細胞斑點印跡法的原理和應用
應用類似檢測細菌菌落的方法,可以對細胞培養物的特異序列進行快速檢測,將整個細胞點到膜上,經NaOH處理,使DNA暴露、變性和固定,再按常規方法進行雜交與檢測。有人曾用此法從105個培養細胞中檢測到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整細胞斑點印跡法可以用于篩選大量標本,因為它使細胞直接在膜上溶解,所以DNA含量甚至比常用的提取法還高,又不影響與32P標記的探針雜交,但它不適用于非放射性標記探針,因為DNA純度不夠,會產生高本底。......閱讀全文
細胞斑點印跡法的原理和應用
應用類似檢測細菌菌落的方法,可以對細胞培養物的特異序列進行快速檢測,將整個細胞點到膜上,經NaOH處理,使DNA暴露、變性和固定,再按常規方法進行雜交與檢測。有人曾用此法從105個培養細胞中檢測到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整細胞斑點印跡法可以用于篩選大量標本,因為它使細胞直接
斑點印跡法的技術方法介紹
中文名稱斑點印跡法英文名稱dot blotting定 義將點狀樣品吸印到特定的膜上進行檢測的方法。如用硝酸纖維素膜吸印固體培養基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌體后,與特定的標記探針雜交,從而直接從轉化的DNA文庫或噬菌體文庫中篩選所需要的克隆;將不同稀釋度的蛋白質吸附在膜上進行顯色反應,
RNA印跡法的原理和應用
中文名稱RNA印跡法英文名稱Northern blotting定 義RNA從電泳凝膠轉移到固相介質(如尼龍膜等)上,然后與互補的核苷酸序列雜交的操作過程。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
RNA足跡法的原理和應用
中文名稱RNA足跡法英文名稱RNA footprinting定 義分析RNA鏈與其他分子特異結合部位的方法。將標記的RNA與待研究的物質(如某種蛋白質或藥物)進行結合反應后,用RNA酶清除未被結合的部分,再用電泳顯示RNA鏈上結合位置的多寡和長度。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二
RYN-法的方法原理和應用
中文名稱RYN 法英文名稱RYN method定 義一種計算機分析程序,判斷最可能出現的密碼子嘌呤(R)、嘧啶(Y)和兩者任意(N)使用的頻率,推算未知DNA序列可讀框的合理性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
離子譜法的測定原理和應用
本法適用于生活飲用水及其水源水中鈉和鉀、鋰、鈣和鎂的測定。水樣中陽離子Li+?,Na+?,NH4+,K+?,Mg2+和Ca2+?,隨鹽酸淋洗液進入陽離子分離柱,根據離子交換樹脂對各陽離子的不同親合程度進行分離。經分離后的各組分流經抑制系統,將強電解質的淋洗液轉換為弱電解溶液,降低了背景電導。流經電導
DNA酶足跡法的原理和應用
DNA酶足跡法是一種用來測定DNA-蛋白質專一性結合的方法。用于檢測與特定蛋白質結合 的DNA序列的部位,可展示蛋白質因子同特定DNA片段之間的結合區域。其原理為:DNA和蛋白質結合以后便不會被DNAase分解,在測序時便出現空白區(即蛋白質結合區),從而了解與蛋白質結合部位的核苷酸對數目。在用酶移
狹線印跡法的原理和應用
中文名稱狹線印跡法英文名稱slot blotting定 義在雜交膜上點樣的形狀為狹窄的長條的技術。常借助一種專用的點樣裝置,能提高靈敏度。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
粒子轟擊細胞法的定義和應用
在1987年,Vlein首先報道了應用此技術將TMV(煙草花葉病毒)RNA吸附到鎢粒表面,轟擊洋蔥表皮細胞,經檢測發現病毒RNA能進行復制,并以同樣技術將CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰轉移酶基因)基因導入洋蔥表皮細胞。該技術已在煙草、水稻、小麥、黑
斑點印跡——優化抗原和抗體濃度
