mirna的熒光定量pcr可以用actin做內參嗎
mirna的熒光定量pcr可以用actin做內參miRNA通過與轉錄本的相互作用，關閉或抑制基因的表達。最近的研究表明它們影響了約三成的基因。miRNA在多個組織中差異表達，這就讓表達圖譜分析成為研究的重點。同時，miRNA的過表達和抑制也是近年來常用的研究方法。我知道和使用過的U6內參基因只有兩個：RNU6-1和RNU6-2.前一個就是常見的u6,后一個有時被稱為u6b.在我的大鼠RNA樣本當中,u6表達量有些太高,u6b的Cq值與我的目標miRNA比較接近,穩定性也很好.但是這些對植物樣本中的內參基因選擇沒有什么指導意義.為了確定u6在植物中的保守性,比較快捷的辦法是找到談論這個話題的文獻綜述.如果沒有人寫過這樣的綜述的話,就只能靠自己去數據庫找到所有序列自己對比了.關于內參基因的選擇,必須實驗確定特定樣本中的表達水平穩定,其他文獻中報導的內參基因不一定適合你的樣本.做新的課題時,選擇內參基因一般是選取3-5個常用的,PCR......閱讀全文
知曉PCR，定量PCR與數字PCR的實驗方法與選擇
從1985年至今的30多年時間里，PCR分析經歷了三代技術的發展。一代傳統PCR技術，采用瓊脂糖凝膠電泳的方法對PCR產物進行定性分析。第二代熒光定量PCR技術，通過在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號的積累實時監控PCR進程，最后用Cq值對基因進行定量分析。第三代數字PCR技術，通過將PC
PCR新手指南：快速PCR技術與快速PCR儀的區別
在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素：1、模塊升溫和降溫時間2、模塊與PCR管內溫度平衡時間3、延伸時間4、循環次數下面就以上幾點做一點分析，以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。1、模塊升溫和降溫度時間PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度，但標的大多是最大變溫速度
PCR新手指南：快速PCR技術與快速PCR儀的區別
在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素：1、模塊升溫和降溫時間2、模塊與PCR管內溫度平衡時間3、延伸時間4、循環次數下面就以上幾點做一點分析，以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。1、模塊升溫和降溫度時間PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度，但標的大多是zui大變溫
免疫PCR(Immuno-PCR)概念、組成和免疫PCR產物的檢測
（一） 免疫PCR技術的概念免疫PCR是一種抗原檢測系統，將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上，再用PCR方法將這段DNA擴增，然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR集PCR的高靈敏度與抗體和抗原反應的特異性于一體。其突出的特點是指數級的擴增效率帶來了極高的敏感度，能檢出濃度低至2ｎｇ
PCR疑難解答-終點PCR及相關PCR反應的分類
? ? ? ?1.PCR的概念?? ? ? ?PCR，即聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR），主要由高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個步驟反復的熱循環構成：即模板DNA先經高溫變性為單鏈，在DNA聚合酶和適宜的溫度下，兩條引物分別與兩條模板DNA鏈上的一段互
普通PCR、實時熒光定量PCR和數字PCR對比分析（二）
模板 DNA 量越多，熒光達到域值的循環數越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板濃度與 Ct 呈線性關系，通過已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線，根據樣品 Ct 值，就可以計算出樣品中所含的模板量。目前常用熒光標記方法 方法 優點
Colony PCR
Colony?PCR David Amberg This procedure will work for both yeast and E. coli: Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat
閑聊PCR
雖然長了些, 但耐心看完,應該對你的問題有所幫助 各位戰友 我們來聊聊PCR?：） PCR可以說是目前分子生物學實驗中應用最為廣泛的一種技術。從最初的在幾個水浴鍋里把試管放來放去，到現在各種先進的PCR儀， 到REAL TIME PCR。 設備是越來越先進，方法是越來越多，但基本的原理還是那套
Inverse PCR
Genomic DNA Prep from 5 ml culture, resuspend in 50 μl TE Digestions Use either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu trans
Inverse PCR
Genomic DNA Prep from 5 ml culture, resuspend in 50 μl TE Digestions Use either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu trans
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems) Basic information about in situ PCR and its applications. The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in
實時 PCR
一旦 RNA 收集純化完成，可以采用對不同的細胞質或核糖體 RNA 專一的商業化的實時 PCR 試劑盒，以組成型的 rRNA 為標準對所有資料進行標定。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒cDNA 樣品rRNA 引物和探針目的基因的引物和探針Tag Man Un
PCR Additives
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit
PCR佐劑
?Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) o
標準PCR
What's?PCR??(Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
Long PCR
Two long?PCR?steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
PCR佐劑
Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) of
實時 PCR
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 cDNA 樣品 rRNA 引物和探針 目的基因的引物和探針 Tag Man Universal PCR Master Mix ? 超純水
標準PCR
·?????????What's PCR??(Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
pcr原理
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈
PCR引物
PCR?Primer Design and Reaction Optimization?(Molecular Biology Techniques Manual)??PCR Primer Design?(Newman Lab)??PCR Primer Design?(Eppendorf)Detail
PCR技術
1 導論?多聚酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction, PCR）是美國Perkin-Elmer/Cetus公司人類遺傳研究室Mullis K. B.等人于1985年發明的一種快速體外DNA片段擴增技術，是八十年代分子生物學資源領域的一項革命性突破，被譽為分子生物學資源發展史上
Basic PCR
實驗概要The ?following basic protocol serves as a general guideline and a starting ?point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati
PCR技術
? ?PCR技術www.runwelltac.comPCR技術的基本原理與操作流程聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，PCR）是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，為zui常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿
Colony PCR
Colony PCR is useful in determining whether or not a specific colony on a plate has a sequence you desire. Primers for the specific sequence should be
Degenerate PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen
實時 PCR
試劑、試劑盒 cDNA 樣品rRNA 引物和探針目的基因的引物和探針Tag Man Universal PCR Master Mix 超純水儀器、耗材 序列監測儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑來自方案 5 的 cDNA 樣品20X18SrRNA 引物和探針（AppliedBiosyste
PCR技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依賴于DNA聚合酶的酶促反應。PCR技術的特異性取決于引物和模板結合的特異性。反應分為變性、退火、延伸三步，經過一定的循環，介于兩個引物之間的特異DNA片段得到大量擴增。?
PCR儀
簡單的說，PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術，可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR儀，實時熒光定
Quantitative PCR
實驗概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var