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  • 甲基化特異性聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱甲基化特異性聚合酶鏈反應英文名稱methylation specific PCR定 義一種簡單快速測定突變熱點二核苷酸“CpG島”甲基化狀態的方法。待測的DNA片段以重亞硫酸鈉修飾,分別用專對甲基化和非甲基化DNA的兩套引物進行PCR擴增,即可得到DNA是否甲基化的信息。可用于腫瘤、基因印記和X染色體失活等研究。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文

    甲基化特異性聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱甲基化特異性聚合酶鏈反應英文名稱methylation specific PCR定  義一種簡單快速測定突變熱點二核苷酸“CpG島”甲基化狀態的方法。待測的DNA片段以重亞硫酸鈉修飾,分別用專對甲基化和非甲基化DNA的兩套引物進行PCR擴增,即可得到DNA是否甲基化的信息。可用于腫瘤、基因印

    競爭聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱競爭聚合酶鏈反應英文名稱competitive PCR;cPCR定  義在反應體系中加入已知含量的內參照競爭模板,該模板與待測模板可以等效擴增,擴增過程中或擴增結束后,可用某些手段區分和定量待測物和競爭物的擴增產物,比較兩者的量即可知待測模板含量的一種定量聚合酶鏈反應技術。應用學科生物化學與

    阻抑聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱阻抑聚合酶鏈反應英文名稱suppression PCR定  義抑制非特異擴增、而選擇性擴增那些只知道部分序列目的DNA的一種聚合酶鏈反應方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接頭,設計引物一個與人工接頭互補,另一個與目的DNA互補,非特異PCR產物由于兩端有顛倒重復序列,退火時會自身形成環

    阻抑聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱阻抑聚合酶鏈反應英文名稱suppression PCR定  義抑制非特異擴增、而選擇性擴增那些只知道部分序列目的DNA的一種聚合酶鏈反應方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接頭,設計引物一個與人工接頭互補,另一個與目的DNA互補,非特異PCR產物由于兩端有顛倒重復序列,退火時會自身形成環

    原位聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱原位聚合酶鏈反應英文名稱in situ PCR定  義在DNA模板分子原來所在的位置處(如細胞、組織中)進行聚合酶鏈反應的技術。能夠直接指示出DNA模板的部位。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    Alu聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱Alu聚合酶鏈反應英文名稱Alu-PCR定  義從復雜來源樣品中特異擴增人基因組DNA的方法。Alu是人基因組中特有的高度重復序列,散布于整個人的基因組中。設計能識別Alu保守區序列的聚合酶鏈反應引物,就能特異地擴增獲得人基因組DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二

    巢式聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱巢式聚合酶鏈反應英文名稱nested PCR定  義由兩次相繼進行的聚合酶鏈反應組成的一種PCR技術,其中第二次PCR是在第一次PCR反應產物序列范圍內進行擴增的,借以提高PCR的成功率和分析的特異性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    差示聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱差示聚合酶鏈反應英文名稱differential display PCR定  義利用組織細胞間基因表達的差異并結合聚合酶鏈反應技術來篩選和克隆新基因的方法。即先主觀設定一對引物(稱武斷引物),提取兩種或多種待比較細胞的mRNA,用3′端武斷引物逆轉錄成cDNA,再PCR擴增,產物用凝膠電泳顯

    平衡聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱平衡聚合酶鏈反應英文名稱balanced PCR定  義為克服在擴增時發生非線性差異而設計的一種聚合酶鏈反應技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    錨定聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱錨定聚合酶鏈反應英文名稱anchored PCR定  義在目的核酸片段一端人工加上確定的序列,以便用與所加序列互補的引物作擴增的聚合酶鏈反應方法。常用于對目的核酸片段序列本身或旁側序列不清楚時的擴增。如通過DNA末端轉移酶在未知序列DNA的3′端加上多(dG)尾,用含多(dC)的錨定引物對此

    多重聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱多重聚合酶鏈反應英文名稱multiplex PCR定  義在同一聚合酶鏈反應的反應管中加入多對引物,擴增同一模板的幾個不同的區域的方法。常用于檢測很長的特定序列(如人類肌養蛋白基因、視網膜母細胞瘤基因等)的缺失突變等變化。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    連接介導聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱連接介導聚合酶鏈反應英文名稱ligationmediated PCR定  義由于樣品中核酸含量低或序列不完全清楚,難以分析或使用,因而在樣品序列末端連接上已知序列,使用與此已知序列互補的引物專一性地擴增目的DNA片段的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    易錯聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱易錯聚合酶鏈反應英文名稱error-prone PCR定  義應用低保真度DNA聚合酶,并選擇適當的反應條件,提高PCR反應中的堿基錯配率,由此得到含有隨機突變的PCR產物,可以克隆入表達載體,構建隨機突變的DNA文庫的一種使DNA隨機突變的技術。能用于體外分子定向進化、基因或DNA序列功能

    連接錨定聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱連接錨定聚合酶鏈反應英文名稱ligationanchored PCR定  義對未知DNA序列的一種擴增技術。在未知序列末端連接已知的序列或添加同聚物尾序列(即錨序列),在與錨序列互補的引物(錨引物)和基因另一側特異性引物的作用下,將未知序列擴增出來。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),

