①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用鉛筆在濾膜上標好位置,將DNA點樣于膜上,每個樣品一般點5μl(2~10μg DNA)。④將膜烘干,密封保存備用。......閱讀全文
①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用鉛筆在濾膜上標好位置,將DNA點樣于膜上,每個樣品一般點5μl(2~10μg DNA)。④將膜烘干,密封保存備用。
①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用鉛筆在濾膜上標好位置,將DNA點樣于膜上,每個樣品一般點5μl(2~10μg DNA)。④將膜烘干,密封保存備用。
①先將膜在水中浸濕,再放到15×SSC中。 ②將DNA樣品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。 ③用鉛筆在濾膜上標好位置,將DNA點樣于膜上,每個樣品一般點5μl(2~10μg DNA)。 ④將膜烘干,密封保存備用。
核酸雜交法檢測病原微生物 核酸雜交技術是根據兩條互補的核苷酸單鏈可以雜交結合成雙鏈的原理所建立,用一段已知序列的放射性或非放射性標記的核苷酸單鏈做探針,與待檢標本中的DNA雜交來探查待檢標本中有無與之相互補的核酸。該方法特異性高,但敏感性低于PCR方法。 本實驗學習用非放射性標記物-地高辛(DI
斑點雜交(Dot blot)是將被檢標本點到膜上,烘烤固定。這種方法耗時短,可做半定量分析。一張膜上可同時檢測多個樣品,為使點樣準確方便,市售有多種多管吸印儀(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它們有許多孔,樣品加到孔中,在負壓下
實驗概要將RNA ?或DNA 變性后直接點樣于硝酸纖維素膜上,同探針進行雜交,用于基因組中特定基因及其表達的定性及定量研究,稱為斑點印跡。與Southern ?及Nouthern ?印跡法相比,其優點是簡單、迅速,可在一張膜上同時進行多個樣品的檢測,特別是對于核酸粗提樣晶的檢測。缺點是不能鑒定所測基
是指將待測的DNA變性后點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜,NC膜)上,用已標記的探針進行雜交,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影,判斷是否有雜交及其雜交強度,主要用于基因缺失或拷貝數改變的檢測。 斑點雜交(Dot blot)是將被檢標本點到膜上,烘烤固定。這種方法耗時短,可做半定量分析。一張膜上可同時
是指將待測的DNA變性后點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜,NC膜)上,用已標記的探針進行雜交,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影,判斷是否有雜交及其雜交強度,主要用于基因缺失或拷貝數改變的檢測。 斑點雜交(Dot blot)是將被檢標本點到膜上,烘烤固定。這種方法耗時短,可做半定量分析。一張膜上可同時
一、實驗原理用地高辛標記的HCV RNA探針檢測HCV RT-PCR產物。二、實驗步驟1. 處理:將尼龍膜浸泡于20×SSC中吸足液體后,夾在兩層濾紙中37℃烘烤20-30 min。(將尼龍膜置入烤箱后立即進行下一步操作)2. 變性:【原理】 使DNA樣品變性,即雙鏈DNA→單鏈DNA。將待測DNA
實驗材料貼壁生長良好的單層 BS-C-1 或 HuTK-143B 細胞重組病毒噬斑懸液試劑、試劑盒NaOHTris ? Cl2×SSCPBS胰酶/EDTA干冰/乙醇DNA 提取緩沖液乙酸鈉乙醇PCR 擴增緩沖液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培養基完全 MEM-10/BrdU