電泳技術及其臨床應用新進展

   電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗，此后各種電泳技術及儀器相繼問世，廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和／或鑒定。近年來，先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床實驗室所采用檢驗|地帶網搜集整理，已成為檢驗醫學工作中最有用的工具之一。
 
一、臨床常用的電泳分析方法?
 
1、醋酸纖維素薄膜電泳?
 
    醋酸纖維素是指纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯，由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質吸附小，能消除電泳中出現的“拖尾”現象。具有分離速度快、樣本用量小的特點，適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。?
2、凝膠電泳?

    以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的區帶電泳稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。?

3、等電聚焦電泳?

    等電聚焦(1EF)是利用有PH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術，特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分，在區帶電泳中分辨率最好。常用的PH梯度支持介質有瓊脂糖凝、聚丙烯酰胺凝膠、葡聚糖凝膠等。?

4、毛細管電泳?

    利用電泳和電滲的電動力學原理，在一種空芯的微小內徑的毛細管中進行混合物的高效分離技術。
 
二、電泳技術的臨床應用?
1、血清蛋白電泳?

    血清蛋白電泳時，由于各種蛋白質等電點(p1)不同，在同一pH下所帶電荷量多少有差異，因而在同一電場中泳動速度不同，在載體上可將蛋白質從正極到負極分離為Alb、α1、 α2、β、?球蛋白5個區帶，有時還可見到前白蛋白區帶，β區帶又可分為βl、β2區帶。?

    血清蛋白質電泳圖譜至今仍是了解患者血清蛋白質全貌的有價值的方法，可用為初篩試驗。如急性炎癥或急性時相反應時常以α1、α2帶加深為特征；妊娠型α1區帶增高，β伴有區帶增高；腎病綜合癥、慢性腎小球腎炎時呈現白蛋白下降，α2、β球蛋白升高；缺鐵性貧血時可由于轉鐵蛋白的升高而呈現β區帶增高，而慢性肝病或肝硬變呈現白蛋白顯著降低，?球蛋白升高2-3倍，示免疫球蛋白(1g)多克隆高，甚至可見β—Y橋，還可在檢驗|地帶網搜集整理區呈現細而密的寡克隆區帶；單克隆Ig異常癥(M蛋白血癥)則在電泳區帶α—Y區呈現致密而深染，高度集中的蛋白克隆增生區帶(M蛋白區帶)。對于一些特殊圖譜，可結合臨床資料，擬定進一步分析方案。如進行尿蛋白或腦脊液電泳，用免疫化學方法測定血清(或尿、腦脊液)特種蛋白含量，或結合免疫固定電泳進行綜合分析。?

2、尿蛋白電泳?

    尿蛋白電泳常用醋酸纖維素薄膜電泳、十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及尿蛋白免疫固定電泳方法。若以醋纖維膜為載體，在薄膜上可將蛋白質分離為Alb、α1、α2、β、?球蛋白。?

    尿蛋白電泳的主要目的是在無損傷的情況下，協助臨床判斷腎臟損傷的部位，確定尿蛋白的來源，了解腎臟病變的嚴重程度(選擇性蛋白尿與非選擇性蛋白尿)，從而有助于疾病的診斷和預后判斷。尿蛋白電泳后呈現出中、高分子蛋白區帶主要反映腎小球病變，呈現出低分子蛋白區帶可見于腎小管病變或溢出性蛋白尿(如本周氏蛋白)；混合性蛋白尿可見到各種分子量區帶，示腎小球和腎小管均受累及。對臨床癥狀不典型的患者及微量蛋白尿患者的診斷及各種腎臟疾病治療過程中病情的動態分析，也具有很大價值。?