1. 原理
利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。
2. 步驟
將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖,混合后于37℃溫育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法測定,以每小時每升尿液中釋放多少umol的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度。
3. 結果
IshiharaR等測定健康組尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1.gcreatinine-1。