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  • 發布時間:2019-12-16 21:03 原文鏈接: 毛細管電泳儀分離條件的選擇

    毛細管電泳儀是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分離科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分離科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分離成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分離有了新的轉機。

    一、分離條件的選擇內容:

    1、毛細管類型:是涂層還是非涂層。

    2、毛細管長度:是長毛細管還是短毛細管。

    3、緩沖液體系:種類和pH值。

    4、添加劑類型:甲醇、環糊精和乙腈。

    5、檢測器類型:紫外檢測器、二極管陣列檢測器和激光誘導熒光檢測器。

    二、分離條件的選擇流程:

    1、盡可能多地了解被分離樣品的類型、來源、組成和性質。

    2、根據樣品的可能性質和來源選擇分離模式,若無樣品信息可先選用CZE電泳。

    3、根據樣品性質確定檢測方法,一般先選用直接紫外吸收。

    4、確定樣品處理方式,包括衍生方案、離心和過濾等。

    5、根據樣品解離常數計算zui優pH或利用內徑為75μm毛細管和磷酸緩沖體系確定pH范圍。

    6、根據所需pH構建緩沖液體系,包括進一步優化pH和緩沖試劑濃度等。

    7、優化其它操作參數,如毛細管尺寸、分離電壓和溫度等。

    8、確定是否需要使用添加劑和非水溶劑。

    9、確定是否需要換用其它分離模式。


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