篩選寡核苷酸針的原則
一.長18~50nt,較長探針雜交時間較長,合成量低;較短探針特異性會差些。二.堿基成分:G+C含量為40%~60%,超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區,否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現(不能多于4個),如-CCCCC-。五.一旦選定某一序更符合上述標準,最好將序列與核酸庫中核酸序列比較,探針序列應與含靶序列的核酸雜交,而與非靶區域的同源性不能超過70%或有連續8個或更多的堿基的同源,否則,該探針不能用。......閱讀全文
篩選寡核苷酸針的原則
一.長18~50nt,較長探針雜交時間較長,合成量低;較短探針特異性會差些。二.堿基成分:G+C含量為40%~60%,超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區,否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現(不能多于4個),如-CCCCC-。五.一旦選定某一序更
篩選寡核苷酸針的原則
一.長18~50nt,較長探針雜交時間較長,合成量低;較短探針特異性會差些。二.堿基成分:G+C含量為40%~60%,超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區,否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現(不能多于4個),如-CCCCC-。五.一旦選定某一序更
篩選寡核苷酸針的原則
篩選寡核苷酸針的原則下面是篩選寡核苷酸針的一些原則。一.長18~50nt,較長探針雜交時間較長,合成量低;較短探針特異性會差些。二.堿基成分:G+C含量為40%~60%,超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區,否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現(不
轉染細胞的篩選原則
1.確定抗生素作用的最佳濃度:不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性,因此在篩選前要做預試驗,確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔,接種量以第二天長成25%單層為宜,置CO2 孵箱中37℃培養過夜。2) 將培養液換成含抗生素的培養基,抗生
使用氣密性進樣針應當遵循的原則
使用氣密性進樣針進樣可以快速選擇進樣體積并重復的調整,當用氣密性進樣針進樣時,應注意的點是:? 1、請勿將進樣針整個浸入溶劑內,會導致粘接部分裂化。? 2、請勿將進樣針置于急劇溫度變化的環境下,會造成破損。? 3、請勿將進樣針長時間置于強酸或極性溶劑內,會造成裂化、破損。? 4、用手指接觸
氣密性進樣針的使用當遵循的原則
使用氣密性進樣針進樣可以快速選擇進樣體積并重復的調整(常規±5%的誤差,熟練者±1%的誤差)當用氣密性進樣針進樣時,可遵循如下建議:? ? 1、請勿將進樣針整個浸入溶劑內,會導致粘接部分裂化。 2、請勿將進樣針置于急劇溫度變化的環境下,會造成破損。 3、請勿將進樣針長時間置于強酸或極性溶劑內,會
高效液相色譜條件篩選過程應該遵循的原則
色譜定量分析是根據組分檢測響應訊號的大小,定量確定試樣中各個組分的相對含量。其依據是:每個組分的量(重量或體積)與色譜檢測器產生的檢測響應值(峰高或峰面積)成正比。具體到特定方法,主要有下列方法: 1.歸一化法 當樣品中所有組分能全部流出色譜柱,并在檢測器上都能產生相應信號(得到色譜峰)時,
swagelok泄放針型閥SS-6DBSW8T選型原則
swagelok泄放針型閥SS-6DBSW8T選型原則 1、煉油裝置的催化裂化裝置的管路系統上,可選用升降桿式針型閥。 2、低溫介質的管路系統和裝置上,宜選用加上閥蓋的低溫針型閥。 3、化工系統的酸堿等腐蝕性介質的裝置和管路系統中,宜選用奧氏體不銹鋼制造的、聚四氟乙烯為閥座密
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒 甲酸銨寡核苷酸雜交溶液寡核苷酸預雜交液TE噬菌體T4多核苷酸激酶限制性內切核酸酶瓊脂糖凝膠誘變寡核苷酸[γ-32P]ATP2XYT 頂層瓊脂和 2xYT 瓊脂平皿 儀器、耗材 鈍端鑷子皮下注射用針頭(18 號)和印度墨水孵箱硝酸纖維素膜或尼龍膜真空烤箱68°C 水
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 甲酸銨 寡核苷酸雜交溶液 寡核苷酸預雜交液 TE 噬菌體T4多核
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
本方案主要描述了篩選噬菌體 M13 重組克隆,而一種選擇方案是篩選含噬菌粒的細菌克隆。最后也介紹了用 PCR 檢測突變體的方法。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗方法原理試劑、試劑盒甲酸銨寡核苷酸雜交溶液寡核苷酸預雜交液TE噬菌體T4多核
寡核苷酸的性質
寡核苷酸極易與它們的互補對鏈接。
進樣針的進樣針樣式
1. N – 用粘合劑固定針頭,最大到250µ2. LTN –用粘合劑固定針頭帶Luer Tip, 500μL 和更大。N 和LTN 型進樣針是將針頭用粘合劑粘在玻璃的注射器管中,加熱溫度能超過50°C, 不能高壓滅菌,不能使用鹵族溶劑如二氯甲烷。如果您想節約實驗室費用并得到很好的重現性,
寡核苷酸的優化設計
關鍵詞:寡核苷酸;優化設計中圖分類號:Q524???? 在核酸分子雜交、DNA序列測定和通過PCR放大DNA片段等實驗中,都需要使用寡核苷酸作為探針或引物,而對這些反應的質量起最重要影響作用的,就是這些寡核苷酸探針或引物。用優化的寡核苷酸進行實驗能夠很快得到好的結果,而用不夠合適的寡核苷酸時,常常得
寡核苷酸的應用特點
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構,用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA(脫氧核糖核酸)可以用于鏈聚合反應,能放大確定幾乎所有DNA的片段,在這個過程中寡核苷酸是作為引物,和DNA 中標記的互補片段結合,作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止
