細胞懸浮培養工藝按照培養方式分為批培養、流加培養及灌注培養。批培養能直觀反映細胞在生物反應器中的生長、代謝變化,操作簡單,但初期代謝廢產物較多,抑制細胞生長,細胞生長密度不高;流加培養操作簡單、產率高、容易放大,應用廣泛,但需要進行流加培養基的設計;灌注培養的培養體積小,回收體積大,產品在罐內停留時間短,可及時回收到低溫下保存,利于保持產品的活性,但操作比較繁雜、細胞培養基利用效率低、旋轉過濾器容易堵塞等。不同的病毒采用的培養方式不同,如對于分泌型且產品活性降低較快的生物制品,宜采用灌注培養,且灌注培養也更適宜于微載體培養。同一生物制品由于其營養環境的不同,其生產工藝也可能發生變化,如BHK21細胞生產口蹄疫病毒,低血清培養時采用批培養,接毒前需要更換無血清的維持液;而無血清培養過程中無需換液,配合流加培養可能效果更好。選擇反應器懸浮培養工藝需要考慮細胞和病毒的關系、產物穩定性、細胞培養基或添加物的選擇、細胞培養規模等幾個因......閱讀全文
細胞懸浮培養工藝按照培養方式分為批培養、流加培養及灌注培養。批培養能直觀反映細胞在生物反應器中的生長、代謝變化,操作簡單,但初期代謝廢產物較多,抑制細胞生長,細胞生長密度不高;流加培養操作簡單、產率高、容易放大,應用廣泛,但需要進行流加培養基的設計;灌注培養的培養體積小,回收體積大,產品在罐內停
細胞懸浮培養工藝按照培養方式分為批培養、流加培養及灌注培養。批培養能直觀反映細胞在生物反應器中的生長、代謝變化,操作簡單,但初期代謝廢產物較多,抑制細胞生長,細胞生長密度不高;流加培養操作簡單、產率高、容易放大,應用廣泛,但需要進行流加培養基的設計;灌注培養的培養體積小,回收體積大,產品在罐內停留時
懸浮培養技術按細胞貼壁性分為懸浮細胞培養工藝和貼壁細胞微載體懸浮培養工藝。懸浮細胞(CHO細胞、BHK21l細胞等)可以在反應器中直接生產增殖,細胞自由生長、培養環境均一、取樣簡單、培養操作簡單可控、放大方便、污染率和成本低;而貼罐細胞在反應器中懸浮培養需要借助微載體,細胞和球體接觸部位營養環境
反應器規模能否放大是選擇反應器的一個霞要前提,懸浮培養規模的放大主要通過增加反應器體積或者增加反應器數量,增大反應器體積可以節省大量的配套工程及人員成本,而多臺小的反應器雖然操作靈活,但成本相對高。在國外生物制品生產中采用的多是較大規模的、能夠逐級放大的生物反應器。選擇和配置生物反應器還需考慮和
一、目的要求了解植物細胞懸浮培養的基本原理,通過實驗掌握植物細胞懸浮培養的方法和技術。并通過實驗練習和鞏固無菌操作技術。二、基本原理利用固體瓊脂培養基對植物的離體組織進行培養的方法在植物遺傳實驗中已經得到廣泛的應用。但這種方法在某些方面還存在一些缺點,比如在培養過程中,植物的愈傷組織在生長過程中的營
一、目的要求 了解植物 ?細胞懸浮培養的基本原理,通過實驗掌握植物細胞懸浮培養的方法和技術。并通過實驗練習和鞏固無菌操作技術。 二、基本原理 利用固體瓊脂 ?培養基對植物的離體組織進行培養的方法在植物遺傳實驗中已經得到廣泛的應用。但這種方法在某些方面還存在一些缺點,比如在培養過程中,植物的愈傷組織
懸浮培養是使帖壁細胞呈懸浮狀態生長。如所需培養的細胞本身屬懸浮生長型,則無須做任何處理;在傳代時先做離心處理去除舊培養液,添加新培養液即可。但在培養帖附型細胞時,必須進行干擾細胞不能帖附,方法有二:(1)用大培養瓶增加含有鐵芯的無毒的聚苯乙烯棒,在培養中進行電磁攪拌,使細胞不能帖壁而成懸浮培養。(2
利用固體瓊脂培養基對植物的離體組織進行培養的方法在植物遺傳實驗中已經得到廣泛的應用。 但這種方法在某些方面還存在一些缺點,比如在培養過程中,植物的愈傷組織在生長過程中的營養成分、植物組織產生的代謝物質呈現一個梯度分布,而且瓊脂本身也有一些不明的物質成分可能對培養物產生影響,從而導致植物組織生長發
6 細胞培養基的選擇 6.1根據細胞特點、蛋白表達及病毒特點和培養方式選擇細胞培養基 商售工業用細胞培養基主要是干粉培養基,常用的培養基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等系列,根據細胞的特性及工業化的生產需求,開發或生產的同一系列的細胞培養基在成份上也有
取點在倒置顯微鏡下看細胞密度,還有培養基顏色。密度較大了就取出離心,我做的一般是800r/min離心4分鐘就可以了,時間太長細胞缺氧缺養分,會影響狀態。然后用培養基重懸,一定要吹勻,至于留的密度要看你是不是每天都要傳代了,還有不同的細胞要求密度也不同。等你多傳兩次根據經驗就好了。