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  • 發布時間:2018-07-07 11:04 原文鏈接: 冷凍電鏡制樣

    常規的冷凍方式冷卻速度緩慢,冷卻過程中,蛋白質水溶液會因結晶而變形扭曲,造成生物分子的結構的破壞。快速冷凍制樣是將樣品快速放入液氮冷卻的液態乙烷中,由于冷卻速度快,使得水分子還來不及結晶就被固定住,整個冷凍過程在數毫秒之內就完成了(冷凍速率>104℃/s),冷凍好的水以玻璃態存在,不存在晶體結構,能使蛋白質結構保持其天然結構狀態。

    冷凍制樣是目前結構生物學領域最好的樣品制樣方法,相對于傳統的制樣,其特點主要有:

    • 高速冷凍過的玻璃態水中,樣品水合狀態得以保存,結構不受破壞;

    • 可獲得高分辨率的結構數據,分別率可達0.2nm;

    • 可降低樣品的輻射損傷;

    • 樣品準備較復雜;

    • 襯度較差。



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