簡述寡核苷酸的應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構,用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 [2] 。 寡核苷酸合成的DNA(脫氧核糖核酸)可以用于鏈聚合反應,能放大確定幾乎所有DNA的片段,在這個過程中寡核苷酸是作為引物,和DNA 中標記的互補片段結合,作成DNA的復制品。 調控寡核苷酸用于
寡核苷酸的主要應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構,用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中?[2]??。寡核苷酸合成的DNA(脫氧核糖核酸)可以用于鏈聚合反應,能放大確定幾乎所有DNA的片段,在這個過程中寡核苷酸是作為引物,和DNA 中標記的互補片段結合,作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA
寡核苷酸的相關操作
In this section, you will find techniques related to oligonucleotides, such as oligo purification by acrylamide gel, annealing two oligos to make doub
寡核苷酸的基本介紹
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段,但在使用這一術語時,對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定,在不少文獻中,把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成,它可作為DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸的應用介紹
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構,用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA(脫氧核糖核酸)可以用于鏈聚合反應,能放大確定幾乎所有DNA的片段,在這個過程中寡核苷酸是作為引物,和DNA 中標記的互補片段結合,作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止
寡核苷酸陣列的概念
微陣列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸陣列(Oligonucleotide array),是人類基因組計劃(Human Genome Project,HGP)的逐步實施和分子生物學的迅猛發展及運用的產物,它是生物學家受到計算機芯片制造和廣為應用的啟迪,融微電子學、生命科學、計算機科學和光
關于寡核苷酸的簡介
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段,但在使用這一術語時,對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定,在不少文獻中,把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成,它可作為DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸探針的簡介
基因探針,即核酸探針,是一段帶有檢測標記,且順序已知的,與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結合,產生雜交信號,能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件:①應是單鏈,若為雙鏈,必須先行變性處理。②應帶有容
寡核苷酸的主要應用
反義寡核苷酸(AON)是一類通過序列特異地與靶基因DNA或mRNA結合而抑制該基因表達,在基因水平調控的分子藥物。而硫代反義寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,簡稱PS2ODNs),是用硫原子將磷酸骨架上的非成鍵氧原子取代后形成的一類新的寡核苷酸類似物(圖
寡核苷酸引物的作用
PCR技術中的引物的本質和作用。引物是一小段單鏈DNA或RNA,引物可以做為DNA復制開始時DNA聚合酶的結合位點,在細胞外的條件下,只有通過引物,DNA才可以開始進行復制。引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與感興趣區域一端的一條DNA模板鏈互補,另一個引物與感興趣區域另一端的另一條DNA模
重組質粒的篩選(抗生素平板篩選和α互補篩選)
重組DNA轉化受體細胞后,須在不同水平上進行篩選,以區別轉化子與非轉化子、重組子與非重組子以及鑒定所需的特異性重組子。在轉化過程中,并非每個受體細胞都被轉化;即使獲得轉化細胞,也并非都含有目的基因,所以需采用有效方法進行篩選。篩選的方法包括根據遺傳表型篩選、限制性內切酶分析篩選、核酸探針篩選、PCR
針型閥的作用_針型閥的特點
針型閥是一種可以精確調整的閥門,用途較廣,比如火焰切割用的割距,調整火焰溫度的旋鈕就是針型閥。儀表針型閥是儀表測量管路系統中重要組成部分,主要有截止閥和球閥,其功用是作開啟或切斷管道通路用。針型閥的閥芯就是一個很尖的圓錐體,好象針一樣插入閥座,由此得名。 針型閥的作用 針型閥是儀
谷物篩選器篩選原理
??? 谷物篩選是指根據糧食顆粒大小的不同,利用一層或數層靜止的或運動的篩面對物料進行分選的方法。因為篩選和重力分選的主要對象是谷物,其介于固體和液體之間而被稱為散粒體。散粒體具有流動性和自動分級性能。谷物篩選器就是一款專門檢驗顆粒糧食、油料試樣的含雜率及大米中、糠粉含量,確定其品質等級的儀器。 ?
震動篩選機的篩選范圍廣
震動篩選機篩選:任何顆粒、粉末、粘液一定范圍內均可篩選。篩分最細至500目或O028rrlm,過濾最小可至5微米。分級篩選,可篩一至五層篩網,能同時進行二至六個等級的分選或過濾。
谷物篩選器的篩選原理是什么?
??? 說到篩選其實我們都不會太陌生,其實它就是根據物料粒度的不同,利用一層或數層靜止的或運動的篩面對物料進行分選的方法。在種子檢驗領域,篩選儀器的代表就是谷物篩選器,它的作用就是用于檢驗顆粒糧食、油料試樣的含雜率及大米中、糠粉含量,由于這些檢測指標與谷物的品質息息相關,因此如果要確定谷物的品質等級