關于青蒿素的提取純化的介紹
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。 溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。 堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥,將其溶于乙醚-水兩相溶液中,分別得到青蒿素和青蒿酸。此種方法的青蒿酸收率達到90%,青蒿素的提取率為57%。 乙醇法:取一定量的青蒿枝葉干粉,用稀乙醇浸泡24h,得到乙醇提取液,將其注入連續萃取裝置,再用含苯和乙酸乙酯的溶劑汽油萃取,得到醇相和萃取相,醇相可循環使用,萃取相用活性炭脫色,過濾,回收溶劑,然后得到濃溶液,再冷卻結晶得到青蒿素粗晶物,再用乙醇重結晶得到青蒿素成品。此方法有收率較高,成本較低,步驟較少,操作簡單,安全等優點。 溶劑汽油法:取一定量的青蒿枝葉干粉,用8~10倍120號溶劑汽油浸泡3次,得到溶劑汽油提取液,......閱讀全文
關于青蒿素的提取純化的介紹
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。 溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。 堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥
青蒿素的提取純化方法
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法,乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產,此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。堿水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提,得到乙醇提取液,減壓干燥,將其溶于乙
關于魚精蛋白的提取和純化介紹
1、魚精蛋白的提取: 成熟精巢組織——均漿——硫酸酸解——NACL溶液提取——四層紗布過濾——加乙醇沉淀雜蛋白——離心——上清液——加TCA溶液沉淀——離心——魚精蛋白硫酸鹽 [1] 2、魚精蛋白的純化: 分離提取后的魚精蛋白必須純化。利用魚精蛋白的電荷和分子大小,分別采用聚丙烯酰胺等電聚
酶的提取和分離純化介紹
許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎開來。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶
核酸提取與純化介紹
核酸提取是分子生物學的基本組成部分,因高質量的核酸是分子生物學上的應用至關重要。 我們將會總結一些現用核酸提取技術和針對樣品類型選擇正確提取方法的小建議;也會提及評估核酸濃度和質量,以及核酸提取過程中的常見問題。 a. 為什么需要核酸提取? 核酸提取為大量廣泛研究和應用提供了答案(例如:克
關于青蒿素的基本介紹
青蒿素(Artemisinin)是一種有機化合物,分子式為C15H22O5,相對分子質量282.34。? 青蒿素為無色針狀結晶,熔點為156~157℃,易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯和苯,可溶于乙醇、乙醚,微溶于冷石油醚,幾乎不溶于水。因其具有特殊的過氧基團,它對熱不穩定,易受濕、熱和還原性物質的
DNA的提取和純化
1 DNA提取⑴ 新鮮外周靜脈血3~5ml,以ACD(檸檬酸納緩沖液)1/7體積抗凝;⑵ 3500rpm 15分鐘離心,吸除上層血漿;⑶ 加5倍體積蒸餾水(滅菌),搖勻,靜置5~10分鐘,3500rpm15分鐘離心,去上清,(若沉淀不夠,可重復1~2次);⑷ 吸取沉淀(少許液體)放入1.5ml離心管
關于青蒿素的分布情況介紹
青蒿素主要是從青蒿中直接提取得到的,或提取青蒿中含量較高的青蒿酸,然后半合成得到的。青蒿雖然在世界各地廣泛分布,但青蒿素含量隨產地不同差異極大,具有顯著的生態顯著性。根據研究得知,除了中國部分地區外,世界絕大多數地區生產的青蒿中的青蒿素含量都很低,并無利用價值。
關于青蒿素的作用機理介紹
與以往的抗瘧藥物不同,青蒿素抗瘧機理的主要作用是通過對瘧原蟲表膜線粒體等的功能進行干擾,首先作用于食物泡膜、表膜、線粒體,其次作用于核膜、內質網,對核內染色質也有一定的影響,最終導致蟲體結構的全部瓦解,而不是借助于干擾瘧原蟲的葉酸代謝。其作用機制也可能主要是干擾表膜一線粒體的功能,作用于食物泡膜
關于青蒿素的研究背景介紹
瘧疾是人類最古老的疾病之一,迄今依然還是一個全球廣泛關注且亟待解決的重要公共衛生問題。 1631年,意大利傳教士薩魯布里諾(AgostinoSalumbrino)從南美洲秘魯人那里獲得了一種有效治療熱病的藥物——金雞納樹皮(cinchonabark)并將之帶回歐洲用于熱病治療,不久人們發現該藥
關于青蒿素的還原反應介紹
青蒿素溶于甲醇,在冰浴中(0~5℃)攪拌分次慢慢加入固體硼氫化鈉,加完后繼續攪拌半小時。反應液用冰醋酸中和,減壓除去溶媒,即得到化合物Ⅴ(圖1中的Ⅴ)的粗結晶產物,它是用硼氫化鈉還原青蒿素而得到的半縮醛化合物。如用鈀-碳酸鈣在常溫常壓下進行催化氫化,則會失去氧而得到環氧化合物。
關于青蒿素的生物合成的介紹
青蒿素存在于中草藥青蒿的花葉中,莖中不含有,是一種含量非常低的萜類化合物,生物合成途徑非常復雜。 現已知可通過三種方式進行青蒿素的生物合成,一是通過對控制青蒿素合成的關鍵酶進行調控,添加生物合成的前體來增加青蒿素的含量;二是激活關鍵酶控制的基因,大幅度增加青蒿素的含量;三是利用基因工程手段改變
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指
RNA-的提取和純化實驗
