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細胞裂解液各成分的作用：1、第一種50mmol/L Tris-HCl是緩沖液，保證細胞裂解時PH值也能穩定，Tris是一種有機堿。2、第二種1.0 mmol/L EDTA是一種金屬螯合劑。3、第三種150 mmol/L NaCl是等滲體系電解質，用于協調細胞膜內外離子平衡。4、第四種0.1% SDS是十二烷基硫酸鈉，是一種表面活性劑和還原劑，有增溶作用。......閱讀全文
實驗流程：1. 收集胰蛋白酶消化的細胞并離心，用PBS清洗。2. 用100μl 裂解緩沖液冰浴溶解沉淀10min（每500000個細胞20μl裂解緩沖液）。3. 10000rpm，4°C離心10min，取上清轉移至新管。4. 用考馬斯亮藍法檢測蛋白質濃度。5. 用裂解緩沖液將溶液濃度調到5mg/ml
一、試劑準備1、新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:? ?? ?150 mM NaCL? ?? ?1% NP-40 (去垢劑)? ??? ?? ?0.1% SDS (去垢劑)? ?? ?2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)? ?? ?2ug/ml Leupeptin (
裂解細胞的話：新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢劑) + 0.1% SDS (去垢劑)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)或1 mM PMSF
溶液準備 2×樣品緩沖液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ） 甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚藍 , 2%DTT PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4 ，50
在許多細胞內蛋白表達、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實驗（如WB、IP、Co-IP、ChIP）中，細胞裂解是關鍵一步。 圖片源自于網絡 基本介紹 ? 根據不同細胞類型、蛋白定位及下游應用，需要不同的細胞裂解液進行細
細胞裂解液一般都用的是含酶的,在血紅細胞表面上有紅細胞專屬的表面抗原,當裂解液中含可以攻擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候 就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大,膨脹,裂解,或者引起紅細胞的變性.而不會攻擊其他細胞.另外紅細胞有自己的電負性,滲透脆性(通常是一些非酶細胞裂解液的突破點) ,懸浮穩定性,這
WCL的全稱是whole cell lysate,中文就是全細胞裂解液對吧?如果是這樣的話,這個部分的目的就是研究細胞里面你想要研究的蛋白表達情況.IP的就是你用抗體pull down以后得到的目的蛋白.我們做co-IP研究A和B蛋白相互作用的時候,一般會在細胞里面轉染質粒,分別表達A和B蛋白.等蛋
細胞裂解液各成分的作用：1、第一種50mmol/L Tris-HCl是緩沖液，保證細胞裂解時PH值也能穩定，Tris是一種有機堿。2、第二種1.0 mmol/L EDTA是一種金屬螯合劑。3、第三種150 mmol/L NaCl是等滲體系電解質，用于協調細胞膜內外離子平衡。4、第四種0.1% SDS
12孔板加100－200ul確實偏多，我為了減少上樣體積、增加上樣量，一般是先將細胞消化下來，然后一個50ml的培養瓶細胞沉淀加100－200ul的細胞裂解液，這樣提出的蛋白一般是5-10ug/ul。如果使用直接裂解法的話，12孔板應該可以只用50ul，或者更少，你可以試一下，只要裂解液能覆蓋所有細
裂解液裂解紅細胞靠的是氯化銨，氯化銨通過在其細胞膜進行氫氧根／碳酸氫根和氯離子的交換，改變其滲透壓，造成紅細胞脹大破裂．而外周血淋巴細胞受影響較少據說是因為其細胞膜的離子轉運通道不同．