厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌,必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多,可根據實際情況選用。
1.厭氧缸法。接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然后手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產生二氧化碳,供細菌生長用。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養,簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環境。
上海書俊儀器設備有限公司為您提供厭氧培養解決方案,產品為美國進口Chemglass品牌的厭氧培養系列產品:
1螺紋厭氧培養管CLS-4208系列
16 x 125毫米螺紋管厭氧培養條件。 法蘭式閉鎖裝置,材質為丁基橡膠。 完整的套裝由一個一次性的玻璃管,丁塞和9毫米的開口螺帽組成。包裝規格為PACK OF100。
2鋁封厭氧培養管CLS-4209系列
螺紋厭氧管的改進版本。重新設計密封結構,最大化管口和膠塞之間的密封性,提升氣密密封穩定性。特殊配方的藍色氯化丁基橡膠瓶塞擁有更大的密封性能,并且支持注射器的重復穿刺。新設計的鋁密封避免了螺紋蓋可能沒有封閉緊固的風險。一次性玻璃管規格為18 x 150毫米,是由I型、B類硼硅玻璃制成。完整套裝包括一次性玻璃管,藍色氯化丁基橡膠瓶塞和鋁封。包裝規格為PACK OF100。
3厭氧培養瓶
維持厭氧條件下,厭氧瓶設計用于研究涉及產甲烷細菌、細胞培養、藥物發現、研究和開發。 這個瓶子是由Duran? Schott borosilicate glass制成。 瓶子是可以高溫滅菌的。每個瓶子有一個刻度,表示近似的體積,并且有一個書寫區域用于識別。 完整套裝包括一個瓶子,橡皮塞和鋁密封。注:可以提供塑料涂層瓶。
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