1. 將混合物離心,將擴增產物轉移到1.5 ml EP管中。 2. 加入25 μl醋酸鈉/乙醇混合液,充分振蕩,置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃離心30 min,小心棄上清。 3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗滌沉淀2次。12 000 r/min于4℃離心5 min,小心棄上清和管壁的液珠,真空干燥沉淀10~15 min。......閱讀全文
1. 將混合物離心,將擴增產物轉移到1.5 ml EP管中。 2. 加入25 μl醋酸鈉/乙醇混合液,充分振蕩,置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃離心30 min,小心棄上清。 3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗滌沉淀2次。12 000 r/min于4℃離
實驗方法原理核酸是多聚陰離子的水溶性化合物,可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類,后者在有機溶劑中不溶解也不變性.在較低溫度下形成沉淀.實驗材料待純化樣本試劑、試劑盒醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟實驗試劑:1. 3mol/L醋酸鈉緩沖液,pH5.2:稱取醋酸鈉(NaAC·3H20)408.1
實驗方法原理 核酸是多聚陰離子的水溶性化合物,可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類,后者在有機溶劑中不溶解也不變性.在較低溫度下形成沉淀.實驗材料 待純化樣本試劑、試劑盒 醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟 實驗試劑:1. 3mol/L醋酸鈉緩沖液,pH5.2:稱取醋酸鈉(NaAC·3H20)4
1)直接加90-100μl純化緩沖液于1.5ml離心管,再加入30~300μl PCR反應物,Vortex混合;2)加入1ml樹脂輕輕Vortex 3次,每次間隔1分鐘;3)將取出拉桿的注射器筒(3ml)裝在純化柱上,加入上述DNA與樹脂混合液,然后裝上拉桿,慢慢將混合液推進純化柱內;4)卸下注射器
1. 加入12 μl的TSR于離心管中,劇烈振蕩,讓其充分溶解DNA沉淀,稍離心。 2. 將溶液轉移至蓋體分離的0.2 ml PCR管中,稍離心。 3. 在PCR儀上進行熱變性(95℃ 2 min),冰中驟冷,待上機。
醋酸鈉/乙醇法純化pcr產物 (1) 將混合物離心,將擴增產物轉移到1.5ml ep管中。 (2) 加入25μl醋酸鈉/乙醇混合液,充分振蕩,置冰上10min以沉淀dna。12 000r/min于4℃離心30 min,小心棄上清。 (3) 加70%(v/v)的乙醇50μl洗滌沉淀2次。12
[實驗原理]DNA 測序(DNA sequencing)是對DNA 分子的一級結構的分析。其基本原理是DNA 的復制反應體系中需要存在DNA 聚合酶、DNA 模板、寡核苷酸引物和dNTP,引物和模板退火形成雙鏈后,DNA 聚合酶在引物的引導下在模板鏈上沿3’→5’的方向移動,dNTP 按照堿
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試劑、試劑盒 TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材 離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去離子水2. 核酸和寡核苷酸待測序的 PCR 產物3. 離心機和轉子帶有固定傾角轉子的小型
Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid