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提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用0ligo (dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。RT-PCR 使測的靈敏性提高了幾個數量級，使- - 些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用于:分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。(一)反轉錄酶的選擇1.Moloney鼠白血病病毒(MMLV)反轉錄酶:有強的聚合酶活性，RNA酶H活性相對較弱。最適作用溫度為37°C。2.禽成髓細胞瘤病毒(AMV)反轉錄酶:有強的聚合酶活性和RNA酶H活性。最適作用溫度為42"C。3. Thermus thermophi lus、Thermus flavus 等嗜熱微生物的熱穩定性反轉錄酶:在Mn2存在下，允許高溫反轉錄RNA，以消除RNA模板的二級結構。4. MMLV 反轉錄酶的RNase H- 突變體:商......閱讀全文
提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用0ligo (dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。RT-PCR 使測的靈敏性提高了幾個數量級，使- - 些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用于:分析基因的轉錄
rt-qpcr需要注意的那些事，你都了解嗎？在rt-qpcr實驗中不論是實驗小白還是老司機，都會遇到各種不同的實驗問題。解決問題不僅要浪費額外的樣品和試劑，還要占用大量的時間一遍遍的重復和分析，真是被實驗折磨得焦頭爛額。那實驗過程中應該注意哪些細節呢？小翊精心為大家總結了rt-qpcr實驗的注意事項
慢性乙型肝炎影響著世界上超過2.4億人口[1]，難以治愈已成為公認的事實。大多研究認為難以治愈與肝細胞核內HBV共價閉合環狀DNA（cccDNA）半衰期過長且難以清除有關。[2]因此，肝內檢測cccDNA對評估抗病毒治療療效和治療終點具有重要意義。但直接檢測cccDNA十分困難，通常需要進行肝組織活
考慮到mRNA轉錄的高度動態特性以及樣品處理和下游處理步驟中引入的潛在變量，RT-qPCR工作流程的每個步驟的標準化方法對于可靠和可重現的結果至關重要。MIQE為這種方法提供了一份包含85個參數的清單，以確保質量結果符合任何期刊的接受標準。接下來，小編將為大家詳細介紹如何應用MIQE指南來建立一個可
? ? ??隨著新冠病毒肆虐全球，聊病毒是個敏感話題。今天我們就從這個敏感話題著手，好好聊一聊。?? ? ? ?病毒是一種個體微小，結構簡單，只含一種核酸（DNA或RNA）。我們現在提起來就咬牙切齒的的新冠病毒（COVID-19），就是一種RNA病毒。當然除了COVID-19，我們常聽到的其他臭
最新發表的一項研究評估了美國FDA緊急授權的4種埃博拉病毒檢測。這項研究由美國疾控中心、埃默里大學醫學院、內布拉斯加大學醫療中心等機構的研究人員開展，發表在《Journal of Clinical Microbiology》雜志上。 他們評估的檢測包括：美國CDC的NP2和VP40 RT
新型冠狀病毒SARS-CoV-2導致2019年冠狀病毒病（COVID-19），如今正在全球肆虐。基于此，人類面臨著一項重大的公共衛生挑戰。快速檢測現有的SARS-CoV-2感染和評估病毒傳播至關重要。 基于逆轉錄環介導等溫擴增（reverse transcription loop-mediat
針對客戶對實驗快速、高效率的需求，Takara不斷努力探索。2019年6月，Takara推出無需從糞便、血液、細胞等樣本中提取RNA，即可直接檢測樣本中目的基因的One Step Real Time PCR Premix試劑【PrimeDirect? Probe RT-qPCR Mix】（Cod
對于新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）的檢測，實時定量PCR一直是金標準。不過對于某些患者，qPCR的結果似乎每天都在變化，而且有不少假陰性。近期的研究表明，ddPCR檢測能夠減少假陰性結果，而Bio-Rad Laboratories公司也利用其微滴式數字PCR系統開發出新型冠狀病毒的檢測產品
RNA測序是一種通過觀察基因表達來分析整個基因組的技術。如今，這種全基因組表達分析是基因組研究的標準工具，因為它們依賴于高通量技術，而這些技術本身已經變得廣泛可用。 盡管如此，RNA測序仍然是昂貴和費時的，因為它首先需要昂貴的準備一個完整的基因組庫——由細胞RNA生成的DNA池——同時數據本身