親和偶聯氨基
固相技術是一種將配基(酶、抗體、親和蛋白等)偶聯到支持結構(如瓊脂糖)上的技術,該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域,包括純化程序,去除污染組分和生物催化。 ABT 提供種類繁多的預活化凝膠,旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵,最大限度地減少親和配體的脫基并減少非特異性結合。我們提供兩種不同化學成分的預活化微球:l Glyoxal beadsl Aminoethyl beads ABT 同時也提供不同濃度(4%-6%)的瓊脂糖凝膠,不同濃度 / 密度的 Glyoxal 和 Aminoethyl 活化基團的凝膠。 高產量的高度活化凝膠 - 高結合載量 - 高固相酶穩定性 - 具有多個結合位點的可能性 降低低活化或極低活化凝膠的失活 - 優異的結合載量-......閱讀全文
親和偶聯--氨基
?固相技術是一種將配基(酶、抗體、親和蛋白等)偶聯到支持結構(如瓊脂糖)上的技術,該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域,包括純化程序,去除污染組分和生物催化。?ABT 提供種類繁多的預活化凝膠,旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵,
親和偶聯--羧基
固相技術是一種將配基(酶、抗體、親和蛋白等)偶聯到支持結構(如瓊脂糖)上的技術,該技術提供了高穩定性和易于重復使用的固定化分子。親和配體的偶聯及其在層析中的應用已經擴展到了許多領域,包括純化程序,去除污染組分和生物催化。ABT 提供種類繁多的預活化凝膠,旨在通過穩定的偶聯配體和不帶電荷的共價鍵,最大
親和偶聯--組氨酸標簽(Histag)
親和層析法(IMAC)是目前最廣泛使用的純化技術,該技術是基于蛋白表面殘基(組氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)與過渡金屬陽離子的相互作用而形成螯合,該過渡金屬 / 蛋白絡合物再與螯功能基團鏈接到瓊脂糖微球上,通常通過降低 pH值或添加咪唑的方式來洗脫目標蛋白。?低耐壓ABT 提供兩種螯合微球,使
免疫印跡與免疫檢測實驗——親和素生物素偶聯
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TTBS緩沖液TBS緩沖液過氧化物酶堿性磷酸酶儀器、耗材搖床硝酸纖維素膜尼龍膜實驗步驟1. ?在旋轉搖床或擺動平臺中持續搖動使膜與合適的封閉液平衡。對于硝酸纖維素膜或PVDF膜,需在室溫封閉30~60 min。尼龍膜則需在37℃封閉2 h。2. ?用TTBS溶液(用于硝酸纖
親和層析(Affinity-Chromatography)(2)
⑵基質的活化基質的活化是指通過對基質進行一定的化學處理,使基質表面上的一些化學基團轉變為易于和特定配體結合的活性基團。配體和基質的偶聯,通常首先要進行基質的活化。①多糖基質的活化多糖基質尤其是瓊脂糖是一種常用的基質。瓊脂糖通常含有大量的羥基,通過一定的處理可以引入各種適宜的活性基團。瓊脂糖的活化方法
生化實驗講義(理論部分)——層析技術(九)
3.4.3 親和吸附劑選擇并制備合適的親和吸附劑是親和層析的關鍵步驟之一。它包括基質和配體的選擇、基質的活化、配體與基質的偶聯等等。這里主要介紹一些基本的原理,關于活化、偶聯等過程的具體實驗操作可以參閱本書后面的實驗部分或相應的參考書。基質⑴ 基質的性質基質構成固定相的骨架,親和層析的基質應該具有以
何謂生物偶聯?
生物偶聯領域看似云淡風輕,但在生命科學和生物技術上具有巨大的影響。生物偶聯的使用在無窮無盡的應用中也已經產生數百萬美元的全球經濟,包括治愈疾病的功能和發現生活的秘密。甚至現在很多最大的制藥公司和技術公司根據生物偶聯來設計未來產品流水線并且維持著生死攸關的競爭。藥物發展中經常期待的“魔彈”和“靶向藥”
親和層析法(affinity-chromatography)純化胰蛋白酶1
一、實驗目的 1.熟悉親和層析純化蛋白質的的原理。 2.初步掌握親和層析法純化胰蛋白酶的方法步驟。 二、實驗原理 親和層析已經廣泛應用于生物分子的分離和純化,如結合蛋白、酶、抑制劑、抗原、抗體、激素、激素受體、糖蛋白、核酸及多糖類等,也可用于分離細胞
親和吸附劑(Affinity-Absorbent,AA)2
2.環氧乙烷基活化這類方法活化后的基質都含有環氧乙烷基。如在含有NaBH4的堿性條件下,1,4-丁二醇-雙縮水甘油醚的一個環氧乙烷基可以與羥基反應,而將另一個環氧乙烷基結合在基質上。另外也可以用環氧氯丙烷活化,將環氧乙烷基結合在基質上。這種活化方法的優點是活化后不引入電荷基團,而且基質與配體形成的N
親和吸附劑(Affinity-Absorbent,AA)3
2.配體與待分離的物質之間的親和力要有較強的特異性,也就是說配體與待分離物質有適當的親和力,而與樣品中其它組分沒有明顯的親和力,對其它組分沒有非特異性吸附作用。這是保證親和層析具有高分辨率的重要因素。3.配體要能夠與基質穩定的共價結合,在實驗過程中不易脫落,并且配體與基質偶聯后,對其結構沒有明顯改變
有關固定化酶技術酶的定向介紹
1、共價固定法 選擇性地利用酶分子表面遠離活性位點的特定稀有基團(如巰基) 進行反應,使該基團與載體上另一基團共價交聯來固定酶蛋白,使其活性中心朝向溶液方向,以達到控制其空間取向的目的。 2、氨基酸置換法 利用基因定點突變技術在蛋白質分子表面合適位置置換一個氨基酸分子,通過該氨基酸殘基特殊
