高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。 現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠) 30~40μm的玻璃微球,表面附著一層厚度為1 ~ 2μm的多孔硅膠。表面積小,傳質速度快,但柱容量低。二、流動相類別1、按流動相組成分:單組分和多組分;2、按極性分:極性、弱極性、非極性;3、按使用方式分:固定組成淋洗和梯度淋洗......閱讀全文
流動相脫氣
流動相脫氣對于避免HPLC系統出問題,順利得到一個理想的數據是一個很有效的措施。HPLC系統內是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時要產生很大的壓力,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當氣泡存在時,你將觀察到瞬間的流速降低和系統壓力下降。如果這個氣泡足夠大,液相泵將不能輸送任何溶劑,而且如
流動相的特點和常見的流動相介紹
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處于平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。用作流動相的物質有:氣體、液體、超臨界流體等。常見的流動相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
液質流動相與液相流動相有什么不同
液質的流動相要求不能含有不揮發性的鹽類,如果非要加入的話,質譜要及時清洗。使用液相是因為要進行物質的結構確證。?
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能,在泵中產生氣泡使流速不穩,氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰,降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大,使紫外檢測器基線增高,低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
液相色譜流動相脫氣
流動相的脫氣HPLC所用流動相必須預先脫氣,否則容易在系統內逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩定性,甚至使無法檢測。(噪聲增大,基線不穩,突然跳動)。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化,對分
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能,在泵中產生氣泡使流速不穩,氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰,降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大,使紫外檢測器基線增高,低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
液相流動相的使用
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力b、流動相具有一定惰性,與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。c、流動相的黏度要盡量小d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應e、流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。f、在流動相配制好后,一定要進行脫氣。對于一根特定的色譜柱,要追求最佳柱效,最
液相流動相如何脫氣
流動相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣影響液相色譜的操作性能,在泵中產生氣泡使流速不穩,氣泡大時會在泵頭形成空穴。氣泡進入檢測器后會在色譜圖上出現尖銳的噪音峰,降低響應甚至導致信號消失。流動相中的氧對光電檢測器影響最大,使紫外檢測器基線增高,低波長檢測時信號被抵消。在熒光檢測中,溶解氧還會使熒光淬滅
液相色譜流動相小議
一、液相色譜流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加,相應的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流
流動相-固定相
流動相 ——色譜分離過程中攜帶組分向前移動的物質。固定相 ——色譜分離過程中不移動的具有吸附活性的固體或是涂漬在載體表面的液體。
怎樣選擇流動相
要根據樣品的性質、PH值、樣品的溶解度,由樣品在有機溶劑中溶解度的大小,初步判斷樣品是非極性化合物還是極性化合物,進而推斷用非極性溶劑戊烷、己烷、庚烷等,還是極性溶劑二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等來溶解樣品,并通過實驗判斷.若樣品溶于非極性溶劑,表明樣品為非極性化合物,通常可以選吸附色譜法或
流動相的概念
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處于平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。
流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。(2)流動相與樣品不產生化學反應(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命(可運用
液相色譜流動相不過濾
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉,應
液相色譜流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣,否則容易在系統內逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩定性,甚至使無法檢測。(噪聲增大,基線不穩,突然跳動)。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)反應。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化,對分離或分析結果
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點: (1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 (2)流動相與樣品不產生化學反應 (3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的
液相色譜流動相的特征
流動相要求液相色譜的流動相必須符合下列要求:(1)能溶解樣品,但不能與樣品發生反應。(2)與固定相不互溶,也不發生不可逆反應。(3)粘度要盡可能小,這樣才能有較高的滲透性和柱效。(4)應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時,溶劑要不吸收紫外光。(5)容易精制、純化、毒性小,不易著火,價格盡量低等
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1)由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍規則:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中,注意觀察
液相色譜流動相的濾過
流動相的濾過所有溶劑使用前都必須經0.45μm(或0.22μm)濾過,以除去雜質微粒,色譜純試劑也不例外(除非在標簽上標明“已濾過”)。用濾膜過濾時,特別要注意分清有機相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴禁用
液相色譜流動相的貯存
流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液
液相色譜流動相的貯存
液相色譜流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸
液相色譜流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,最終產生漏液。
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1:由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中,溶劑的強度隨極性的增強而增加;在反相色譜中,溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑,再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑,如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
HPLC流動相如何選擇
對于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時,如果得到的色譜圖出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質,要選用乙腈/水作流動相。
液相流動相知識
流動相是影響液相色譜的關鍵因素。一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、有機溶劑或它們的混合液,但是如何配制。選擇配制的方法不同,分析結果特別是保留時間,是會有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動相主要用水性溶劑、
流動相體積怎么算
要是完全分離,分離度=1.5.由于知道了容量因子,分配比,那么由公式可以計算出要使兩種物質完全分離的柱長要達到2.61M
流動相只有AB嗎
甲醇和水相做流動相的時候的確有點說法,就是甲醇的比例比較大的時候和水的比例比較大的時候,色譜壓力都比較低,只有在二者比例接近1:1的時候壓力是最大的。舉個我以前做方法開發的壓力數據吧:C18柱250的柱長,4.6內徑,5UM的粒度,25度柱溫。
色譜柱的流動相
1、在進行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免細菌產生。2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉淀。不應使用