淺談化學發光免疫分析方法與應用進展

　　近年來，化學發光免疫分析法備受人們的青睞，主要是因為此方法具有高靈敏度、強特異性、廣適用面和設備簡單等特點。在臨床醫學、食品藥物等領域，此方法被廣泛應用于抗原與抗體間的識別。生物分子的體積大、擴散率比較小，所加之對識別微電具有空間阻礙作用，所以受到傳質速率和反應動力學控制的免疫反應速率一般都會比較低。傳統的免疫分析方法需要的溫育時間比較長，大大限制了樣品測試的通量和適用范圍。所以為了縮短免疫分析的時間，需要不斷的進行技術創新，從而擴展化學發光免疫分析的應用范圍。 
　　一、化學發光免疫分析法 
　　化學發光分析是一種利用化學反應產生的輻射光的強度來進行物質含量確定的分析方法。這種分析是化學發光系統和免疫反應的完美結合，主要是利用化學發光的相關物質對抗體或者是抗原進行標記，等到與需要進行測定的抗原或者抗體反應之后，再利用分離游離態化學發光物質的方法，使得加入到化學發光系統中的其他相關物產生化學發光，然后進行抗原或者是抗體的定量或者是定性的檢測。在化學發光免疫分析中，主要使用4類標記物，分別是異魯米諾及其衍生 
　　物、過氧化物酶和堿性磷酸酶、魯米諾和吖啶酯衍生物。在目前的化學發光免疫分析法中，以酶為標記物的化學發光是應用的主流。常用的標記酶是堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶。利用酶來做標記物主要是因為酶具有相應的化學發光底物，在臨床上的應用比較廣泛。 
　　在化學發光免疫分析方法中不可避免的會利用到標記技術，而標記技術是現代免疫分析的關鍵性技術之一。新的標記免疫分析技術，在目前的社會諸多領域中得到了廣泛的應用，并且展示了非常不錯的發展前景。在實際標記技術的應用中，納米技術廣泛的用于生物標記，主要是因為納米粒子具有非常良好的生物相容性，而且具有信號放大的效果。在實際應用中，量子點就是一種半導體納米顆粒，所以在發光免疫分析法中被大量的使用。 
　　二、化學發光免疫分析法的應用 
　　（一） 快速化學發光免疫分析方法 
　　傳統的免疫分析方法需要的時間比較長，而且由于時間的延長往往會導致免疫試劑吸附在管道的內壁上，這樣就會造成不同測定間的信號交叉，對于測定結果的準確度具有嚴重的影響。為了實現免疫分析的高通量，克服傳統方法的不足，可以通過利用外場的驅動或者是利用溶液來進行有效混合策略，以此來達到加快抗原或者是抗體等大分子的傳質速率。在實際中，還可以通過提高整個反應體系的溫度來進行免疫反應動力學的加速，這樣也可以實現快速的免疫檢測。 
　　在提高傳質速率的方法選擇上，主要有四種備選方案，分別是改變電滲流、超聲波驅動、電磁攪拌和電場驅動。通過這種提高傳質速率的方法，可以有效的實現快速檢測，一般在3分鐘之內就可以完成檢測工作。除去提高傳質速率的方法，外力驅動的加速也會提高檢測，在實際應用中，利用外力驅動的加速效果，可以在16分鐘內完成整個測定分析工作。 
　　（二） 多組分化學發光免疫分析方法 
　　多組分化學發光免疫分析方法也是化學發光免疫分析方法的一種重要應用。在單個的分析流程中，同時實現多組分的檢測，具有的優勢非常顯著。利用這種方法，不僅所需要的時間短、樣品的消耗量比較少，而且分析的通量高，分析成本整體較低。這些優勢都是免疫分析長期追求的目標，也是未來免疫分析的發展研究熱點。多組分免疫分析模式主要有兩種實踐模式，分別是：多組分同時檢測模式和順序檢測模式。在實際應用當中，同時檢測模式往往會與空間分辨技術，還有陣列檢測器同時進行結合檢測，而順序檢測一般是在同一個時間期限內對多個組分進行分別檢測。近年來由于安培免疫傳感器陣列在多組分免疫分析中的廣泛應用，多組分化學發光免疫分析的方法獲得了非常快速的發展。多組分化學發光免疫分析法的廣泛使用得益于其他技術的長足進步，也就是說多組分化學發光免洗分析的發展要建立在與其相關技術的發展基礎上，所以這種技術在未來的發展潛力巨大。 
　　（三） 高靈敏化學發光免疫分析方法 
　　從過去的實踐經驗中得知，現有的檢測手段其靈敏度和特異性都不是很理想，所以選擇高靈敏度的檢測方法越來越重要。納米技術快速發展和在檢測中的應用為實現化學發光免疫分析的高靈敏度提供了可能。就目前的情況而言，納米粒子在生物分析中得到了廣泛的使用，其信號放大的功效對于高靈敏免疫分析方法的構建非常有幫助。 
　　通過研究發現不同粒徑的納米粒子可以增強魯米諾過氧化氫體系的化學發光 ，在試驗中，38 nm 粒徑的納米粒子的增強效果最為顯著。通過實驗，合成的特殊形狀的不規則金納米粒子，對魯米諾過氧化氫化學發光體系的催化活性是普通納米粒子的100倍。在試驗中，將抗體固定在不規則金納米粒子表面后發現，會形成夾心免疫復合物，這中復合物對于信號的放大，其效果更加的顯著。也正是通過試驗得知，將納米粒子廣泛應用于化學發光免疫分析中時，由于其信號放大的效果顯著，測定分析的敏感性和準確度顯著加強。 
　　三、發展與展望 
　　化學發光免疫分析方法在目前的生命科學領域、食品、藥物的測定等方面被廣泛的使用，而且隨著我國對食品安全的重視程度不斷加深，測定范圍和深度肯定會逐漸增加。化學發光免疫分析方法其本身就具有成本低、操作簡單、靈敏度較高、測定速度快等突出的優勢，在未來的發展中這些優勢會被充分的利用，化學發光免疫分析法的適用范圍也會更加的廣泛。再者，化學發光免疫分析法與技術的進步有著密切的關系，隨著未來技術的不斷進步，與化學發光免疫分析法相關的技術會得到不斷地改進和發展，這對于化學發光免疫分析法來說，是一個強有力的助推力。 
　　結束語 
　　化學發光免疫分析方法因為其優勢突出所以在目前的各個領域具有非常廣泛的應用。在實際應用中，一定要不斷的加深對此方法的認識深度，不斷地提高利用此方法的技術，使這種技術更好的為現代的測定工作來服務。