照高效液相色譜法（中國藥典1990年版二部附錄34頁）測定。
系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以戊燒磺酸鈉溶液[取戊烷磺酸鈉0。96g與乙二胺四醋酸二銅1。86g，加醋酸液（0。08mol/L）使溶解并稀釋至1000ml，用氨水調節PH值至4。3]-甲醇-乙睛（64：22：14）為流動相，檢測波長為291nm，理論板數按培洛霉素峰計算應不低于700。
測定法 取本品5瓶，稱出平均裝量，取內容物，混勻。精密稱取適量，加水制成每1ml中含1mg的溶液，搖勻，取10-20μl注入液相色譜儀，另取硫酸培洛霉素對照品同法測定，按外標法計算供試品中培洛霉素的含量，即得。
