科學家經常通過蛋白質的表達及修飾情況來揭示對應樣品的生理或病理狀態。WesternBlot是進行蛋白檢測的最經典技術。核酸檢測對樣品量的要求極低,因為DNA或RNA具備體外擴增的性質。而蛋白質檢測只能受限于能夠獲得的原始樣品量。傳統WesternBlot每個泳道所需的蛋白總量達10-100μg,對于常規樣品影響尚在其次,但對于諸如原代細胞和干細胞、激光顯微切割及針孔穿刺等珍稀臨床樣品、小鼠腦脊液等等,將大大增加樣品的獲取成本及獲取時間,嚴重限制了這類樣品的蛋白質檢測及生物學信息闡釋。
位于美國加州的高科技公司Proteinsimple推出了令人耳目一新的SimpleWestern技術,基于Wes儀器平臺,該技術不僅將整個Westernblot的實驗流程全部自動化,即無需手動制膠跑膠、無需轉膜、全自動完成蛋白上樣、分離、免疫印跡、洗滌,以及檢測和數據的定量等。并且,基于毛細管電泳技術,該平臺每個樣品所需的蛋白量大大減少,總蛋白僅需1μg,即可完成樣品中單個甚至多個靶標的同時檢測,從而使得來源受限的樣品蛋白水平的檢測變得可能。
“We collect samples from laser microdissection and were using our entire sample on just one regular Western blot.With Wes, we can do multipleassays with on esample collection."
-Mary Howell, Laboratory Coordinator,Department of Internal Medicine, East Tennessee State University
田納西州立大學的Mary博士從事鍛煉活動與糖尿病關系方面的研究,經常要在激光顯微切割儀前花費一整天的時間用于獲取樣本,最后往往只能獲得20μL,傳統Western檢測僅能上樣一個泳道。
借助Wes平臺的毛細管電泳微縮體系,現在每個數據點只需1-2μL的樣品,20μL的樣品總量現在能產生10個數據點,大大提升了LCM樣品的利用率,減少了采樣時間。
Wes檢測肌球蛋白重鏈7(MHC7)分子,上樣量依次為1μL、2μL、3μL
Mary博士的工作正在穩步推進之中。現在,她再也不需花費大量時間枯坐在激光顯微切割儀前。之前每份LCM樣品只能產生1個數據點,而現在能產生10個!這意味著大量成本及時間的節省。而節省下來的時間,Mary博士真正想做的是-旅行!
近日,大連化物所微型分析儀器研究組(105組)關亞風研究員和耿旭輝副研究員團隊與大連理工大學物理學院王曉娜教授團隊合作,在低成本高靈敏度激光誘導熒光檢測器(LIF)研制及其在單細胞低豐度蛋白定量分析方......
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即WesternBlot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位......
近日,MarketsandMarkets咨詢公司發布了全球westernblotting市場的分析報告。據MarketsandMarkets預測,全球westernblotting的市場規模將從201......
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一、原理一個基因表達的最終產物是產生相應的蛋白,因此檢測蛋白是測定基因表達的主要標志。 原理:WesternBlotting是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙稀酰胺......
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