有關固定化酶技術酶的定向介紹
1、共價固定法 選擇性地利用酶分子表面遠離活性位點的特定稀有基團(如巰基) 進行反應,使該基團與載體上另一基團共價交聯來固定酶蛋白,使其活性中心朝向溶液方向,以達到控制其空間取向的目的。 2、氨基酸置換法 利用基因定點突變技術在蛋白質分子表面合適位置置換一個氨基酸分子,通過該氨基酸殘基特殊
偶聯因子的特點
線粒體中氧化磷酸化反應的能量偶聯所必需的蛋白質因子。用機械的螯合劑、尿素等處理可從線粒體溶出,如把它加入到脫偶聯的線粒體亞單位中去,則P∶O比恢復。
代謝偶聯的概念
代謝偶聯指的是伴隨代謝反應所發生的偶聯現象,其在協調細胞群體的生物學功能方面,可能起更重要作用。
代謝偶聯的概念
代謝偶聯指的是伴隨代謝反應所發生的偶聯現象,其在協調細胞群體的生物學功能方面,可能起更重要作用。
偶聯氧化的概念
中文名稱偶聯氧化英文名稱coupled oxidation定 義一系列遞氫體(或遞電子體)依次偶聯作用,逐步釋放能量,使氧化順利進行的反應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生理(二級學科)
偶聯氧化的概念
中文名稱偶聯氧化英文名稱coupled oxidation定 義一系列遞氫體(或遞電子體)依次偶聯作用,逐步釋放能量,使氧化順利進行的反應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生理(二級學科)
飽和碳偶聯反應
在國家自然科學基金項目(批準號:21732006、51821006、51961135104、21927814)資助下,中國科學技術大學傅堯、陸熹研究團隊在飽和碳偶聯領域取得進展。相關研究成果以“鈷催化對映選擇性C(sp3)-C(sp3)偶聯(Cobalt-catalysed enantiosel
解偶聯的概念
線粒體中氧化磷酸化反應的能量偶聯所必需的蛋白質因子。用機械的螯合劑、尿素等處理可從線粒體溶出,如把它加入到脫偶聯的線粒體亞單位中去,則P∶O比恢復。
偶聯氧化的定義
中文名稱偶聯氧化英文名稱coupled oxidation定 義一系列遞氫體(或遞電子體)依次偶聯作用,逐步釋放能量,使氧化順利進行的反應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生理(二級學科)
代謝偶聯的概念
代謝偶聯指的是伴隨代謝反應所發生的偶聯現象,其在協調細胞群體的生物學功能方面,可能起更重要作用。
什么是偶聯氧化?
中文名稱偶聯氧化英文名稱coupled oxidation定 義一系列遞氫體(或遞電子體)依次偶聯作用,逐步釋放能量,使氧化順利進行的反應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生理(二級學科)
什么是解偶聯?
解偶聯(uncoupling)指呼吸鏈與氧化磷酸化的偶聯遭到破壞的現象。氧化磷酸化是氧化(電子傳遞)和磷酸化(形成ATP)的偶聯反應。
親和層析--生物素/親和素純化
低耐壓:生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品,生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密,可以應用于不可逆結合(如:從某個樣本中去除親和素組分)高耐壓:鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi
蛋白純化常見問題總結(一)
蛋白純化過程中常遇見一些問題,這里整理了以下幾個蛋白純化實驗中遇見的問題及其解決方案。1)我現在手頭有個融合蛋白,純化的時候用助溶劑溶解后做了GST親和層析,之后用蛋白酶切割后卻發現目的蛋白沒有活性。請問有哪些可能會出現這種原因?怎么解決?測過基因序列,沒有問題。細胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助
分子互作方法之BIAcore!
BIAcore是一種基于光學表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance,簡稱SPR)原理的用于分子互作分析的常用方法。因為其準確性高、重復性好、應用廣泛,目前SPR原理用于藥物分析的方法已經被錄入中國、美國、日本的藥典,基于BIAcore方法的文獻也已經超過了15000篇。那
親和柱的制備實驗
實驗方法原理 溴化氰活化的瓊脂糖凝膠用于配體固相化是實驗室最常用的固相化技術之一。其原理是溴化氰活化的介質與配體主要的氮基反應形成異脲鍵。但是這樣偶聯的親和柱多次重復使用時,將會有少量配體脫落,所以反復使用的親和柱應考慮選擇其他活化的介質。異脲鍵的形成伴有荷電基團的增加,將會影響離子交換作用。為了克
代謝偶聯的功能作用
代謝偶聯指的是伴隨代謝反應所發生的偶聯現象,其在協調細胞群體的生物學功能方面,可能起更重要作用。
代謝偶聯的功能作用
代謝偶聯指的是伴隨代謝反應所發生的偶聯現象,其在協調細胞群體的生物學功能方面,可能起更重要作用。
偶聯是什么意思
是化學里的偶聯吧!偶聯反應是由兩個有機化學單位進行某種化學反應而得到一個有機分子的過程.這里的化學反應包括格氏試劑與親電體的反應鋰試劑與親電體的反應,芳環上的親電和親核反應還有鈉存在下的Wutz反應,由于偶聯反應 含義太寬,一般前面應該加定語.而且這是一個比較非專業化的名詞.進行偶聯反應時,介質的酸