細胞周期阻滯
長期的細胞周期阻滯是老化細胞的基本特征,也是體外鑒定細胞老化不可或缺的指標。為了檢查細胞是否躍出了細胞周期,人們通常檢測增殖指示分子Ki-67的表達豐度;或者通過將與胸腺嘧啶相似的溴脫氧尿嘧啶(Bromodeoxyuridine,BrdU)摻入到細胞培養基中,觀察是否有新的DNA合成。細胞老化主要表現為G1期阻滯,個別情況下也可伴隨G2/M期周期阻滯,或直接由G2/M期阻滯誘發形成。
細胞形態改變
雖然由于細胞周期的中斷和DNA復制的停止,老化細胞內的DNA含量與正常細胞類似,但 RNA與蛋白質豐度均比正常細胞要明顯升高。這是因為,盡管細胞進入老化階段后蛋白質的整體合成速率降低,但是蛋白質的降解體系受到更加明顯的抑制,導致蛋白質在細胞內持續堆積。但,由于不同組織來源的細胞,其形態本就各不相同,因此,目前還并無客觀的、統一的標準從細胞形態判斷并定義老化細胞。換句話說,目前并不能直接根據細胞的形態去判斷是否老化細胞。
無論是原代細胞或是細胞株,在細胞培養過程中細胞老化現象是存在且常見的,但卻容易被操作人員忽略,老化的細胞會出現的特征包括:細胞增殖變慢、細胞核體積異常及多核(4-8核)、表面分泌物增多、細胞體積增大、細胞扁平、細胞質中出現空泡等現象。
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