理 聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一種體外核酸擴增系統,其原理類似DNA分子的天然復制過程,是將在待擴增的DNA片段和與其兩側互補的兩個寡聚核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個循環后,DNA擴增 2n 倍。該技術已成為分子生
試劑、試劑盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物 儀器、耗材 熱循環儀 實驗步驟 一、材料 1. 酶和酶緩沖液 Taq 聚合酶 許多 Taq 聚合酶都可以用;作者發現 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以滿足大多數需要. 如果需要提高PCR 產物的特異性,應該使用熱啟動
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術,是在同一PCR體系中加入多對特異性引物,一次擴增多個DNA片斷,實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本,減少了工作量,提高了檢測效率,并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯,檢出率低等問題。淋病患者往
PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應核酸擴增儀,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶鏈反應)技術對特定DNA擴增的一種儀器設備,被廣泛運用于醫學、生物學實驗室中,例如用于判斷檢體中是否會表現某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復