斑?點?雜?交?方?法——優?化?抗?原?和?抗?體?濃?度對于一個給定的抗原,最佳的抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。最優抗原和抗體濃度可通過免疫印跡實驗中使用不同濃度的抗原和抗體作用確定。另外,更快和更簡單的方法是進行斑點印跡實驗。以下是使用超
克氏定氮法的應用和原理
克氏定氮法 :天然含氮有機化合物(如蛋白質)與濃硫酸共熱時分解出氨,氨與硫酸反應生成硫酸銨。在克氏定氮儀中加入強堿堿化消化液,使硫酸銨分解出氨。用水蒸氣蒸餾法將氨蒸入硼酸溶液中,然后再用標準稀硫酸酸溶液進行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相當于被測樣品中氨的量(mol),根據所測得的氨量即可
滴定分析法的原理和分類應用
滴定分析根據滴定所消耗標準溶液的濃度和體積以及被測物質與標準溶液所進行的化學反應計量關系,求出被測物質的含量,這種分析被稱為滴定分析,也叫容量分析(volumetry)。利用溶液四大平衡:酸堿(電離)平衡、氧化還原平衡、絡合(配位)平衡、沉淀溶解平衡。滴定分析根據其反應類型的不同,可將其分為:1、酸
冷原子吸收法的測定原理和應用
冷原子吸收法:本法適用于生活飲用水及其水源水中的總汞的測定。汞蒸氣對波長253.?7?nm的紫外光具有最大吸收,在一定的汞濃度范圍內,吸收值與汞蒸氣的濃度成正比。水樣經消解后加入氯化亞錫將化合態的的汞轉為元素態汞,用載氣帶入原子吸收儀的光路中,測定吸光度。所用設備、耗材:錐形瓶、容量瓶:、汞蒸氣發生
微分電位溶出法的原理和應用
本法適用于生活飲用水及其水源水中錫的測定。在草酸介質中,以表面活性劑增敏,錫在汞膜電極上于-0.6v左右呈現一靈敏的溶出峰,該峰高與錫含量成正比。在其他條件不變的情況下測量溶出峰,與標準系列比較,進行定量。所用設備、耗材:燒杯、微量注射器、溶出分析儀及其三電極系統
“人體X形平衡法”的原理和應用
? 本文介紹了周爾晉創造的“人體X形平衡法”,它的原理和技術操作要點,及其在祖國醫學經絡穴位理論上的創新。西醫沿著“分析”的思路,把病分得越來越細,研制越來越多的新藥,這是至繁、至昂貴的路子;中醫則更著重認識“人”,即更重“扶正”,開發人的自愈潛能,事半而功倍,至簡而至廉。下面簡要介紹一下“人體
熒光光譜法的原理和應用
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優點,可以廣泛應用于生命科學、醫學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。熒光分光光度計的發展經歷了手控式熒光分光光度計,自動記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計三個階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計
斑點印跡的定義
中文名稱斑點印跡英文名稱dot blot定 義一種定性檢測核酸或蛋白質的技術。即將待測核酸或蛋白點樣于固相載體上,以同位素或非同位素標記探針與之雜交,通過顯影或顯色而進行檢測。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)
近紅外光譜法的原理和應用
中文名稱近紅外光譜法英文名稱near-infrared spectrometry;NIR定 義用可見光和紅外光之間波長范圍的光譜進行分析的方法。近紅外反射光或透射光光譜可用于快速測定樣品中的蛋白質、脂肪以及DNA測序樣品中的染料等物質的含量。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二
顯微熒光光度法的原理和應用
中文名稱顯微熒光光度法英文名稱microfluorophotometry定 義對細胞內原有能發光的物質或對特定的物質選擇性染色使其能發出熒光進行分析的儀器,能觀測熒光在細胞內的定位及強度。是研究某些成分在細胞內分布及含量的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
吸收光譜法的原理和應用介紹
中文名稱吸收光譜法英文名稱absorption spectrometry定 義各種物質由于其結構不同,對電磁波的吸收也不同,每種物質都有其特征性的吸收光譜,據此可對物質進行定量和定性分析的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
