關于醋酸纖維素薄膜電泳法的介紹
(1) 醋酸纖維素薄膜 取醋酸纖維素薄膜,裁成2cm×8cm的膜條,將無光澤面向下,浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夾于濾紙中,輕輕吸去多余的緩沖液后,將膜條無光澤面向上,置電泳槽架上,經濾紙橋浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中。 (2) 點樣與電泳 于膜條上距負極端2cm處,條狀滴加蛋白含量約5%的供試品溶液2~3μl,在10~12V/cm電位梯度下電泳。電泳區帶距離以4~5cm為宜。 (3) 染色 電泳完畢,將膜條取下浸于氨基黑染色液中,2~3分鐘后,用漂洗液浸洗數次,直至脫去底色止止。 (4) 透明 將洗凈并完全干后的膜條浸于透明液中10~15分鐘,取出平鋪于潔凈的玻板上,干后即成透明薄膜,可于分光光度計上測定和作標本長期保存。 (5) 含量測定 未經透明處理的醋酸纖維素薄膜電泳圖可按各藥品項下規定的方法測定,一般采用洗脫法或掃描法,測定各蛋白質組分的相對含量(1%)。......閱讀全文
關于醋酸纖維素薄膜電泳法的介紹
(1) 醋酸纖維素薄膜 取醋酸纖維素薄膜,裁成2cm×8cm的膜條,將無光澤面向下,浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夾于濾紙中,輕輕吸去多余的緩沖液后,將膜條無光澤面向上,置電泳槽架上,經濾紙橋浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中。 (2) 點樣與電泳 于膜條上距負極端2cm處,
醋酸纖維素薄膜電泳法
儀器裝置電泳室及直流電源同紙電泳。 2.試劑(1) 巴比妥緩沖液(pH8.6)取巴比妥2.76g,巴比妥鈉15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5m
關于電泳法—醋酸纖維素薄膜電泳法的操作法介紹
(1)醋酸纖維素薄膜電泳法—??醋酸纖維素薄膜 取醋酸纖維素薄膜,裁成2cm×8cm的膜條,將無光澤面向下,浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夾于濾紙中,輕輕吸去多余的緩沖液后,將膜條無光澤面向上,置電泳槽架上,經濾紙橋浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中。 (2) 醋酸纖維素薄膜
關于醋酸纖維素薄膜電泳的特點介紹
1.(1)醋酸纖維薄膜對蛋白質樣品吸附極少,無“拖尾”現象,染色后背景能完全脫色,各種蛋白質染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性。 (2)快速省時。由于醋酸纖維薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45
醋酸纖維素薄膜電泳介紹
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品
醋酸纖維素薄膜電泳法的操作法的介紹
(1) 醋酸纖維素薄膜 取醋酸纖維素薄膜,裁成2cm×8cm的膜條,將無光澤面向下,浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中,待完全浸透,取出夾于濾紙中,輕輕吸去多余的緩沖液后,將膜條無光澤面向上,置電泳槽架上,經濾紙橋浸入巴比妥緩沖液(pH8.6)中。 (2) 點樣與電泳 于膜條上距負極端2cm處,
關于醋酸纖維素薄膜電泳的補充分析介紹
根據樣品理化性質,從提高電泳速度和分辨力出發選擇緩沖液的種類,pH和離子強度。選擇好的緩沖液最好是揮發性強,對顯色或紫外光等觀察區帶沒有影響,若樣品含鹽量較高時,宜采用含鹽緩沖液。例如血清蛋白電泳可選用pH8.6的巴比妥緩沖液或硼酸緩沖液;氨基酸的分離則可選用pH7.2的磷酸鹽緩沖液等。電泳時先
關于醋酸纖維素薄膜電泳的注意事項介紹
1、醋酸纖維素薄膜電泳— 電量的選擇 電泳過程應選擇合適的電流強度,一般電流強度為0.4mA/cm—0.5mA/cm寬膜為宜。電流強度高,尤其在溫度較高的環境中,可引起蛋白質變性或由于熱效應引起緩沖液中水分蒸發,使緩沖液濃度增加,造成膜片干涸。電流過低,則樣品泳動速度慢且易擴散。 2、醋酸纖
醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品處幾乎完全
醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品處幾乎完全
醋酸纖維素薄膜電泳
6、定量(1)浸泡 將膜片上的各蛋白質分離區帶分段剪下,分別置于相應的標有編號的試管內,然后各加入0.4mol/L的氫氧化鈉溶液進行浸泡。浸泡淡色帶所加入的0.4mol/L氫氧化鈉溶液的量為4ml,深色帶為8ml(此時的稀釋倍數是淡色帶的2倍)。室溫下的浸泡時間為 30min~60min
關于醋酸纖維素薄膜電泳—醋酸纖維薄膜的預處理的介紹
市售醋酸纖維薄膜均為干膜片,薄膜的浸潤與選膜是電泳成敗的重要關鍵之一。將干膜片漂浮于電極緩沖液表面,其目的是選擇膜片厚薄及均勻度,如漂浮15s—30s時,膜片吸水不均勻,則有白斑點或條紋,這提示膜片厚薄不勻,應舍去不用,以免造成電泳后區帶扭曲,界線不清,背景脫色困難,結果難以重復。由于醋酸纖維薄
關于醋酸纖維素薄膜電泳—加樣量的基本介紹
醋酸纖維素薄膜電泳—加樣量:加樣品的多少與電泳條件、樣品的性質、染色方法與檢測手段靈敏度密切相關。作為一般原則,檢測方法越靈敏,加樣量則越少,對分離更有利。如加樣量過大,則電泳后區帶分離不清楚,甚至互相干擾,染色也較費時。如電泳后用洗脫法定量時,每厘米加樣線上需加樣品0.1μl—0.5μl約相當
關于醋酸纖維素薄膜電泳的基本原理介紹
醋酸纖維薄膜電泳(cellulose acetate membrane electrophoresis)以醋酸纖維薄膜為支持物。它是纖維素的醋酸酯,由纖維素的羥基經乙酰化而制成。 一、醋酸纖維素薄膜電泳的原理: 它溶于丙酮等有機溶液中,即可涂布成均一細密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15
醋酸纖維素薄膜電泳的特點
醋酸纖維素是指纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯,由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質吸附小,能消除電泳中出現的“拖尾”現象。具有分離速度快、樣品用量小的特點,適合于病理情況下異常蛋白的檢測。
醋酸纖維素薄膜電泳的特點
醋酸纖維素是指纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯,由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質吸附小,能消除電泳中出現的“拖尾”現象。具有分離速度快、樣品用量小的特點,適合于病理情況下異常蛋白的檢測。
關于醋酸纖維素薄膜電泳—緩沖液的選擇
醋酸纖維薄膜電泳常選用pH8.6巴比妥溶液,其濃度為0.05mol/L—0.09mol/L。選擇何種濃度與樣品及薄膜的薄厚有關。選擇時,先初步定下某一濃度,如電泳槽兩極之間的膜長度為8 cm—10cm,則需電壓25V/cm膜長,電流強度為0.4mA/cm—0.5mA/cm膜寬。當電泳達不到或超過
醋酸纖維素薄膜電泳法的操作過程和所需儀器
1.儀器裝置電泳室及直流電源同紙電泳。2.試劑(1) 巴比妥緩沖液(pH8.6)取巴比妥 2.76g,巴比妥鈉15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液取乙醇 45ml、冰醋酸5ml及
血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
實驗概要血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳技術實驗原理? ? ? 帶電粒子在電場中移動的現象稱為電泳。電泳技術被廣泛用于蛋白質、核酸和氨基酸等物質的分離和鑒定,電泳過程中帶電粒子的移動速度與粒子荷電量、電場強度、粒子重量與半徑及介質的粘度等有關。其中粒子荷電量又受周圍介質的pH和離子強度的影響;電場強度
電泳分析常用方法醋酸纖維素薄膜電泳法操作方法
