簡述信使RNA的轉錄過程
分為起始、延長和終止三個階段。起始包括對雙鏈DNA特定部位的識別、局部(17bp)解鏈以及在最初兩個核苷酸間形成磷酸二酯鍵。第一個核苷酸摻入的位置稱為轉錄起點。 起始后起始因子離開,核心酶構象改變,沿模板移動,轉錄生成雜交雙鏈(12bp)。隨后DNA互補鏈取代RNA鏈,恢復DNA雙螺旋結構。延伸速度為50nt/s,酶移動17nm。錯誤幾率為10-5。 聚合酶到達終點時,在終止輔助因子的幫助下停止反應,酶和RNA鏈脫落,轉錄結束。......閱讀全文
信使RNA的mRNA提取分離純化
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取 ,提供了極為方便的選擇性標志,寡聚(dT)纖維素或寡聚(U)
核糖核酸的種類信使RNA
信使RNA(mRNA)最早發現于1960年,在蛋白質合成過程中負責傳遞遺傳信息、直接指導蛋白質合成,具有以下特點。1.含量低,占細胞總RNA的1%~5%。?2.種類多,可達105種。不同基因表達不同的mRNA。3.壽命短,不同mRNA指導合成不同的蛋白質,完成使命后即被降解。細菌mRNA的平均半衰期
信使RNA的基本信息介紹
信使RNA(mRNA)最早發現于1960年,在蛋白質合成過程中負責傳遞遺傳信息、直接指導蛋白質合成,具有以下特點。 1.含量低,占細胞總RNA的1%~5%。 2.種類多,可達105種。不同基因表達不同的mRNA。 3.壽命短,不同mRNA指導合成不同的蛋白質,完成使命后即被降解。細菌mRN
信使RNA的結構功能相關介紹
原核生物mRNA一般5′端有一段不翻譯區,稱前導區,3′端有一段不翻譯區,中間是蛋白質的編碼區,一般編碼幾種蛋白質。真核生物mRNA(細胞質中的)一般由5′端帽子結構、5′端不翻譯區、翻譯區(編碼區)、3′端不翻譯區和3′端聚腺苷酸尾巴構成。分子中除m7G構成帽子外,常含有其他修飾核苷酸,如m6
細胞化學詞匯轉移信使RNA
中文名稱:信使RNA外文名稱:Messenger RNA?定?????? 義:信使RNA,中文譯名“信使核糖核酸”,是由DNA的一條鏈作為模板轉錄而來的、攜帶遺傳信息能指導蛋白質合成的一類單鏈核糖核酸。以細胞中基因為模板,依據堿基互補配對原則轉錄生成mRNA后,mRNA就含有與DNA分子中某些功能片
細胞化學詞匯轉移信使RNA
中文名稱:轉移-信使RNA英文名稱:ransfer-messenger RNA;tmRNA定 義:一類兼有接受(攜帶)氨基酸和編碼氨基酸的雙功能RNA分子。其主要功能是在特定情況下可提前終止蛋白質的生物合成,以免產生不良產物。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
RNA的轉錄和逆轉錄
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大
RNA-反轉錄
?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p
RNA-反轉錄
? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo
雙信使系統的反應過程
Ca2+活化各種Ca2+結合蛋白引起細胞反應,鈣調素(calmodulin,CaM)由單一肽鏈構成,具有四個鈣離子結合部位。結合鈣離子發生構象改變,可激活鈣調素依賴性激酶(CaM-Kinase)。細胞對Ca2+的反應取決于細胞內鈣結合蛋白和鈣調素依賴性激酶的種類。如:在哺乳類腦神經元突觸處鈣調素依賴
信使RNA提取分離的操作步驟介紹
1.將0.5-1.0g寡聚(dT)-纖維懸浮于0.1M的NaOH溶液中。 2.用DEPC處理的1ml注射器或適當的吸管,將寡聚(dT)-纖維素裝柱0.5-1ml,用3倍柱床體積的DEPC H2O洗柱。 3.使用1×上樣緩沖液洗柱,直至洗出液pH值小于8.0。 4.將RNA溶解于DEPC H
信使RNA的檢測、分析及定量介紹
對mRNA的檢測、分析及定量方法目標RNA的類型同時定量的目標RNA的數量用途缺點Northern雜交mRNA通常為一個,最多幾個。主要用于估測不同組織、細胞中目標mRNA的分子質量,可用于mRNA的粗略定量。需要大量RNA;只可同時檢測一個或最多幾個mRNA;與PCR方法相比,靈敏度差、耗時。RN
信使RNA的拼接相關內容
一、轉運RNA的拼接:由酶催化,酶識別共同的二級結構,而不是序列。通常內含子插入到靠近反密碼子處,與反密碼子配對,取代反密碼子環。第一步由內切酶切除插入序列,不需ATP;第二步由RNA連接酶連接,需要ATP。 二、四膜蟲核糖體RNA的拼接:某些四膜蟲26S核糖體RNA基因中有一個內含子,其拼接
關于信使RNA噬菌體QbRNA的復制
其RNA是單鏈,正鏈,侵入大腸桿菌后立即翻譯,產生復制酶的b亞基,與宿主的三個亞基(α為核糖體蛋白,γ、δ均為肽鏈延長因子)構成復制酶,進行復制。先以正鏈為模板合成負鏈,再根據負鏈合成正鏈。合成負鏈時需要宿主的兩個蛋白因子,合成正鏈則不需要,所以可大量合成。病毒的蛋白質合成受RNA高級結構的調控
關于信使RNA的提取分享試劑準備
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性標志,寡聚(dT)纖維素或寡聚(U
