DNA酶保護分析的方法用途
中文名稱DNA酶保護分析英文名稱DNase protection assay定 義主要用來檢測染色質結構與功能狀態的方法。當染色質結構致密,DNA被組蛋白壓縮很緊時,基因是不表達的,同時也對DNA酶不敏感。反之,結構蓬松、活躍進行基因表達的染色質,則易遭DNA酶的降解。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文
DNA酶保護分析的方法用途
中文名稱DNA酶保護分析英文名稱DNase protection assay定 義主要用來檢測染色質結構與功能狀態的方法。當染色質結構致密,DNA被組蛋白壓縮很緊時,基因是不表達的,同時也對DNA酶不敏感。反之,結構蓬松、活躍進行基因表達的染色質,則易遭DNA酶的降解。應用學科生物化學與分子生物學
DMS保護分析的方法用途
中文名稱DMS保護分析英文名稱dimethyl sulfate protection assay;DMS protection assay定 義與DNA酶足跡法類似的技術,但不用DNA酶來分解未被蛋白質結合保護的DNA部分,而是用硫酸二甲酯(DMS)來使未受保護的DNA甲基化,DNA可以在甲基化位
DNA聚合酶的用途
聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物,3'末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基,而這個堿基幾乎總是A,因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性,故可用T載體克隆。
DNA連接酶的用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“基因針線”。人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
DNA連接酶的用途
聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物,3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基,而這個堿基幾乎總是A,因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性,故可用T載體克隆。
DNA-連接酶的用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“基因針線”。人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
簡述DNA連接酶的用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶“剪”出的粘性末端重新組合,故也稱“基因針線”。 人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
DNA聚合酶的用途和缺陷
用途聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物,3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基,而這個堿基幾乎總是A,因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性,故可用T載體克隆。缺點無3’→5’閱讀校正功能,在PCR擴增過程可引起錯配,30次循環
核酸酶保護分析的方法特點和應用
中文名稱核酸酶保護分析英文名稱nuclease protection assay定 義當核酸(DNA、RNA)中某段序列能與其他核酸(DNA、RNA)形成互補結合或與某種蛋白特異結合后,核酸酶(如S1核酸酶)就只能降解反應系統中未結合的核酸,留下被結合的核酸段落可以定性或定量檢測出來的方法。此法可
DNA聚合酶的特性、用途和缺點
特性良好的熱穩定性;70℃ 2h,殘留90%活性;93℃ 2h,殘留60%活性;94℃ 2h,殘留40%活性。5'→3'聚合酶活性,對dATP有優先聚合活性;5'→3'外切酶活性;無3'→5'外切酶活性。用途聚合酶鏈反應(polymerase chai
T4DNA聚合酶的用途
(1)利用取代合成反應制備探針(2)標記具有平末端的或具有3’-隱蔽末端的DNA片段利用較強的3 ′→ 5 ′外切酶活性和 5′→3′聚合活性(3)用于DNA序列分析
DNA連接酶的主要用途
DNA連接酶主要用于基因工程,將由限制性核酸內切酶"剪"出的粘性末端重新組合,故也稱"基因針線"。人教版高中生物選修3中提到的E·coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。
RNA酶保護試驗方法
RNA酶保護法是近十年發展起來的一種全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是將標記的特異RNA探針(32P或生物素)與待測的RNA樣品液相雜交,標記的特異RNA探針按堿基互補的原則與目的基因特異性結合,形成雙鏈RNA;未結合的單鏈RNA經RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待測目的基因與特
酶標分析儀的用途
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,例如低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。特別在近幾
