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1. 在無菌的0.5ml或0.2ml離心管中按下列操作程序加樣： 反應物 加樣順序 體積(μl) 終濃度 去離子水 1 29.4 10×Buffer B 2 5 1× 4×dNTP混合物 3 5 各200μmol/L MgCl2 4 3 1.5mmol/L 有義引物 5 2.6 0.25μmol/L 反義引物 6 2.6 0.25μmol/L 模板 7 2 0.1μg TaqDNA聚合酶 8 0.4 1unit 2. 用微量可調加樣器和一次性Tip向每一管中加50μl礦物油。每加一管換一次Tip。 3. 振蕩每只管，然后短暫離心。 4. 將管放到預熱的熱循環中，按下列程序開始循環： 預變性 94℃ 4分鐘 1次 變性 94℃ 1分鐘 退火 37-65℃ 1分鐘 延伸 72℃ 1分鐘 循環30次 終延伸 72℃ 7分鐘 1次 保存 4℃ 5. 將PCR產物進行瓊脂糖凝膠電泳，分析結果。電......閱讀全文
1. 在無菌的0.5ml或0.2ml離心管中按下列操作程序加樣： 反應物 加樣順序 體積(μl) 終濃度 去離子水 1 29.4 10×Buffer B 2 5 1× 4×dNTP混合物 3 5 各200μmol/L MgCl2 4 3 1.5mmol/L 有義引物 5 2.6 0.
1. 在無菌的0.5ml或0.2ml離心管中按下列操作程序加樣：反應物 加樣順序 體積(μl) 終濃度去離子水 1 29.410×Buffer B 2 5 1×4×dNTP混合物 3 5 各200μmol/L?MgCl2 4 3 1.5mmol/L有義引物 5 2.6 0.25μmol/L反義引物
1. 在無菌的0.5ml或0.2ml離心管中按下列操作程序加樣：反應物 加樣順序 體積(μl) 終濃度去離子水 1 29.410×Buffer B 2 5 1×4×dNTP混合物 3 5 各200μmol/L MgCl2 4 3 1.5mmol/L有義引物 5 2.6 0.25μmol/L反義引物
一、 試劑(1)引物根據待擴增DNA不同，引物亦不同，引物的設計見(2)耐熱DNA聚合酶：此酶是從耐熱細菌中分離出來的，能耐受高溫(93—100c)，不同耐熱DNA聚合酶的特性詳見本章第4節。 Perkin—E1mer—cetus公司、N、F、Bio1ab、PharMacia公司、國內華美公司、復旦
作者：李愛麗等 來源：生物技術通報 典型的PCR操作 在此處僅列出—般PCR操作過程，具體影響因素的優化將在本章第二節討論，每一個具體操作前都需進行必要的優化。 （一） 試劑 （1）引物根據待擴增DNA不同，引物亦不同，引物的設計見本章第三節。 （2）耐熱DNA聚合酶：此酶是從耐熱細菌中
一、 試劑 (1)引物根據待擴增DNA不同，引物亦不同，引物的設計見http://ask.bbioo.com/special/experiment/PrimerDesign.htm。 (2)耐熱DNA聚合酶：此酶是從耐熱細菌中分離出來的，能耐受高溫(93—100c)，不同耐熱DNA聚合酶的特性
1．目的：室間質評（EQA）是實驗室質量控制體系中重要部分，是保證患者檢驗結果和其報告的準確性和可靠性，以及各實驗室間結果的可比性的重要手段。2．適用范圍：衛生部或省臨檢中心下發的PCR室間質控血清檢測。3．負責人：??????? 操作人：4．程序：4.1質控標本的接收和驗收：收到質控血清后由相關人
1 目的:保證擴增及結果分析的標準化、規范化。?2 該SOP變動程序:本文件的變動，可由任一使用該文件的工作人員提出，報經室技術負責人，由季度組長會議決定。如通過則公布實行。?3 使用范圍:使用GeneAmp 5700型擴增儀的實時熒光定量PCR實驗室。 ? ??4 標準程序4.1 核酸擴增標準程序
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合elisa試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔
培養基配制的操作程序： 1、加瓊脂和無離子水至定容量的70%左右，加熱使瓊脂溶解； 2、瓊脂溶解后，加入培養基母液、激素、糖等，稍加熱使糖溶解； 3、糖溶解，加無離子水至定容量； 4、充分攪拌后，測pH值至要求值； 5、培養基分裝入瓶后滅菌。 組培玻璃器皿的選擇和清洗 1、玻璃器皿的