    不對稱聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱不對稱聚合酶鏈反應英文名稱asymmetric PCR定  義引物用量不對稱的聚合酶鏈反應。這兩個引物分別稱為非限制與限制性引物,反應中當低濃度的限制性引物消耗完后,高濃度的非限制性引物就引導產生大量的單鏈DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    半巢式聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱半巢式聚合酶鏈反應英文名稱semi-nested PCR;hemi-nested PCR定  義第二次PCR反應的引物只有一個,另一個是用第一次PCR反應的一個引物的一種PCR技術。此法是在無法獲得理想的第二次引物時采用。對提高靈敏度和特異性仍有助益。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科)

    逆轉錄聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱逆轉錄聚合酶鏈反應英文名稱reverse transcription PCR;RT-PCR定  義先將RNA通過逆轉錄酶的作用合成與之互補的DNA鏈,再以該鏈作模板進行聚合酶鏈反應擴增特定RNA序列的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    聚合酶鏈反應的常規應用介紹

    用于治療感染性疾病,腫瘤及遺傳病。感染性疾病PCR在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上,只要樣本有一個病原體存在,PCR就可以檢測到。一般實驗室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測方法一般需要105-7個病原體才可檢測到。PCR對病原體的檢測解決了免疫學檢測的

    聚合酶鏈反應技術的臨床應用及現狀

    PCR是英文Polymerase chain reaction的縮寫,翻譯過來,稱為聚合酶鏈反應。PCR自1983年由美國加利福尼亞的Cetus公司的Mullis博士發明到現在,雖只短短的二十多年,但其在生命科學研究和臨床分子診斷中,已毫無爭議的成為“支點”工具。如果沒有PCR,人類基因組計

    基因診斷的聚合酶鏈反應方法介紹

      21世紀,基因分析和基因工程技術有了革命性的突破,這主要歸功于聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)的發展和應用。應用PCR技術可以使特定的基因或DNA片段在短短的2-3小時內體外擴增數十萬至百萬倍。擴增的片段可以直接通過電泳觀察,也可用于進一步的分析。這樣,

    定量聚合酶鏈反應的應用特點

    中文名稱定量聚合酶鏈反應英文名稱quantitative PCR;qPCR定  義將某種已知含量的DNA模板作為內標準進行PCR反應,對待測模板進行定量分析的方法。更靈敏的定量PCR是采用實時PCR方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)

    聚合酶鏈反應原理介紹

      PCR是體外酶促合成特異DNA片段的新方法,主要由高溫變性、 低溫退火和適溫延伸三個步驟反復的熱循環構成:即在高溫(95℃)下,待擴增的靶DNA雙鏈受熱變性成為兩條單鏈DNA模板;而后在低溫(37~55℃)情況下,兩條人工合成的寡核苷酸引物與互補的單鏈DNA模板結合,形成部分雙鏈;在Taq酶的最

    臨床化學檢查方法介紹聚合酶鏈反應技術介紹

    聚合酶鏈反應技術介紹:  聚合酶鏈反應技術診斷幽門螺旋桿菌是否存在僅需微量的DNA,而不需要活菌存在(這不同于其他幽門螺旋桿菌檢測方法),它不僅可以檢測胃內幽門螺旋桿菌,還可望檢出胃以外部位,如牙斑、糞便內的幽門螺旋桿菌,還可用于流行病學調查,它的敏感性遠遠超過了其他方法,有利于確定細菌感染的來源及

    聚合酶鏈反應剪接的原理和應用

    中文名稱聚合酶鏈反應剪接英文名稱PCR splicing定  義利用聚合酶鏈反應進行基因剪接以刪除DNA中一段特定序列的方法。系設計兩組引物,先分別擴增擬刪除序列上下游兩側的序列,再用上游序列5′端引物和下游序列3′端引物用PCR反應進行連接。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二

    聚合酶鏈反應的循環參數介紹

    預變性模板DNA完全變性與PCR酶的完全激活對PCR能否成功至關重要,建議加熱時間參考試劑說明書,一般未修飾的Taq酶激活時間為兩分鐘。?[5]?變性步驟循環中一般95℃,30秒足以使各種靶DNA序列完全變性,可能的情況下可縮短該步驟時間。變性時間過長損害酶活性,過短靶序列變性不徹底,易造成擴增失敗

    關于聚合酶鏈反應模板的介紹

      單、雙鏈DNA或RNA都可以作為PCR的樣品。若起始材料是RNA,須先通過逆轉錄得到第一條cDNA。雖然PCR可以僅用極微量的樣品,甚至是來自單一細胞的DNA,但為了保證反應的特異性,還應用ng級的克隆DNA,μg水平的單拷貝染色體DNA或104拷貝的待擴增片段作為起始材料,模板可以是粗品,但不

    逆轉錄聚合酶鏈反應的技術應用

    RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用于:分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。

    隨機聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱隨機聚合酶鏈反應英文名稱random PCR定  義采用許多序列不相同的(部分隨機或全部隨機序列)、短的(約10個核苷酸)引物所進行的聚合酶鏈反應。由于在模板DNA多個不同位置上擴增,所形成的產物長度各異,電泳圖譜獨特,可用于識別核酸的多態性、研究基因組的物理圖譜及分析生物的進化等。應用學科

    反向聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定  義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學

    實時聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱實時聚合酶鏈反應英文名稱real-time PCR定  義一種定量測定樣品中特定DNA序列的聚合酶鏈反應。即使用標記(最常用是熒光標記)的PCR引物,因而能夠通過熒光監測到每一次PCR循環后擴增所得DNA產物的量,從連續監控下獲得的反應動力學曲線,可推導得樣品中被擴增模板DNA的原初含量。應

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