1.實驗試劑 (1)RNA提取緩沖液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配置),25mM EDTA,0.5g/L 亞精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巰基乙醇(V/V,使用前加入).由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發生反應,所以配RNA提取緩沖液時直接用DEPC 處理的水配制即可 (2)SSTE:1 M NaCl,0.5% SDS(W/V),10mM Tris-HCl pH8.0,1.0mM EDTA (3)10M LiCl 直接用蒸餾水配10M LiCl,加1‰的DEPC過夜后,高溫滅菌 (4)3M NaAc (5)氯仿:異戊醇(24:1) (6)酚(pH4.5):氯仿:異戊醇(25:24:1) (7)DEPC處理水 用1‰的DEPC處理蒸餾水過夜,高溫滅菌 (8)無水乙醇;......閱讀全文
1.實驗試劑 (1)RNA提取緩沖液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配置),25mM EDTA,0.5g/L 亞精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巰基乙醇(V/V,使用前加入
試劑: RNA提取緩沖液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亞精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巰基乙醇(V/V,使用前加入)。由于在
試劑:RNA提取緩沖液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亞精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巰基乙醇(V/V,使用前加入)。由于
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家參考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家參考。 真菌DNA的提取(方法一) 1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨
一、真菌DNA的提取(方法一) 1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(p
一、真菌DNA的提取(方法一) 1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(p
實驗步驟 1. 所有容器高溫滅菌兩次,DEPC高溫滅菌,所有的試劑用DEPC配制,高溫滅菌。 2. 在一滅菌2mL管中加入:5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。 3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片,迅速在液氮中研磨成粉末,轉入已準備好的離心管
實驗概要總細胞RNA的提取在建庫過程中,由于cDNA合成這一步將使用通用引物oligo dT,因此在總RNA提取這一步中,提取純化mRNA不是非常必要的。提取高純度的總細胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板,目前提取RNA的方法很多,也有不少商業化的試劑盒。實驗步驟1. TRIZOL法?? 1)
真菌總 RNA 的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