離心機在血型選取上的應用

輸血時如血型不合會造成患者出現輸血的不良反應，因此使用相符的血型是輸血安全的前提保證。而作為人類的重要遺傳標志-血型，在近年科學的發展下，人們逐步探索分析，已發現300余種現人類紅細胞血型抗原。當今，世界多國正努力建立稀有血型細胞血庫，當中對所發現的稀有血型，如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等，建立起稀有血型系統，以保證為稀有血型的患者更加快速及時地提供合適紅細胞。

中國稀有血型篩選與建庫

在我們的臨床研究中，對于稀有血型的篩選工作和具體項目中，對于引發臨床不良輸血反應的稀有血型抗原或是表型組合是zui值得關注的，而事實證明這些稀有抗原或是表型組合往往存在于如Vel、Lan、Jk（a-b-）、Lu（a-b-）、Rhnull、OH等這些高頻率血型抗原組以及多個血型系統中，與此同時我們也對如Fy（a-b+）、Di（a+b-）等能引起輸血反應和新生兒溶血病的血型抗原的中國人特有的免疫反應而進行的篩選，并希望建立起符合我國國情的稀有血型庫。以此來解決我國臨床上的稀有血型不足、不良輸血反應的發生等問題來提高我國的輸血療效。
 

尿素溶血試驗

Jk（a-b-）表型的篩選：因稀有血型本身所具有特殊性，充分利用其特點設計出將其篩選出的方法，Kidd血型系統中Jk（a-b-），此種紅細胞可在2M的尿素溶液中使其紅細胞膜在6h以上的時間內保持完整性。而Jka和Jkb抗原的紅細胞在2M尿素溶液中完全溶血的時間不超過30s。其操作過程為：選取RSP加樣器設備將標本紅細胞稀釋到1%的懸液中，并在96孔微量板上加20ul懸液，再將100ul2mol/L尿素溶液加入其中，放置離心機中以800r/min轉速離心3min，溶血為陽性，不溶血為陰性，如為陰性者則進一步對血細胞做分子生物學分析。本次通過Jk（a-b-）尿素篩選實驗，獲得8名Jk（a-b-）表型獻血者。

試管法

將選取標本紅細胞稀釋為2-5%懸液，標記試管（抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H）并加入相應抗血清和標本紅細胞各50ul。采用直接離心法或間接抗球蛋白法，輕搖觀察結果；發生凝集為陽性，反之為陰性，共發現稀·臨床研究·有血型7例。

在我們對稀有血型篩選過程中，有4種稀有血型是采用篩選稀有等位基因的方法。通過采用PCR的定點誘變技術，我們成功構建出含有突變SNP位點的s和Oka血型等位基因的標準質粒，制備出稀有血型等位基因突變點片段，應用在對照分子生物學方法篩選稀有血型。組建多個多重PCR體系，檢測等位基因。