舒法斯曼分析的方法原理和應用
中文名稱舒-法斯曼分析英文名稱Chou-Fasman analysis定 義一種從蛋白質的氨基酸序列預示其二級結構的統計學分析法。此法運用可溶性蛋白質已知的三維結構,計算氨基酸殘基在特異的二級結構如α螺旋、β片層及β轉角中出現的頻率。據此可預示已知氨基酸序列的蛋白質或多肽可能的二級結構類型。應用學
印跡法(blotting)基本原理和應用
印跡法(blotting)即轉移電泳,是20世紀70年代發展起來的一種新方法。Southern于1975年建立了檢測特異DNA片段的DNA- RNA雜交法,稱作Southern印跡法。1977年Alwine等把此方法應用到RNA的研究方面,稱作Nouthern印跡法。1979年Towbin等則把
催化示波極譜法原理和應用
本法適用于生活飲用水及其水源水中鋅、總硒、鉛和鎘、鈦的測定。①測定鋅的原理:在酒石酸鉀鈉—乙二胺體系中,鋅與乙二胺形成絡合物,吸附于滴汞電極上,在—1.45V形成靈敏的絡合物吸附催化波,其峰高與鋅含量成正比。②測定總硒的原理:在高氯酸介質中,四價硒與亞硫酸鈉形成硒的絡鹽,用EDTA作掩蔽劑,在氨-氯
[機械法]細胞破碎的方法、原理和優缺點
1、高速組織搗碎機搗碎機轉速可達10,000r/min,具高速轉動的鋒利的刀片,宜用于動物內臟組織的破碎。操作:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。特點:由于旋轉刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用。2、組織勻漿
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
? ? ? ?細胞凋亡中染色體DNA的斷裂是個漸進的分階段的過程,染色體DNA首先在內源性的核酸水解酶的作用下降解為50-300kb的大片段。然后大約30?﹪的染色體DNA在Ca?2?和Mg2?依賴的核酸內切酶作用下,在核小體單位之間被隨機切斷,形成180~200bp核小體DNA多聚體。??????
TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法
原理 在細胞凋亡的過程中,基因組DNA會斷裂產生雙鏈、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段,這些DNA鏈的缺口可以利用沒標記法來識別。試劑盒就是通過催化DNA斷端,來標記缺口。酶底物顯色后,可以光鏡檢查被染色的細胞。
紅外分光光度法的原理和應用
紅外分光光度法是當物質分子吸收- 記波長的光 能,能引起分子振動和轉動能級躍遷,產生的吸收光譜一般在2. 5?25um的中紅外光 區,稱為紅外分子吸收光譜,簡稱紅外光譜。利用紅外光譜對 物質進行定性分析或定量測定的方法稱紅外 分光光度法。由于物質分子發生振動和轉動 能級躍遷所需的能量較低,幾乎所有的
核磁共振波譜法的原理和應用特點
核磁共振波譜法(英語:Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy,簡稱 NMR spectroscopy 或?NMRS?),又稱核磁共振波譜,是將核磁共振現象應用于測定分子結構的一種譜學技術。核磁共振波譜的研究主要集中在氫譜和碳譜兩類原子核的波譜。人們可以從核磁共
控制電位的電解分析法原理和應用介紹
控制電位的電解分析法 ?此法根據下列原理控制電極電位,電解方程為:V-iR=V′=(E+-E-)+ir式中V為電源電壓;i為電流,R為電解池外線路的電阻;V′為加于兩電極的外加電壓;E+ 和E-為正極和負極的電位;r為電解池的內阻。由上式可得: -E-=V-i(R+r)-E+控制電流電解分析法當V與
熒光分光光度法的原理和應用
中文名稱熒光分光光度法英文名稱fluorospectrophotometry定 義利用物質吸收較短波長的光能后發射較長波長特征光譜的性質,對物質定性或定量分析的方法。可以從發射光譜或激發光譜進行分析。該法靈敏度高(通常比紫外分光光度法高2~3個數量級),選擇性好。應用學科生物化學與分子生物學(一級