DNA-酶-I-足跡分析實驗
試劑、試劑盒32P-標記 DNA 酶 I 足跡探針酚 氯仿乙醇聚乙烯醇競爭 DNA 緩沖液Z'(或緩沖液 Ze)DNA 酶 IMgCl2(10 mmol L) CaCl2(5 mmol L)DNA 酶 I 終止液蛋白酶 K甲酰胺加樣緩沖液實驗步驟材料32P-標記 DNA 酶 I 足跡探針酚/
DNA-酶-I-足跡分析實驗
試劑、試劑盒 32P-標記 DNA 酶 I 足跡探針酚 氯仿乙醇聚乙烯醇競爭 DNA 緩沖液 Z'(或緩沖液 Ze)DNA 酶 IMgCl2(10 mmol L) CaCl2(5 mmol L)DNA 酶 I 終止液蛋白酶 K甲酰胺加樣緩沖液實驗步驟 材料32P-標記 DNA 酶 I 足跡探
DNA-酶-I-足跡分析實驗
DNA 酶 I 足跡分析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 32P-標記 DNA 酶 I 足跡探針 酚 氯仿
核糖核酸酶保護分析
一、體外轉錄在無菌1.5 ml 微型離心管中,結合以下內容:4 ul 5倍轉錄緩沖液2 ul 0.1 M DTT4 ul 2.5 MM NTP(A,C,G)0.8 ul RNA酶抑制劑(25 U/ul)RNA酶抑制劑(Promega)中100 UM冷UTP1 ul/ug ?UL線性DNA模板5 ul
DNA酶I足跡分析法實驗——粗制品的DNA酶足跡分析法
實驗方法原理DNA酶足跡分析常用來尋找粗制品中的蛋白質,因而提供了一種在純化過程中采用的分析方法。通過改變條件,如在反應體系中加入大量的競爭性DNA,或增加反應中鹽的濃度,可抑制非特異性的DNA結合蛋白結合到標記的DNA上。實驗材料含有DNA結合位點的質粒DNA試劑、試劑盒適當的限制性內切核酸酶10
衛星DNA的用途
體細胞克隆衛星DNA可以把某一個體的遺傳物質完整地傳遞下去,因而它對于保存并傳播優良個體和珍稀瀕危動物的基因組具有重大意義。確定異種重構胚的核是否來自于供體的核就顯得異常關鍵。中國科學院昆明動物研究所丁波、張亞平等人建立了一種從早期囊胚中提取DNA以進行核內和核外DNA分析的方法。用這種方法從異種克
衛星DNA的用途
體細胞克隆衛星DNA可以把某一個體的遺傳物質完整地傳遞下去,因而它對于保存并傳播優良個體和珍稀瀕危動物的基因組具有重大意義。確定異種重構胚的核是否來自于供體的核就顯得異常關鍵。中國科學院昆明動物研究所丁波、張亞平等人建立了一種從早期囊胚中提取DNA以進行核內和核外DNA分析的方法。用這種方法從異種克
RNA酶保護法對mRNA的檢測、分析及定量的方法
方法:RNA酶保護目標RNA的類型:mRNA?同時定量的目標RNA的數量:通常為一個,但是如果使用混合探針,最多可同時檢測12種mRNA。用途:主要用于對不同類型細胞或組織中目標mRNA的檢測和定量。缺點:需要特異性的反義雜交探針(通常帶放射性)。RNA酶保護法遠比Northern雜交靈敏,但靈敏度
酶標分析儀的用途介紹
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,例如低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。特別在近幾
DNA酶I足跡分析法
實驗方法原理 實驗材料 含有DNA結合位點的質粒DNA試劑、試劑盒 適當的限制性內切核酸酶100%乙醇及冰冷的70%乙醇TE緩沖液[α-32P] dNTP (3000?6000 Ci mmol)水溶液1O× Klenow片段緩沖液E. coli DNA聚合酶1的Klenow片段5 mmol
可以DNA結合的酶DNA連接酶
DNA連接酶:是能夠使用來自ATP或NAD的化學能將先前切割或斷裂的DNA鏈聚集在一起的酶。連接酶在DNA滯后鏈復制中特別重要,因為它們將岡崎碎片組合成DNA鏈。連接酶在DNA修復和基因重組中也發揮重要作用。
鞣酸酶制備方法和用途
制法 一般由黑曲霉(Aspergillus niger)或灰綠青酶(Penicillium glaucum)在含有2%鞣酸和0.2%酪蛋白水解物的蔡氏培養基(Czapek Dox)中受控培養,取出菌絲,用丙酮沉析后干燥而成。用途 酶制劑。主要用于生產速溶茶時分解其中的鞣質,以提高成本的冷溶性和避免熱
DNA的限制性內切酶酶切分析
限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA,而Ⅲ類酶在識別位點上切割 DNA分子,
大腸桿菌DNA聚合酶I-的三種用途
1.利用缺口轉移法制備高比活度的DNA探針利用其5′--3′的外切酶活性及其聚合酶活性。2.用于DNA連接前的大缺口填充利用5′--3′的聚合酶活性。3.用于DNA的序列分析利用5′--3′的聚合酶活性。
衛星DNA的用途介紹
體細胞克隆衛星DNA可以把某一個體的遺傳物質完整地傳遞下去,因而它對于保存并傳播優良個體和珍稀瀕危動物的基因組具有重大意義。確定異種重構胚的核是否來自于供體的核就顯得異常關鍵。中國科學院昆明動物研究所丁波、張亞平等人建立了一種從早期囊胚中提取DNA以進行核內和核外DNA分析的方法。用這種方法從異種克
糖指紋分析的方法用途
中文名稱糖指紋分析英文名稱carbohydrate fingerprinting定 義利用層析、電泳、質譜、核磁共振等方法對各種糖類相應的特有結構進行的分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)