使放射性百標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成度*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡。如果反應系統內加入的*Ag和Ab的量是恒定的,且*Ag和Ag的總和大于Ab有效結合點時,則*Ag-Ab生成量受Ag量的限制。Ag增多時,Ag-Ab生成量也增多,而*Ag-Ab生成量則相對回地減少,同時游離*Ag也增多。因此,*Ag-Ab與Ag的含量呈一定的函數關系。如采用一種有效的分離方法,將*Ag-Ab和Ag-Ab復合物 (以 B表示)與*Ag、Ag(以F表示)分離,并測定B和F的放射性,可有以下規律:如樣品中Ag增多,則B的放射性降低,F的放射性增高,即Ag與B成反比。計算B/F或B/T值 (T=B+F),即可算出樣品中Ag......閱讀全文
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡
使放射性百標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成度*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡
一、放射免疫分析的基本試劑 (一)標準品 標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。 按實
Radioimmunoassay RIA 利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。1960年美國化學家R.S.耶洛和S.A.貝爾森提出此法,耶洛因此于1977年獲得諾貝爾生理學或醫學獎。 她從小酷愛自然科學。在大學里,她熱衷
催乳素、黃體化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鑒別、診斷、研究激素的生理和藥理作用,目前較多用于研究激素與受體結合的機理。在傳染病學方面廣泛用于乙型肝炎抗原的亞型分類測定。在臨床免疫學上測定免疫球蛋白G、免疫球蛋白E及抗脫氧核糖核酸抗體;進一步的應用包括甲狀腺球蛋白抗體、類風濕因子、補體及抗
在本法的基礎上,近年來又發展了其他免疫分析法,用其他有特殊性質的物質代替放射性同位素來標記抗原,同樣利用標記與未標記抗原與抗體的競爭性結合,然后用適宜方法測定。其中研究較多的是熒光免疫分析,采用熒光化合物標記抗原,結合分離后通過熒光值的測定進行定量分析。
放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素標記抗原或抗體,然后與被測的抗體或抗原結合,形成抗原抗體復合物的原理來進行分析的。它又分為兩種方法。一、競爭性RIA,又稱傳統RIA主要特點:標記的是抗原。其原理:未知抗原Ag+標記抗原Ag +已知定量抗體Ab標記抗原與抗體復合物AgAb+未知抗原與抗體復合物A
利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。 Radioimmunoassay RIA 利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。1960年美國化學家R.S.耶洛
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響