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傳統純化工藝中,從發酵液中純化聚賴氨酸包括離心、膜過濾、離子交換、脫色等流程,過程復雜,回收率低。優化采用離子交換樹脂純化聚賴氨酸工藝后,雖然聚賴氨酸的純度達到97.10%,但是回收率只有66.01%。而且,離子交換操作過程中產生的含鹽廢水等也帶來了經濟和環境問題。
研究團隊巧妙地設計出“沉淀-解聚-沉淀”等步驟,當果膠與聚賴氨酸質量比為8:1時,可從預處理的發酵液中100%分離聚賴氨酸,再利用聚賴氨酸和果膠的電荷特性進一步將果膠從聚賴氨酸中沉淀。利用這一方法,研究人員探索出從發酵液中提高聚賴氨酸回收率的工藝參數。另外,研究人員對得到的果膠-聚賴氨酸復合物進行了生物活性實驗,結果表明ABTS自由基清除能力的IC50從4.03 mg/mL降低到1.03 mg/mL,細胞存活率從53%提高到90%以上,聚賴氨酸抑菌濃度降低到原來1/3,均具有了顯著改善。
該項工作建立了一套全新的聚賴氨酸生產工藝,該生產工藝流程簡單,綠色環保,其產品果膠-聚賴氨酸復合物具有更為突出的抑菌表現,相較于單純的聚賴氨酸具有更加廣闊的應用潛力和市場前景。
圖1 (A)傳統聚賴氨酸制備工藝流程圖:(1) 新鮮發酵液,(2)6 M HCl,(3)6 M NaOH,(4)1 M HCl,(5)去離子水,(6)1 M NaOH,(7)0.25 M HCl,(8)40% 乙醇水溶液;(B)該研究中果膠法分離聚賴氨酸的方法
圖2 研究實驗結果
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