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按復制形式 分為嚴緊型和松弛型復制。 根據質粒DNA復制與宿主之間的關系或在宿主細胞的拷貝數的多少，可以將質粒分為兩種不同的復制類型：嚴緊型和松弛型。嚴緊型質粒復制受宿主染色體DNA復制的嚴格控制，拷貝數較小一般只有1~3個拷貝。疏松型質粒的復制宿主的控制比較松，在宿主中的拷貝數比較多，一般有10~200個拷貝，有時可達到700個。 按基因轉移性 分兩類： （1）傳遞性質粒：常為大型、嚴緊型質粒； （2）非傳遞性質粒：多為小型、松弛型質粒。 按遺傳性狀、產物分類 （1）抗生素抗性：如氨芐西林、氯霉素抗性； （2）限制酶-修飾酶（R-M）系統：如hsdR-菌株可使DNA甲基化，但不限制外源DNA；hsd-菌株為限制和甲基化雙缺陷型。 人工構建的質粒載體分類 高拷貝數的質粒載體 ColE1、pMB1派生質粒具有高拷貝數的特點。適合大量增殖克隆基因，或需要大量表達的基因產物。 低拷貝數的質粒載體 由 p......閱讀全文
按復制形式 分為嚴緊型和松弛型復制。 根據質粒DNA復制與宿主之間的關系或在宿主細胞的拷貝數的多少，可以將質粒分為兩種不同的復制類型：嚴緊型和松弛型。嚴緊型質粒復制受宿主染色體DNA復制的嚴格控制，拷貝數較小一般只有1~3個拷貝。疏松型質粒的復制宿主的控制比較松，在宿主中的拷貝數比較多，一般
質粒是小型環狀DNA分子，在基因工程中作為最常用，最簡單的載體，必須包括三部分：遺傳標記基因，復制區，目的基因。 質粒在所有的細菌類群中都可發現，它們是獨立于細菌染色體外自我復制的DNA分子。自然界中，質粒是在營養充足時出現的，它在結構、大小、復制方式，每個細菌的拷貝數，在不同的細菌體內的繁殖力
大的質粒（大于15kb）不會很好轉化而且DNA產量通常很低。在設計實驗時要考慮到加入插入片段的最終載體大小，盡量用更小的載體。 兼容性 當多于一個質粒載體必須同時存在于同一個細菌細胞中，這兩個質粒的復制子必須是兼容的。當他們不能穩定地共存時，則認為這兩個質粒是不兼容的。 選擇/檢測插入片段
基因載體，即gene delivery或gene vector,是作為基因導入細胞的工具。猶如火箭能把衛星射向九天一樣，基因載體可以把目的基因送入靶細胞內，然后將目的基因釋放出來，有的目的基因還可以整合到細胞核中，從而發揮目的基因的特定功能。 1. 基因載體是把基因導入細胞的工具，它的作用是①
質粒（plasmid）是細菌或細胞染色質以外的，能自主復制的，與細菌或細胞共生的遺傳成分。其特點如下： 是染色質外的雙鏈共價閉合環形DNA （covalently closed circular DNA,cccDNA），可自然形成超螺旋結構，不同質粒大小在2-300kb之間，15kb的大質粒
選擇質粒載體的要素是要了解可用到的載體的特征和預測重組克隆所用于的實驗。 所有的質粒載體都有三個共同的特征：一個復制子、一個選擇性標志和一個克隆位點。復制子是含有DNA復制起始位點的一段DNA（ori），也包括表達由質粒編碼的復制必需的RNA和蛋白質的基因。選擇性標志對于質粒在細胞內持續存在時
一、質粒絕大多數的生物都是以DNA 的形式來儲藏其遺傳信息。遺傳物質要能生生不息地傳給后代的首要條件就是它至少要具有一個復制原(ori, origin of replication，或譯為復制起點)，使整個基因體得以復制。含有復制原的遺傳物質稱為replicon，我們姑且把它譯為為復制體吧！原核性復
載體蛋白又稱做載體（carrier）、通透酶（permease）或轉運器（transporter）。能夠與特異性溶質結合，通過自身構象的變化，將與它結合的溶質轉移到膜的另一側 載體蛋白，是多回旋折疊的跨膜蛋白質，它與被傳遞的分子特異結合使其越過質膜。其機制是載體蛋白分子的構象可逆地變化，與被轉
載體蛋白運輸物質的動力學曲線具有“膜結合酶”的特征，運輸速度在一定濃度時達到飽和。但載體蛋白不是酶，它與被運載分子不是共價結合，此外它不僅加快運輸速度，也增大物質透過質膜的量。載體蛋白與運載分子有特異的結合位點，能被競爭性抑制物占據，非競爭性抑制物亦可與載體蛋白在結合位點之外結合，改變其構象，阻
質粒載體是在天然質粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構建的質粒。與天然質粒相比，質粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基因（如抗生素抗性基因）和一個人工合成的含有多個限制性內切酶識別位點的多克隆位點序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。