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    尿海藻糖酶的酶活性的測定

    1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖,混合后于37℃溫育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法測定,以每小時每升尿液中釋放多少umol的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度。3. 結果IshiharaR等測定健康組尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1.gcreatinine-1。......閱讀全文

    尿海藻糖酶的酶活性的測定

    1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI

    尿海藻糖酶的酶含量的測定

    1. 原理利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。2. 步驟國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單克隆抗體,然后經過包被、封閉等步驟,用夾心ELISA方法測定出酶蛋白的濃度。3. 結果IshiharaR等用ELISA法測定健康組尿海藻糖酶蛋白的

    人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備

    國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法(HPLC)分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性(反相)和電荷(離子交換)方面的差別來實現樣品的分離的。反相HPLC的優點是分辨率大。利用分子生物學方法

    海藻糖酶的理化特性

    海藻糖酶是一種胞外酶,位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣,國際酶學編號為EC3.2.1.28,屬于水解酶類,它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37,在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物,腎臟中提純,經SDS-PAGE電泳顯示

    海藻糖酶的臨床應用

    急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說,急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論:急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍,而ELI

    蔗糖酶的活性怎么測定

    LS說的那個是定性分析,只能從程度上大概看出結果,不能得出比較精確的值,一般用比色法,分光光度法,和熒光法測出的較好,不過這個對儀器的要求高了

    海藻糖酶的基本信息

    海藻糖酶(trehalase)是葡萄糖苷酶(glucosidase)的一種,對海藻糖有特異作用,水解后成為2個分子的葡萄糖,EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人,除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外,在血漿α2-球蛋白部分中,也可檢出其活性,特別是在腎臟中活性很強。

    海藻糖酶的生物學特性

    在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用,有報道,缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉,而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說,尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。

    抗海藻糖酶單克隆抗體的制備

    通過腹腔注射加佐劑的重組蛋白或合成的多肽來免疫8周齡的雌性小鼠BALB/c,第一次免疫問隔兩周后,每周連續注射3-4次。最后一次注射后3-4天殺死小鼠,用改良的Kohler和Milstein方法將脾細胞與B細胞瘤株P3-X63-Ag8融合。細胞融合產生8種雜交瘤克隆株:KM2275、KM2276、K

    酶活性測定的方式

      酶促反應速度的測定可采用兩種方式:  一、測定完成一定量反應所需的時間;  二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法,后者稱為動力學法。  終點法  該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據反應進行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時間長短來估計酶的活力。  其

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