1.儀器裝置 電泳室及直流電源同紙電泳。 2.試劑 (1) 巴比妥緩沖液(pH8.6) 取巴比妥 2.76g,巴比妥鈉15.45g,加水溶解使成1000ml。 (2) 氨基黑染色液 取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液
醋酸纖維素薄膜電泳法分離鑒定三種腺苷酸
一、目的掌握醋酸纖維素薄膜電泳法分離帶電顆粒原理;觀察核苷酸類物質的紫外吸收現象。二、原理帶電粒子在電場中向著與其自身帶相反電荷的電極移動的現象,稱為電泳。控制電泳條件(如pH 等),使混合試樣中的不同組分帶有不同的凈電荷,各組分在電場中移動的速度或方向各不相同,從而達到分離各組分的目的,這就是
電泳分析常用方法醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品用量少,5μg 的蛋白質可得到
乙酸纖維素薄膜電泳
中文名稱乙酸纖維素薄膜電泳英文名稱cellulose acetate film electrophoresis定 義用乙酸纖維素薄膜作支持介質的一種區帶電泳。常用于蛋白質電泳分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
醋-酸纖維素薄膜電泳技術介紹
醋酸纖維素薄膜電泳是利用醋酸纖維素薄膜做固體支持物的電泳技術。醋酸纖維薄膜具有勻一的泡沫狀結構(厚約 120 μ m ),滲透性強,對分子移動無阻力,用它做區帶電泳的支持物,用樣量少,分離清晰,無吸附作用,應用范圍廣和快速簡便 , 且染色后的薄膜可用乙醇和冰醋酸溶液浸泡透明,透明后的薄膜便于保
異常血紅蛋白篩查——醋酸纖維薄膜電泳法
實驗方法原理血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白的多肽鏈有a、b、d 、e、g和z六種。這六種肽鏈的基因在人體發育的不同階段表達狀況不一。正常成人紅細胞中有三種血紅蛋白即HbA、? HbA2 和 HbF。HbA(a2b2)是正常成人紅細胞中的最主要的血紅蛋白,占紅細胞內血
醋酸纖維素薄膜電泳測定血清蛋白質有什么臨床意義
血清蛋白電泳是用電泳的方法,測定血清中各類蛋白占總蛋白量的百分比。血清中的蛋白按照電泳時候的電泳速度不同,可以區分開來,分子量越小帶電荷越多、泳動速度就會越快。一般可以粗略的分為清蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白和γ球蛋白。正常情況下白蛋白的數量是最多的,其次是γ球蛋白和β球蛋白。在骨髓瘤的用
醋酸纖維素薄膜電泳測定血清蛋白質有什么臨床意義
血清蛋白電泳是用電泳的方法,測定血清中各類蛋白占總蛋白量的百分比。血清中的蛋白按照電泳時候的電泳速度不同,可以區分開來,分子量越小帶電荷越多、泳動速度就會越快。一般可以粗略的分為清蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白和γ球蛋白。正常情況下白蛋白的數量是最多的,其次是γ球蛋白和β球蛋白。在骨髓瘤的用
醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白原理和實驗方法
一、原理醋酸纖維薄膜電泳是用醋酸纖維素薄膜作為支持物的電泳方法。帶電顆粒在電場力作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。由于各種蛋白質都有特定的等電點,如將蛋白質置于pH值低于其等電點的溶液中,則蛋白質將帶正電荷而向負極移動。反之,則向正極移動。因為蛋白質分子在電場中移動的速度與其帶電量、
乙酸纖維素薄膜電泳的定義和應用
中文名稱乙酸纖維素薄膜電泳英文名稱cellulose acetate film electrophoresis定 義用乙酸纖維素薄膜作支持介質的一種區帶電泳。常用于蛋白質電泳分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
醋酸纖維素的簡介
中文名稱: 乙酸纖維素 中文同義詞: 醋酸纖維素;二醋酸纖維板;纖維素醋酯,乙酸纖維素;乙酸纖維素;一醋酸纖維素;二乙酸纖維素;乙酰基纖維素;乙酸纖維素(醋酸纖維素) 英文名稱: CELLULOSE ACETATE 英文同義詞: a432-130b;acetatecotton;acetateeste