毛細管色譜柱老化步驟

一、為什么要老化氣相色譜柱？

色譜柱的老化是氣相應用的一項常見工作，老化的目的在于去除固定相表面不穩定的固定相流失碎片或污染物，讓色譜柱為即將進行的分析做好準備。通常，新柱初次使用、色譜柱放置一段時間后再次使用、或色譜柱受到一定污染或損傷后都需要進行適當的老化。

二、毛細管色譜柱老化步驟

注意確保載氣流過毛細管柱15~30min，緩慢程序升溫(5℃/min)到老化溫度，zui初老化溫度≥4hours，如果柱子受到污染。可在推薦的zui高色譜柱溫度低20℃的條件下，老化柱子。

1、一般推薦的老化溫度為：

Tcond = Tmax/2 + Tapp/2（Tcond = 老化溫度，Tmax = 色譜柱推薦采用的zui高溫度，Tapp = 應用中使用的zui高溫度）。

在老化柱子時，一定不要將毛細管接在檢測器上，應將那一端放空，同時將檢測器用悶頭堵上。如果是FID，容許接在上面，但應該將檢測器溫度升上去。

2、毛細管柱：

?WCOT - 內表面涂有很薄的固定相，

?PLOT – 內表面涂有多孔的固體層或吸附劑，

?SCOT – 內表面先涂固態載體，然后再涂上固定相。

由于毛細管色譜柱柱效很高，對一般的樣品備用三種極性的柱子就能解決大部分問題，但對同分異構體要嚴格選用專用毛細管色譜柱。

3、色譜柱的選擇

按樣品極性選擇:

弱極性樣品，可選OV-1，SE-30，OV-101，SE-52，SE-54。

中極性樣品，可選OV-17，OV-1701，XE-60，OV-225，OV-210。

極性樣品，可選PEG-20M,FFAP,OV-275,DEGS。

4、按酸堿性選擇:

堿性樣品：弱堿性可選OV-1，SE-30等; 強堿性可選堿性PEGB《br》

酸性樣品：FFAP

5、按沸點選擇:

高沸點物質可選OV-1，SE-30，SE-54等交聯柱，薄液膜

6、毛細管內徑的選擇

成品分析：小口徑 0.25mm，0.32mm ，薄液膜

痕量組分分析：大口徑，厚液膜，0.53mm

7、條件設置：

汽化溫度：比樣品沸點高20～30℃；

柱溫：在樣品沸點的0.7倍處，再看分離情況調整；

檢測溫度 >柱溫 > 120℃(FID)；

分流比：小口徑>100:1 ;大口徑10～50:1或不分流進樣(用專用接頭)；

尾吹：15～30ml/分(滿足FID要求); 隔膜清掃氣：1～5ml/分；

進樣量：0.3～0.5μl；

定性與定量：定性與填充柱色譜一樣，或GC/MS；

定量：一般用歸一法或內標法定量；

8、操作步驟：

1).取出記錄本登記使用者和開始時間。

2).打開凈化器上的載氣開關閥，然后檢查是否漏氣，保證氣密性良好。

3).調節總流量為適當值(根據刻度的流量表測得)。

4).調節分流閥使分流流量為實驗所需的流量(用皂膜流量計在氣路系統面板上的《SPLIT VENT》實際測量)，柱流量即為總流量減去分流量。

5).調節尾吹流量控制閥使尾吹流量為適當值，并使尾吹流量與柱流量之和不低于載氣總流量。

6).打開凈化器的空氣、氫氣開關閥，調節空氣、氫氣流量為適當值。

7).根據實驗需要設置柱溫、進樣口溫度和FID檢測器溫度。

8).FID檢測器溫度達到150oC以上，按FIRE鍵點燃FID檢測器火焰。

9).設置FID檢測器靈敏度和輸出信號衰減。

10).如果基線不在零位，調節調零電位器A使FID輸出信號在紀錄儀或積分儀零位附近。待所設參數達到設置時，即可進行分析。

11).待所設參數達到設置時，即可進樣分析。

三、毛細管色譜柱老化步驟注意事項

1、老化的zui高溫度一般不要超過色譜柱的恒溫溫度上限，初次老化可以升溫至色譜柱zui高使用溫度（程序升溫溫度上限）老化一段時間，建議不超過10min；對于強極性色譜柱（如聚乙二醇固定相），建議采用較緩的程序升溫，如5°C/min。