液相色譜柱的安裝及使用

在運輸或不使用時，液相色譜柱的末端總是用插頭密封的。當色譜柱與色譜儀器系統連接時，首先拆下兩端的塞子。請注意，流動相流的方向與柱上標記的方向一致。除非出于特殊原因，如需要將柱倒置以清除在柱入口堵塞的污垢，建議用戶在連接柱時遵循柱標的方向。由于色譜柱的連接是整個色譜操作的一部分，如果密封套太緊，或者安裝不合適，或者密封套與色譜柱末端不匹配，就可能導致溶液泄漏。按照以下步驟將色譜柱連接到密封的卡套，以將色譜柱連接到HPLC系統：

（1）第一次使用的管道，請依次在管道上設置管道接頭和密封卡，外徑為1或16英寸。密封套的寬端應面向管道接頭。

(2)將管道緊密插入色譜柱的連接處，將密封套筒和管道接頭向前滑動，將管道接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋連接，然后擰緊管道接頭。如果管道是聚合物材料，請進入步驟(D)；如果是金屬管道，請繼續(C)。

（3）將管路推入柱端接頭后，用1/4”扳手進一步擰緊擰緊螺母。

(4)將上述方法應用于色譜柱的另一端。C18柱的液相為甲醇(或乙腈)水溶液。有機硅填料在儲存和運輸過程中可能會干涸。此時，推薦使用體積為10~20倍的純有機溶劑如甲醇、乙腈等來活化色譜柱。然后，色譜柱可以使用用戶自己選擇的流動相進行清洗。流速從0.1 ml/min逐漸增加到所需的操作條件，直到基線穩定。如果柱壓力和基線波動很大，這可能是由于氣泡進入柱。此時，色譜柱可在較高流速下洗滌2 min，5 min，例如4.6~150 mm色譜柱的流速可達2mL/min。

液相色譜柱使用

液相色譜柱是一種先分離混合物，然后利用液固或不混溶液體之間混合物分配比的差異進行分析和鑒別的儀器。根據固定相是液體還是固體，將液相色譜儀分為液-液色譜(LLC)和液-固色譜(LSC)。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、注液系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等組成。與傳統的液相色譜柱相比，具有高效、快速、靈敏的特點。采用液相色譜柱和核洗脫液對高沸點和難熔氣體混合物進行分離。用于生物醫學、環境化學、石化等部門。在選擇液相色譜柱之前，你應該更多地了解你自己的樣品和雜質，它們的類型和結構，極性，酸堿性，分子量等等。

（1）樣品是極性弱酸性的，C18可以在100%酸性水溶液中檢測到，也就是說，色譜柱具有100%純水，保留了良好的極性化合物。

（2）如果樣品的極性太強，或者酸性太強，也可以選擇由成都摩爾、液相色譜(親水色譜)、C18強陰離子對試劑或強陰離子交換柱提供的C18柱(缺點在于離子對試劑的平衡時間長，需要流動相pH更精確。否則，難以重復實驗，離子對試劑難以洗掉，而基本上離子對的色譜柱不能再用于其他實驗中）（成都摩爾科學儀器有限公司提供的GP-C18色譜柱）

（3）如果樣品是堿性的，可以選擇高純硅膠柱(高純硅膠不含金屬雜質和硅膠端封)或一些改良的C18柱(如極性包埋技術或堿失活技術等)，這樣可以減少堿性化合物的尾隨。一般選擇中性或偏堿性條件做，因為這會增加堿性樣品的保留率。

（4）如果堿性化合物的極性過強，或堿度過強，則液相色譜柱可選用較寬pH值的C18液相色譜柱進行高pH值檢測(優點是方法開發簡單，但目前采用該技術的色譜柱品牌較少。價格也很高)(Ametyst C18/H柱，由成都摩爾科學儀器有限公司提供)。或液相柱(硅膠柱在反相條件下使用，這也是檢測堿性樣品的經典方法)。強離子交換柱也可用于C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換柱。