雖然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位點,但并不推薦使用 poly(A)+RNA,因為在反轉錄反應中可能污染寡核苷酸,并因此增加假陽性的概率。所以建議使用總 RNA 做 FDD 分析。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒氯仿焦
氧化鏑的提取純化方法
一種氧化鏑的提取純化方法,包括如下步驟:1、待提純液配置:配置待提純氧化鏑混合溶液;2、中間劑配置:配置延緩劑和淋洗劑,延緩劑為Cu(NO3)2·3H2O、水和硝酸配置而成,淋洗劑為固體EDTA酸、水和氨水配置而成;3、分離柱準備:分離柱作為離子交換的載體;4、淋洗柱Chemicalbook轉型:對
mRNA的提取及純化實驗
實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 mRNA分離試劑盒異丙醇NaAC儀器、耗材 儀器水浴離心機取液器分光光度計實驗步驟 一、生物素標記的Oligo(dT)探針與mRNA的煺火1. ?在DEPC處理過的1.5 ml Eppendof管中,加入0.2-1 mg 的總RNA和無RNase的水至終體積為0.5
質粒DNA的提取與純化
一、實驗目的與原理?質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子,是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作,進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。?提取質粒的基本步驟分為三步:?①細菌的培養和質粒的擴增?②細菌菌體的裂解?③質粒DNA的純化?本實驗采取的菌體
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理 許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法
RNA-的提取和純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 異丙醇 苯酚-胍鹽單相溶液 磷酸鹽緩沖液
質粒DNA的提取與純化
一、實驗目的與原理質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子,是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作,進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。提取質粒的基本步驟分為三步:①細菌的培養和質粒的擴增,②細菌菌體的裂解,③質粒DNA的純化。本實驗采取的菌體裂解方
RNA-的提取和純化實驗
試劑、試劑盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭移液器離心管錐形管平板勻漿器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿焦碳酸二乙酯(DEPC) 處理過的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液(用 DEPC 處理過的 H20 配制)
如何對提取的DNA純化
質粒DNA的提取、純化和電泳檢測摘要本實驗通過堿變性法提取E.coli DH5α(pUC19)的質粒DNA,并且通過一系列的分離純化技術將其質粒DNA與染色體DNA、RNA、蛋白質等雜質分開從而得到純化的質粒DNA分子。通過瓊脂糖凝膠電泳可以通過DNA條帶的位置來大致判斷其分子大小,也可以將實際電泳
mRNA的提取及純化實驗
磁珠法 親和柱層析法 親和柱層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA
信使核糖核酸的提取、分離和純化介紹
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性標志,寡聚(dT)纖維素或寡聚(U
關于雙氫青蒿素的基本介紹
雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin),為青蒿素的衍生物,對瘧原蟲紅內期有強大且快速的殺滅作用,能迅速控制臨床發作及癥狀。主要干擾瘧原蟲的表膜-線粒體功能。青蒿素通過影響瘧原蟲紅內期的超微結構,使其膜系結構發生變化,阻斷瘧原蟲的營養攝取,當瘧原蟲損失大量胞漿和營養物質,而又得不到補充
關于青蒿素與堿反應的介紹
青蒿素加甲醇溶解,另取碳酸鉀溶于水,將此碳酸鉀溶液在攪拌下緩緩加入青蒿素甲醇溶液,使成均勻混和成澄清液,在20~22℃恒溫1h,加入水,用乙醚提取兩次,醚層用少量水洗2次,水層用φ=10%鹽酸酸化至pH=2,再用乙醚提取3次。乙醚層用水洗至中性,經無水硫酸鈉干燥2~3h,乙醚層減壓抽干,所得殘余
關于青蒿素的抗腫瘤的應用介紹
惡性腫瘤是危害人類健康的第一大殺手,若不及時醫治則會危害生命安全。體外實驗表明,一定劑量的青蒿素可以使肝癌細胞、乳腺癌細胞、宮頸癌細胞等多種癌細胞的凋亡,明顯抑制癌細胞的生長。研究發現,青蒿素可以調控腫瘤細胞的周期蛋白表達,增強CKIs作用,導致腫瘤細胞周期阻滯;或者導致細胞凋亡,抑制腫瘤血管生
關于青蒿素的衍生物的介紹
青蒿素及其衍生物都是一種含過氧化基團的倍半萜內酯化合物。 [22] 將青蒿素結構中的C-10位羧基還原成羥基可以得到雙氫青蒿素,而進一步烷氧基化就得到蒿甲醚,而進行酯化就可得到青蒿琥酯。 [23] 青蒿琥酯對白血病、大腸癌、黑色素瘤、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和腎癌細胞均有抑制作用。 雙氫青蒿
mRNA提取、分離純化
從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工等一系列問題。總之