關于信使RNA的發現時間介紹
儲存在DNA分子中的這種遺傳信息能在復制中產生更多的拷貝,并翻譯成蛋白質。DNA的功能構成了信息的流動,遺傳信息如何轉變成蛋白質呢?轉錄就是其中的重要的一環。基因表達時以DNA的一條鏈為模板合成RNA,這一過程就是轉錄(transcription)。催化合成RNA的酶叫做RNA聚合酶(RNA p
RNA復制、轉錄與逆轉錄
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大
RNA轉錄的技術特點
轉錄時,細胞通過堿基互補的原則來生成一條帶有互補堿基的mRNA,通過它攜帶密碼子到核糖體中可以實現蛋白質的合成。與DNA的復制相比,轉錄有很多相同或相似之處,亦有其自己的特點。轉錄中,一個基因會被讀取并復制為mRNA。就是說,以特定的DNA片段作為模板,以DNA依賴的RNA聚合酶作為催化劑,合成前體
信使RNA的真核生物的相關介紹
一、核糖體RNA:基因拷貝數多,在幾十到幾千之間。基因成簇排列在一起,由RNA聚合酶I轉錄生成一個較長的前體,哺乳動物為45S。核仁是rRNA合成與核糖體亞基生物合成的場所。RNA酶III等核酸內切酶在加工中起重要作用。5SRNA基因也是成簇排列的,由RNA聚合酶III轉錄,經加工參與構成大亞基
信使RNA的原核生物的相關介紹
一、核糖體RNA:大腸桿菌共有7個核糖體RNA的轉錄單位,每個轉錄單位由16S、23S、5SRNA和若干轉運RNA基因組成。16S和23S之間常由轉運RNA隔開。轉錄產物在RNA酶III的作用下裂解產生核糖體RNA的前體P16和P23,再由相應成熟酶加工切除附加序列。前體加工時還進行甲基化,產生
RNA-大量轉錄合成
實驗材料 模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒 TE TE 飽和酚 氯仿異內醇 3mol LNaAc 無水乙醇 5X 轉錄緩沖液 lOOmmoL LDTT RNasin rATPrGTPrUTPrCTP SF6T3 或 T7RNA 聚合酶 異戊醇 DNase 7.5mol L 乙酸銨 無水乙醇 乙醇實驗
3.5-RNA-反轉錄
利用 RNA 模板通過反轉錄獲得 DNA,進而復制和感染細胞實驗材料poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒oligo(dT)12-18lmol LTris-Cl1mol LTris-Cllmol LKC125 mmol LMgCl2dNTP 混合物0.lmol LDTT
RNA-標準轉錄反應
? ? ? ? ? ? 實驗材料 模板 DNA 或質粒 試劑、試劑盒 TE 異丙醇 3mol LNaAc
RNA-大量轉錄合成
? ? ? ? ? ? 實驗材料 模板 DNA 或質粒 試劑、試劑盒 TE ? TE 飽和酚 ? 氯仿
RNA-標準轉錄反應
實驗材料 模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒 TE 異丙醇 3mol LNaAc 無水乙醇 5×轉錄緩沖液 l00 mmol L DTT RNasin rATPrGTPrUTP 各 2.5 mmol L [α42P] rCTP SPGT3 或 T7RNA 聚合酶 TE-飽和的酚氯仿異戊醇 DN
信使RNA的存在范圍和性質相關介紹
mRNA存在于原核和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器(如和)中。RNA病毒和RNA噬菌體中的 RNA既是遺傳信息的載體又具有mRNA的功能。生物體mRNA種類的多少與生物進化水平有關,高等生物所含的遺傳信息多,mRNA的種類也多。生物體內某種mRNA的含量根據需要而有不同,如5齡蠶后部絲腺
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄的區別
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄過程在總體上基本相同,但是,其過程要復雜得多,主要有以下幾點不同: 1、真核生物RNA的轉錄有的是在細胞核內進行的,而蛋白質的合成則是在細胞質內進行的。且真核生物線粒體和葉綠體的遺傳信息系統被稱為真核細胞的第二遺傳信息系統,或核外基因及其表達體系。這是
科學家用信使RNA研制疫苗
本周的《自然―生物技術》報道了一種僅由信使RNA組成的疫苗,這種疫苗可保護動物不受流感傳染。若能證實該疫苗對人體有效,那么流感疫苗的研發與生產周期或將從目前的數月縮短至數星期,對流行疾病的反應速度也將更快。 目前的流感疫苗是通過在雞蛋中接種或者細胞培養的方式獲得,其生產過程煩瑣、耗時。這意
轉錄的過程介紹
在轉錄過程中,DNA模板被轉錄方向是從3′端向5′端;RNA鏈的合成方向是從5′端向3′端。RNA的合成一般分兩步,第一步合成原始轉錄產物(過程包括轉錄的啟動、延伸和終止);第二步轉錄產物的后加工,使無生物活性的原始轉錄產物轉變成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始轉錄產物一般不需后加工
RNA的轉錄與逆轉錄相關介紹
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大